本发明专利技术涉及制备检测样品中汞离子的高选择性比色探针的方法。具体地，将7‑羟基香豆素溶于THF中，在氮气保护的条件下慢慢滴加硒粉的THF溶液，室温搅拌，加入溶于三乙胺和THF混合溶液的二苯基氯化膦，氮气保护下搅拌反应，旋干溶剂，加入甲苯用分水器回洗，除去固体，将有机相旋干，用柱层析分离提纯目标产物。本发明专利技术所合成的探针对汞离子特异性响应，并不受共存离子K+、Na+、Mg2+、Zn2+、Ni2+、Cr3+、Cd2+、Pb2+、Cu2+的干扰，对Hg2+的选择性很好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种制备比色探针的方法，该比色探针可用于检测样品中汞离子的浓度或含量。技术背景汞是一种易挥发且具有严重毒性的元素，汞元素一旦进入水体，环境中的汞离子就会被细菌转化为有机汞(如甲基汞等)，并且会一直累积在生物体内，经食物链富集作用，最后被人类以及其他动物例如鸟类吸收产生危害。汞和它的衍生物会破坏生物体分子结构，这是由于汞离子可以和蛋白质、酶中的含硫的基团结合。尤其是甲基汞，会严重毒害动物的神经，造成动物的行为感知紊乱，毒害神经和肾脏，对人类以及其他动物例如鸟类的产生很大威胁。鸟的羽毛和卵对汞富集程度高，水源中汞离子含量对鸟类群落结构或者种群的影响是显而易见的，另外鸟类是环境的指示剂。所以政府部门监测水环境中汞的含量是至关重要的。因此，研究和开发更具高选择性、更加快速、更高灵敏度的可以在自然水体等环境中实时汞离子含量检测的方法是非常重要的，因为如此一来可以追踪水源中汞离子含量或其变化对鸟类群落结构或者种群的影响。目前，常见的汞元素检测手段主要是传统的双硫腙法比色法、阳极溶出伏安法、氧化还原电位法、电感耦合等离子体-质谱、原子吸收/发射光谱法、X射线荧光光谱法等。但在实际应用中，这些检测方法费用高且操作复杂。而荧光探针检测法由于具有便捷性好、选择性、灵敏度高等优点而极为引人注目。近年来，正是处于上述的种种背景下才使得汞离子荧光探针的研究得到越来越多的学者的关注。中国专利申请201610463837.9公开了一种基于萘酰亚胺的汞离子荧光探针及其制备方法和应用，所制备的汞离子荧光探针是以1,8-萘酰亚胺为荧光母体，依次通过与正丁胺反应，得到强荧光性的中间体N-丁基-4-溴-1,8-萘酰亚胺，所得中间体与2-甲氧基苄胺反应引入氮原子和氧原子，增强该化合物和金属离子的配位能力，检测过程中专利技术的该小分子传感器上的氮原子和氧原子能很快地和汞离子发生配位，使荧光迅速增强，从而实现对汞离子的检测。中国专利申请201610397020.6公开了一种柠檬酸酯类荧光化合物，以二环己基碳二亚胺作为催化剂，不仅可以活化羧基，起到活化作用，还可以作为缚水剂，吸收酯化反应过程中产生的水，使得反应向生成酯的方向进行；通过简单的制备方法、较低的温度和较短的时间就可以得到荧光强度较高的黄绿色的柠檬酸酯类荧光化合物，荧光量子产率可达5.0％。中国专利申请201610112770.4公开了一种检测汞离子的新型罗丹明荧光探针及其制备方法，属于荧光探针及其制备方法
该申请除了公开了罗丹明荧光探针的结构，还公开了罗丹明荧光探针的制备方法：将罗丹明B与水合肼在乙醇中回流反应生成罗丹明酰肼；然后与苯基乙二醛在乙醇中回流反应，经重结晶得到席夫碱；再经硼氢化钠还原生成荧光探针。中国专利申请201511031104.X公开了一种汞离子荧光探针化合物、制备方法及应用，涉及分析化学
该汞离子荧光探针的化学分子式为，是由2-(2’-羟苯基)苯并咪唑为母体结构，经过衍生化得到的。此探针对汞离子选择性好、灵敏度高且易于制备，是一种理想的汞离子传感分子。根据汞离子与探针分子的作用类型，可以将汞离子荧光探针分为配位型和反应型两大类，配位型的荧光探针通过非共价键的形式将荧光探针和汞离子相络合，但是这种络作用力在应用于汞离子识别时，专一选择性并不高，而反应型的探针是基于二者之间的化学反应，会生成新的反应产物，进而引起体系的荧光或紫外吸收光谱发生改变，有很强的专一选择性，所以这种类型的探针具备更高的灵敏度和良好的抗阳离子干扰能力。
技术实现思路
本领域急需一种制备简单的高选择性比色比率测定Hg2+的方法，从而能够有效检测特别是能够检测环境中(例如鸟类栖息地中水源)的Hg2+。本专利技术的专利技术人设计合成了一种脱硒作用来识别汞离子的探针，建立了一种可以用于汞离子含量检测的方法。为此，本专利技术提出了一种制备新颖的高选择性比色比率检测Hg2+的探针的方法，该探针的制备简单，和/或选择性高，并利用该探针能够测定样品中的Hg2+浓度。本专利技术提供了制备检测样品中(例如鸟类栖息地中水源)的Hg2+的高选择性比色探针的方法，其合成路线如下：示例性地，本专利技术中所述的环境是指水源地，例如鸟类栖息地中水源。所述水源的存在形式可以为河流，湖泊，沟渠等。具体地，将7-羟基香豆素溶于THF中，在氮气保护的条件下慢慢滴加硒粉的THF溶液，室温搅拌，加入溶于三乙胺和THF混合溶液的二苯基氯化膦，氮气保护下搅拌反应，旋干溶剂，加入甲苯用分水器回洗，除去固体，将有机相旋干，用柱层析分离提纯目标产物。更具体地，将7-羟基香豆素(0.49g，3mmol)溶于THF(2mL)中，在氮气保护的条件下慢慢滴加硒粉(0.19g，24mmol)THF(5mL)溶液，室温搅拌10min，加入溶于三乙胺(2mL)和THF(20mL)混合溶液的二苯基氯化膦(0.53g，24mmol)，氮气保护下搅拌反应24h，旋干溶剂，加入25mL甲苯用分水器回洗4h，除去固体，将有机相旋干，用柱层析分离提纯目标产物。附图说明图1：探针(5μmol/L)在pH7.4PBS乙醇/水(5：5)的缓冲溶液中随汞离子浓度(0-10μmol/L)改变的荧光发射光谱图，插入图表示探针(5μmol/L)456nm处的荧光强度随汞离子浓度(0-10μmol/L)的改变。汞离子的浓度从下到上分别为0，0.5，1，2，2.5，3，3.5，4，4.5，5，6，7，8，9，10μmol/L。图2：探针对汞离子响应的工作曲线。图3：探针(5μmol/L)在pH7.4PBS乙醇/水(5：5)的缓冲溶液中对汞离子(2.5μmol/L)响应随时间变化关系。图4：在pH7.4PBS乙醇/水(5：5)的缓冲溶液中不同金属离子(3μmol/L)对探针(5μmol/L)荧光强度的影响。F：加入不同金属离子的荧光强度；F0：不加金属离子的荧光强度。图5：不同金属离子共存对探针荧光强度的影响。1：空白；2：汞离子；3：汞离子+镍离子；4：汞离子+镁离子；5：汞离子+钠离子；6：汞离子+铬离子；7：汞离子+锌离子；8：汞离子+铅离子；9：汞离子+铜离子；10：汞离子+钾离子；11：汞离子+镉离子。实施例1：荧光探针的合成本专利技术的汞离子荧光探针的合成路线和方法如下所示：具体地，将7-羟基香豆素(0.49g，3mmol)溶于THF(2mL)中，在氮气保护的条件下慢慢滴加硒粉(0.19g，24mmol)THF(5mL)溶液，室温搅拌10min，加入溶于三乙胺(2mL)和THF(20mL)混合溶液的二苯基氯化膦(0.53g，24mmol)，氮气保护下搅拌反应24h，旋干溶剂，加入25mL甲苯用分水器回洗4h，除去固体，将有机相旋干，用柱层析分离提纯目标产物(二氯甲烷：石油醚＝1：1)，得到1.01g红色粉末状荧光探针，产率52％。1HNMR(400MHz,D2O)δ7.77-7.68(m,6H),7.62(dd,J＝10.9,4.0Hz,1H),7.55-7.43(m,8H).[M+H]+C21H16O3PSe427.0，发现427.0。实施例2：反应试剂的配制探针储备液和探针测试液：准确称取4.26mg的实施例1中所合成的探针，先用少量二氯甲本文档来自技高网...
【技术保护点】
制备检测样品中的Hg2+的高选择性比色探针的方法，其通过如下的合成路线合成：
【技术特征摘要】
1.制备检测样品中的Hg2+的高选择性比色探针的方法，其通过如下的合成路线合成：2.根据权利要求1所述的方法，其中所述的样品是指水源地。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述水源地是鸟类栖息地中水源。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述水源的存在形式可以为河流，湖泊，沟渠等。5.根据权利要求1所述的方法，其中将7-羟基香豆素溶于THF中，在氮气保护的条件下慢慢滴加硒粉的THF溶液，室温搅拌，加入溶于三乙胺和THF混合溶液的二苯基氯化膦，氮气保...
【专利技术属性】
技术研发人员：文陇英，刘方庆，杨佐忠，邓加林，赵文海，
申请(专利权)人：乐山师范学院，
类型：发明
国别省市：四川;51
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