The invention discloses a method for short wave infrared fluorescence microscopic imaging. The invention adopts the near infrared light or visible light source as the excitation light source shortwave infrared fluorescent probe, excitation light source lens after convergence in the shortwave infrared fluorescent specimens and emit fluorescence, fluorescence is objective to collect, and through the beam splitter separation of excitation light and fluorescence signals, only fluorescence signal arrival shortwave infrared shortwave infrared camera. The camera video signal is transmitted to a computer, real-time implementation of shortwave infrared fluorescence imaging of specimens. On this basis, by adjusting the relative position between the fluorescent sample and the objective lens, the fluorescence imaging of the specimen at different depths can be obtained. The present invention compared with the traditional observation in the visible band method with fluorescence microscopy, biological tissue penetration depth and small biological damage etc.; compared to the shortwave infrared fluorescent macro imaging method, with high resolution, high magnification imaging, video microscopy, chromatography fluorescence imaging etc..
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于应用光学的显微成像领域,是一种结合了传统荧光显微成像技术和短波红外技术的短波红外荧光显微成像系统(Short-waveInfraredFluorescenceMicroscope简称SWIRFM)。
技术介绍
荧光显微镜已经广泛应用于生物研究,相较于传统的透射式显微成像,荧光显微成像可以提供更高的成像信噪比,且将荧光材料用于标本的特异性标记,更有利于提取特异性位置的显微信息。常见的荧光显微成像系统遵循基本的反射荧光激发设计,它主要包括光源部分、分束器部分、物镜、荧光标本和成像部分。其原理是标本中的荧光材料被来自物镜的激发光照射并产生荧光,荧光被物镜收集用以成像,其中分束器(如二向色镜)用来分开激发光和荧光。在生物应用的研究中,随着不同荧光剂的出现,可以实现细胞或者生物组织的特异性标记,也使得荧光显微镜广泛地应用于生物医学领域的研究。在荧光显微成像技术基础上的激光扫描共聚焦显微成像技术和多光子荧光扫描显微成像技术也极大地扩展了荧光显微镜的应用范围。短波红外(Short-waveInfrared简称SWIR)成像技术是一种新型的成像方法,目前主要应用于军事领域。通常短波红外是指在0.9-1.7的近红外波段,相较于可见光(一般指波长范围为380nm-780nm的光)而言,生物组织对该波段的光具有较小的散射,有利于提高生物成像的深度。此外,在生物成像领域,短波红外波段的光相较于可见光具有更小的光损伤,因此,短波红外成像十分有利于生物医学的研究。在此基础上,短波红外荧光宏观成像系统已经投入使用,通过引入短波红外荧光材料,选择特定的激发光和分束器,可以 ...
【技术保护点】
一种短波红外荧光显微成像的方法,所使用的装置包括近红外光源或可见光光源、光路爬高系统、扩束系统、二向色镜、物镜、成像透镜、短波红外相机和计算机,其特征在于:将外置的近红外光源或可见光光源通过一个光路爬高系统引入成像光路模块,激发光源在成像光路模块中经过由扫描透镜和镜筒透镜组成的扩束系统扩束,扩束光再经过一块短反长透的二向色镜反射,经物镜汇聚到荧光标本上激发短波红外荧光探针发出荧光信号,激发出的荧光信号经由物镜收集通过二向色镜,二向色镜分离出的荧光信号再经成像透镜被短波红外相机所接收,相机再将视频信号发送至计算机,实现标本的实时短波红外视频显微成像。
【技术特征摘要】
1.一种短波红外荧光显微成像的方法,所使用的装置包括近红外光源或可见光光源、光路爬高系统、扩束系统、二向色镜、物镜、成像透镜、短波红外相机和计算机,其特征在于:将外置的近红外光源或可见光光源通过一个光路爬高系统引入成像光路模块,激发光源在成像光路模块中经过由扫描透镜和镜筒透镜组成的扩束系统扩束,扩束光再经过一块短反长透的二向色镜反射,经物镜汇聚到荧光标本上激发短波红外荧光探针发出荧光信号,激发出的荧光信号经由物镜收集通过二向色镜,二向色镜分离出的荧光信号再经成像透镜被短波红外相机所接收,相机再将视频信号发送至计算机,实现标本的实时短波红外视频显微成像。2.根据权利要求1所述的一种短波红外荧光显微成像的方法,其特征在于:通过调节标本与物镜之间的相对位置,可获得标本不同深度的荧光层析成像。3.根据权利要求1所述的一种短波红外荧光显微成像的方法,其特征在于:二向色镜为Semrock公司生产的785nm短波长反射二向色镜,型号为LPD01-785。4.根据权...
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