用于诊断蠕虫感染的新型测定制造技术

本发明专利技术涉及一种诊断上有用的载体，其包含用于在来自受试者的样品中特异性捕获来自多腔棘孢的p21的抗体的装置；包含所述诊断上有用载体的试剂盒，优选还包含用于检测任何捕获的抗体的工具；包括以下步骤的方法：检测来自受试者的样品中来自多花地棘球菌的p21的抗体的存在或不存在；来自多房棘球绦虫或其变体的p21用于增加诊断可靠性，优选用于检测棘球绦虫感染的测定的灵敏度，优选用于区分棘球绦虫感染与粒细胞球蛋白感染的用途；来自多房棘球绦虫的分子量为21kDa的多肽，通过使用凝胶电泳根据分子量分离多棘球绦虫的提取物，或其变体或所述多肽的抗体而获得。

A new method for the diagnosis of helminth infections

The invention relates to a diagnostically useful vector, which contains in a sample from a subject in antibody capture from multi cavity asperellum p21 device; including the diagnostically useful vector kit, preferably also contains the antibody used to detect any capture tool; the method includes the following steps: p21 antibody from the spine aureus spend detection from a sample of subjects in the presence or absence of; from Echinococcus multilocularis or its variants of the p21 used to increase the diagnostic reliability, preferably for sensitivity test of Echinococcus infection, preferably used to differentiate Echinococcus infection and the use of granulocyte globulin infection; molecular weight from Echinococcus multilocularis 21kDa polypeptide extracts obtained by using gel electrophoresis according to the molecular weight separation of Echinococcus, or its variants or the Peptide antibody obtained.

【技术实现步骤摘要】
专利
本专利技术涉及包含用于特异性捕获来自受试者的样品中的针对来自多房棘球绦虫(Echinococcusmultilocularis)的p21的抗体的工具的诊断上有用的载体；包含所述诊断上有用的载体的试剂盒，其优选还包含用于检测任何捕获的抗体的工具；包括在来自受试者的样品中检测针对来自多房棘球绦虫的p21的抗体的存在或不存在的步骤的方法；来自多房棘球绦虫的p21或其变体用于增加诊断可靠性，优选用于增加检测棘球绦虫(Echinococcus)感染的测定的灵敏度，优选用于区分多房棘球绦虫感染与细粒棘球绦虫(Echinococcusgranulosus)感染的用途；来自多房棘球绦虫以21kDa的分子量电泳的多肽或其变体或针对所述多肽的抗体，所述多肽可以通过使用凝胶电泳根据分子量分离来自多棘球绦虫的提取物来获得。专利技术背景蠕虫感染或寄生虫感染(也被称为蠕虫病)是可传播至哺乳动物例如人、狗、狐狸和狼的宏观寄生虫疾病，其特征在于蠕虫(例如棘球绦虫类型的绦虫)对机体的感染。多房棘球绦虫和细粒棘球绦虫是世界上的主要寄生虫中的两种。超过一百万人在任何一次感染它们中的一种。存在两种主要类型的棘球绦虫感染：囊型棘球绦虫病和泡型棘球绦虫病。人体感染发生在摄入卵后。幼虫在宿主肠中释放，穿透肠绒毛并迁移至各种器官。这种疾病经常开始没有症状，并且这可能持续一年。发生的症状和体征随后取决于孢囊的位置和大小。泡型疾病通常在肝脏中开始，但可以扩散到身体的其它部分，例如肺或脑。当肝脏受影响时，人可能患腹痛以及体重减轻并发黄。肺部疾病可能导致胸痛、气短和咳嗽。在不进行治疗的情况下，棘球绦虫感染可能是致命的。由于患者可能一段时间无症状，并且随着疾病进展提供有效的治疗会变得越来越困难，所以用于人蠕虫感染的早期血清诊断的可靠工具是被高度追求的。感染棘球绦虫的患者显示各种免疫反应(Gottstein,B.,Mesarina,B.,Tanner,I.,Ammann,R.W.,Wilson,j.F.,Eckert,J.Lanier,A.(1991):SpecificCellularandHumoralImmuneResponsesinPatientswithDifferentLong-TermCoursesofAlveolarEchinococcosis(InfectionwithEchinococcusmultilocularis).Am.J.TropMed.Hy.45,734-742)。因此，基于天然抗原(其可从全蠕虫或体外培养物中提取)的常规免疫测定可以用于免疫印迹以检测针对寄生虫的宿主抗体(Ayadi,A.,Dutoit,B.,Sendid,B.,andCamus,D(1995):SpecificDiagnosticAntigensofEchinococcusgranulosusdetectedbyWesternBlot.Parasite2,119-123)。这样的测定可商购获得，例如获自EUROIMMUN,Lübeck(抗-细粒棘球绦虫蛋白质印迹)。这些天然抗原在可用性方面受到限制，遭受批次间变化并且缺乏期望的诊断可靠性程度。进一步的缺点包括这样的事实：它们往往是交叉反应性的，即被来自感染有两个或更多个蠕虫物种的患者的血清识别。除了检测棘球绦虫以外，寄生虫学家还对区分细粒棘球绦虫与多房棘球绦虫感兴趣。尽管这两种寄生虫的幼虫主要在肝脏中发现，但它们在整个宿主体内的分布在发育晚期不同，对治疗感染的患者具有显著影响。例如，细粒棘球绦虫最常发现在肺中，而多房棘球绦虫可进入宿主的肺和大脑二者。因此，本专利技术涉及的问题是提供用于或帮助检测棘球绦虫感染的测定，所述测定相较于现有技术测定在其多个缺点中的一个或多个方面得到改善。本专利技术涉及的另一问题是提供用于检测棘球绦虫的测定，其相较于现有技术测定，关于多房棘球绦虫和细粒棘球绦虫感染的检测在特异性和/或灵敏度方面具有较高程度的可靠性。本专利技术涉及的另一问题是提供相较于现有技术测定关于多房棘球绦虫与细粒棘球绦虫感染之间的区别具有较高程度的可靠性的测定。专利技术描述本专利技术涉及的问题通过所附独立和从属权利要求的主题来解决。在第一方面，本专利技术涉及的问题通过一种诊断上有用的载体来解决，所述载体包含用于特异性捕获来自受试者的样品中的针对来自多房棘球绦虫的p21的抗体的工具。在第一方面的优选实施方案中，所述载体还包含用于特异性捕获针对一种或多种多肽的抗体的工具，所述一种或多种多肽选自包含来自多房棘球绦虫的p7、p16/18和p25/26，优选其全部的组。在第一方面的另一优选实施方案中，用于特异性捕获针对来自包含来自多房棘球绦虫的p21、p7、p16/18和p25/26的组的多肽的抗体的工具是来自包含来自多房棘球绦虫的p21、p7、p16/18和p25/26的组的各多肽或其变体，优选为天然形式的多肽。在第一方面的另一优选实施方案中，用于特异性捕获针对来自包含来自多房棘球绦虫的p21、p7、p16/18和p25/26的组的多肽的抗体的工具以来自棘球绦虫(优选多房棘球绦虫，更优选根据分子量分离的)的多肽提取物的形式提供，并且其中所述多肽提取物包含来自多房棘球绦虫的p16/18和p21，其被充分分离以允许区分针对p16/18的抗体和针对p21的另一抗体。具体地，载体上的p16/18和p21之间的距离使得与它们相关的条带不重叠至这样的程度，所述程度使得指示抗体与p16/18的结合的信号不能与指示抗体与p21结合的信号区分开。换句话说，载体可用于检测样品中是否存在针对p16/18的抗体、针对p21的抗体或针对p16/18和p21两者的抗体。在任一方面的另一优选实施方案中，载体还包含用于特异性捕获针对选自包含来自细粒棘球绦虫的AgB8/1a、AgB8/1b、AgB8/2、AgB8/3、AgB8/4a和AgB8/4b、来自多房棘球绦虫的Em18和Em95、优选其全部的组的一种或多种多肽的抗体的工具。在第一方面的另一优选实施方案中，用于特异性捕获针对选自包含来自细粒棘球绦虫的AgB8/1a、AgB8/1b、AgB8/2、AgB8/3、AgB8/4a和AgB8/4b、来自多房棘球绦虫的Em18和Em95的组的一种或多种多肽的抗体的工具是来自包含来自细粒棘球绦虫的AgB8/1a、AgB8/1b、AgB8/2、AgB8/3、AgB8/4a和AgB8/4b、来自多房棘球绦虫的Em18和Em95的组的各多肽或其变体，优选以一种或多种重组和/或纯化的多肽的形式提供。在第二方面，本专利技术涉及的问题通过包含根据本专利技术的诊断上有用的载体的试剂盒来解决，所述试剂盒优选还包含用于检测任何捕获的抗体的工具。在第三方面，本专利技术涉及的问题通过包括以下步骤的方法来解决：在来自受试者的样品中检测针对来自多房棘球绦虫的p21的抗体。在第三方面的优选实施方案中，所述方法还包括检测针对选自包含p7、p16/18和p25/26，优选其全部，更优选p7和p16/18，更优选p7的组的一种或多种多肽的抗体。在第三方面的另一优选实施方案中，所述方法还包括检测针对选自包含来自细粒棘球绦虫的AgB8/1a、AgB8本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诊断上有用的载体，其包含用于特异性捕获来自受试者的样品中的针对来自多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis)的p21的抗体的工具。

【技术特征摘要】
2015.10.16 EP 15002958.51.一种诊断上有用的载体，其包含用于特异性捕获来自受试者的样品中的针对来自多房棘球绦虫(Echinococcusmultilocularis)的p21的抗体的工具。2.根据权利要求1所述的诊断上有用的载体，其中所述载体还包含用于特异性捕获针对一种或多种多肽的抗体的工具，所述一种或多种多肽选自包含来自多房棘球绦虫的p7、p16/18和p25/26，优选其全部的组。3.根据权利要求1至2中任一项所述的诊断上有用的载体，其中用于特异性捕获针对来自包含来自多房棘球绦虫的p21、p7、p16/18和p25/26的组的多肽的抗体的工具是来自包含来自多房棘球绦虫的p21、p7、p16/18和p25/26的组的各多肽或其变体，优选为天然形式的多肽。4.根据权利要求1至3中任一项所述的诊断上有用的载体，其中用于特异性捕获针对来自包含来自多房棘球绦虫的p21、p7、p16/18和p25/26的组的多肽的抗体的工具以来自棘球绦虫优选根据分子量分离的多房棘球绦虫的多肽提取物的形式提供，其中所述多肽提取物包含p16/18和p21，其被充分分离以允许区分针对p16/18的抗体和针对p21的另一抗体。5.根据权利要求1至4中任一项所述的诊断上有用的载体，其还包含用于特异性捕获针对选自包含来自细粒棘球绦虫(Echinococcusgranulosus)的AgB8/1a、AgB8/1b、AgB8/2、AgB8/3、AgB8/4a和AgB8/4b、来自多房棘球绦虫的Em18和Em95、优选其全部的组的一种或多种多肽的抗体的工具。6.根据权利要求5所述的诊断上有用的载体，其中用于特异性捕获针对选自包含来自细粒棘球绦虫的AgB8/1a、AgB8/1b、AgB8/2、AgB8/3、AgB8...

【专利技术属性】
技术研发人员：T·舍佩尔，W·迈尔，L·舍恩费尔德，B·戈特施泰因，M·斯皮利奥蒂斯，
申请(专利权)人：欧蒙医学诊断技术有限公司，伯尔尼大学，
类型：发明
国别省市：德国;DE