生物组织分散用组合物制造技术

本发明专利技术的目的是，以高效率从来自生物组织的样品获得增殖性高的细胞。本发明专利技术提供用于使生物组织分散的组合物，所述组合物的处方溶液中的胶原酶活性通过FALGPA分解活性测定的方法测定为0.30U/mL-10U/mL，所述组合物的处方浓度中的胰蛋白酶活性通过BAEE水解活性测定的方法测定为0U/mL-30U/mL。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于使生物组织分散的组合物。另外，本专利技术涉及滴块状凝胶中包埋的细胞的培养结果的评价方法。进一步地，本专利技术涉及来自生物组织的细胞的获得方法。另外，本专利技术涉及用于进行上述方法的试剂盒。
技术介绍
尽管抗癌剂也作用于正常细胞而存在表现强副作用的情况，但抗癌剂的奏效率，除了一部分以外不满50％，抗癌剂的有效程度已知随患者而大大不同。因此，希望在癌症患者接受抗癌剂的施用的治疗前，评价预定施用的抗癌剂对该癌症患者是否有效，避免无效抗癌剂的不需要的施用，减少患者的身体上、经济上的负担，避免治疗机会的失去。作为如此的抗癌作用的评价方法，已知在模拟生物的滴块状凝胶中，以3维增殖癌细胞，使其与抗癌剂接触，评价增殖结果的方法(专利文献1-11)，希望在滴块状凝胶中获得与生物内同样地增殖的细胞。专利文献1-7中，作为在从来自生物组织的样品获得细胞时应用的酶，记载了应用胶原酶、透明质酸酶、脱氧核糖核酸酶、弹性蛋白酶、分散酶等。另外，专利文献9-11中记载了，将生物组织以包含选自梭菌属中性蛋白酶、嗜热菌蛋白酶(サーモライシン)、以及分散酶的1种以上蛋白酶，以及选自胶原酶I、胶原酶II、以及胶原酶IV的1种以上胶原酶的混合酶进行处理。另外，非专利文献1-21中记载了使生物细胞分散的酶。在这些文献中记载了，通过I型胶原酶、II型胶原酶、III型胶原酶、IV型胶原酶、胰蛋白酶、透明质酸酶、神经氨酸酶等处理来自生物组织的样品。现有技术文献专利文献专利文献1：日本专利2879978号公报专利文献2：日本特开平3-285696号公报专利文献3：日本特开平7-31470号公报专利文献4：日本特开平7-241190号公报专利文献5：日本特开平10-115612号公报专利文献6：日本特开2003-9853号公报专利文献7：日本特开2008-11797号公报专利文献8：日本特开2005-95058号公报专利文献9：日本特开2010-227088号公报专利文献10：日本特开2011-115106号公报专利文献11：国际公开第2011/090068号。非专利文献非专利文献1：Zhou,J,Belov,L.,Solomon,M.,Chan,C.,Clarke,S.andChristopherson,R.:ColorectalCancerCellSurfaceProteinProfilingUsinganAntibodyMicroarrayandFluorescenceMultiplexing.,JVisExp55,e3322,2011非专利文献2：Quintana,E.,Shackleton,M.,Foster,H.,Fullen,D.,Sabel,M.,Johnson,T.andMorrison,S.:PhenotypicHeterogeneityAmongTumorigenicMelanomaCellsfromPatientsthatisReversibleandNotHierarchicallyOrganized.,CancerCellVol.18,,,510,2010非专利文献3：Kim,M.,Evans,D.,Wang,H.,Abbruzzese,J.,Fleming,J.andGallick,G.:GenerationofOrthotopicandHeterotopicHumanPancreaticCancerXenograftsinImmunodeficientMice.,NatProtoc4,1670,2009非专利文献4：Sauvageot,C.,Weatherbee,J.,Kesari,S.,Winters,S.,Barnes,J.,Dellagatta,J.,Ramakrishna,N.,Stiles,C.,Kung,A.,Kieran,M.andWen,P.:EfficacyoftheHSP90Inhibitor17-AAGinHumanGliomaCellLinesandTumorigenicGliomaStemCells.,NeuroOncolVol.11,,,109,2009非专利文献5：Liu,R.,Wang,X.,Chen,G.,Dalerba,P.,Gurney,A.,Hoey,T.,Sherlock,G.,Lewicki,J.,Shedden,K.andClarke,M.:ThePrognosticRoleofaGeneSignaturefromTumorigenicBreast-CancerCells.,NEnglJMed356,217,2007非专利文献6：NakashiroKoh-Ichi,HaraShingo,ShinoharaYuji,OyasuMiho,KawamataHitoshi,ShintaniSatoru,HamakawaHiroyuki,OyasuRyoichi:Phenotypicswitchfromparacrinetoautocrineroleofhepatocytegrowthfactorinanandrogen-independenthumanprostaticcarcinomacellline,CWR22R,AmJPathol165,533-40,2004非专利文献7：NishioJun,IwasakiHiroshi,IshiguroMasko,OhjimiYuko,FujitaChikako,IsayamaTeruto,NaitoMasatoshi,OdaYoshinao,KanekoYasuhiko,KikuchiMasahiro:Establishmentofanewhumansynovialsarcomacellline,FU-SY-1,thatexpressesc-Metreceptoranditsligandhepatocytegrowthfactor,IntJOncol21,17-23,2002非专利文献8：EmenakerN,CalafG,CoxD,BassonMandQureshiN:Shortchainfattyacidsdifferentiallymodulatecellularphenotypeandc-mycproteinlevelsinprimaryhumannonmalignantandmalignantcolonocytes,JNutr46,96-105,2001非专利文献9：MacLeod,R:RapidMonolayerPrimaryCellCulturefromTissueBiopsy,C本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于使生物组织分散的组合物，所述组合物的处方溶液中的胶原酶活性通过FALGPA分解活性测定的方法测定为0.30U/mL‑10U/mL，所述组合物的处方溶液中的胰蛋白酶活性通过BAEE水解活性测定的方法测定为0U/mL‑30U/mL。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.11.12 JP 2013-2340361.用于使生物组织分散的组合物，所述组合物的处方溶液中的胶原酶活性通过FALGPA
分解活性测定的方法测定为0.30U/mL-10U/mL，所述组合物的处方溶液中的胰蛋白酶活性
通过BAEE水解活性测定的方法测定为0U/mL-30U/mL。
2.权利要求1的组合物，其用于药剂评价。
3.权利要求1或2的组合物，其中生物组织是癌组织。
4.来自生物组织的细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：宫川功，河村圣子，小林昶运，
申请(专利权)人：仓敷纺绩株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP