一种鉴定止咳平喘类中药中是否添加茶碱咖啡因可可碱中的一种或多种化学药品的方法技术

本发明专利技术涉及医药分析技术领域，具体是一种鉴定止咳平喘类中药中是否添加茶碱咖啡因可可碱中的一种或多种化学药品的方法，包括以下步骤：待测溶液pH的预调节；一维动态表面增强拉曼光谱图的采集；pH依赖‑二维相关表面增强拉曼光谱图的绘制；根据二维相关谱图对待测样品中是否添加茶碱、可可碱、咖啡因中一种或多种化学药品进行鉴定。本发明专利技术的pH预调节步骤，保证pH自发变化发生在物质最敏感的范围，得到更具特征性的动态变化拉曼图谱，特异性强，灵敏度高，操作步骤简单，检测时间短，能够对止咳平喘中药中是否添加茶碱或咖啡因或可可碱进行准确鉴别。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药分析
，具体地说，是一种鉴定止咳平喘类中药中是否添加茶碱咖啡因可可碱中的一种或多种化学药品的方法。
技术介绍
近年来，一些药厂为了加快中药疗效，谋求高额利益，在止咳平喘中药中添加了西药茶碱、可可碱、咖啡因中的一种或同时添加多种甲基嘌呤类的药物。这些药具有强心、利尿、扩张冠状动脉、松弛支气管平滑肌和兴奋中枢神经系统等作用，可以快速起效，使止咳平喘中药疗效加快。但是这类药物血药浓度安全范围较窄，过量或长期服用，发生重度中毒可能产生室性心动过速、精神失常、惊厥、癫痫发作、昏迷，甚至呼吸和心脏骤停等中毒反应。患者在不知情的情况下，长期或过量服用这些中药，就有可能发生中毒反应，甚至有生命危险。因此，鉴定止咳平喘中药中是否添加了这类药物，是药监部门的一项重要工作。目前，检测止咳平喘中药中是否添加了茶碱、可可碱、咖啡因等药物的主要方法有HPLC-MS，GC-MS等等，这些方法检测结果准确，但是缺点在于仪器昂贵，样品前处理复杂，检测时间过长，无法满足药监部门现场快速检查的要求。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鉴定止咳平喘中药中是否添加茶碱、可可碱、咖啡因中一种或多种化学药品的方法。为了实现上述目的，本专利技术的第一方面，提供一种鉴定止咳平喘类中药中是否添加茶碱咖啡因可可碱中的一种或多种化学药品的方法，包括以下步骤：步骤一(S1)：待测溶液pH的预调节在待测止咳平喘中药中加入提取溶剂，超声提取，离心后取上清液作为待测溶液。采用酸或碱溶液，调节待测溶液的pH值在2.5～3.5范围内。另分别配制茶碱、咖啡因、可可碱标准品水溶液，调节pH至2.5～3.5范围内。提取溶剂可以为超纯水，乙醇或者乙醇和水体积比1:1混合溶剂，超声提取时间为10～30min。步骤二(S2)：一维动态表面增强拉曼光谱图的采集将预调节pH后的待测溶液、茶碱标准品溶液、咖啡因标准品溶液、可可碱标准品溶液分别与等体积的表面增强试剂混合，取一定体积混合液滴于硅片上。采用拉曼光谱仪，选取一定激光强度、积分时间以及光谱采集时间间隔，对硅片上液滴的边缘处进行连续的拉曼光谱采集，直到液滴由湿态挥发至干态，得到一系列一维动态表面增强拉曼光谱图。一定体积为1μL～3μL，激光强度为60mW～200mW，光谱采集的积分时间为1s～10s，光谱采集时间间隔为0～5s。表面增强试剂为纳米银溶胶。步骤三(S3)：pH依赖-二维相关表面增强拉曼光谱图的绘制并对步骤二所得图谱进行预处理，预处理包括选取300～1800cm-1光谱范围，在选取范围内对光谱进行airPLS法基线校正，WhittakerSmooth法平滑。对预处理后的图谱再分别选取530～820cm-1和1200～1400cm-1两个范围进行二维相关计算并绘制二维相关谱图。二维相关图谱包括二维相关同步谱、二维相关异步谱(以下也简称同步谱、异步谱)。步骤四(S4)：根据二维相关谱图对待测样品中是否添加茶碱、可可碱、咖啡因中一种或多种化学药品进行鉴定。对比步骤三所得待测样品和茶碱标准品、咖啡因标准品、可可碱标准品的二维相关图谱，若待测样品的同步谱中出现与茶碱标准品或咖啡因标准品或可可碱标准品同步谱中相同的交叉峰；且同时待测样品的异步谱中出现与茶碱标准品或咖啡因标准品或可可碱标准品的异步谱中相同的交叉峰，则判断待测样品中添加了茶碱或可可碱或咖啡因。同理，若待测样品同步谱和异步谱中分别同时存在茶碱、咖啡因、可可碱标准品中两种或三种标准品的交叉峰，则判断存在茶碱、咖啡因、可可碱中两种或三种化学药品。若待测样品二维相关图谱中不存在茶碱、咖啡因、可可碱中任何一种标准品的交叉峰，则判断没有添加茶碱、咖啡因和可可碱。所述的相同交叉峰的判断标准为：待测样品与标准品的交叉峰的横坐标和纵坐标正负相差均在3个波数之内，且待测样品与标准品的交叉峰正负符号相同。茶碱标准品的交叉峰坐标和峰的正负符号为：同步谱交叉峰：(686,678)>0，(565,552)>0，(1293,1238)>0，(1293,1286)>0(1324,1293)>0异步谱交叉峰：(686,678)>0，(565,552)>0，(1293,1238)>0，(1293,1286)>0(1324,1293)<0；咖啡因标准品的交叉峰坐标和峰的正负符号为：同步谱交叉峰：(640,556)>0，(648,640)>0，(694,648)>0，(1327,1308)>0，(1362,1308)>0，(1359,1327)>0异步谱交叉峰：(640,556)>0，(648,640)<0，(694,648)>0，(1327,1308)<0，(1362,1308)<0，(1359,1327)>0；可可碱标准品的交叉峰坐标和峰的正负符号为：同步谱交叉峰：(639,617)>0，(1319,1311)>0，(1359,1311)>0，(1359,1319)>0异步谱交叉峰：(639,617)>0，(1319,1311)<0，(1359,1311)<0，(1359,1319)>0。优选的，步骤一中酸或碱溶液可以为0.1～1mol/L的氢氧化钠溶液、0.1～1mol/L盐酸溶液或0.5～5mol/L柠檬酸钠溶液。优选的，步骤二中拉曼的激光强度为100mW～150mW，保证得到足够的光谱强度的同时，又避免激光强度过强，溶剂被加热后挥发过快，不能得到足够数量的光谱用于二维相关分析。在本专利技术的一个更优选实施例中，拉曼的激光强度为100mW。优选的，步骤二中取1μL纳米银胶与待测样品的混合液滴于硅片上。优选的，步骤二中光谱采集的积分时间为2s～5s，在本专利技术的一个更优选实施例中，光谱采集的积分时间为5s。优选的，步骤二中光谱采集时间间隔为0s，可以在光谱采集过程获得更多的图谱用于二维相关分析。本专利技术的技术方案的优点和积极效果如下：1、pH预调节步骤，得到更具特征性的动态变化拉曼图谱本专利技术的技术方案中，在对待测溶液进行拉曼检测之前，对溶液pH进行了预调节。由于本专利技术利用的是溶剂挥发，使检测微环境pH自发发生变化，这种变化比较小，因此相比现有技术，pH预调节步骤，保证pH自发变化发生在物质最敏感的范围。得到更具特征性的动态变化拉曼图谱。2、特异性强，能够对止咳平喘中药中是否添加茶碱或咖啡因或可可碱进行准确鉴别。不同物质即使是结构类似物其表面增强拉曼光谱的变化对于pH变化的响应不同。因此，利用本专利技术技术方案得到的动态变化表面拉曼光谱以及二维相关图谱具有特异性强的特点，对于物质鉴别，尤其是茶碱、咖啡因、可可碱这种结构类似物鉴别具有一定优势。与传统拉曼检测方法相比结果更准确，能够为药监部门的工作人员提供科学的依据和指导。3、灵敏度高。本专利技术技术方案在液滴边缘进行拉曼检测，根据咖啡环效应，在动态挥发时，待测物以及表面增强剂中的银纳米粒子会在液滴边缘浓集，因此在液滴边缘进行检测，即使采用常规表面增强试剂，也能达到较大的增强效应。能够对含量较低的样品进行检测，满足药品监管的要求。4、操作步骤简单，检测时间短本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴定止咳平喘类中药中是否添加茶碱咖啡因可可碱中的一种或多种化学药品的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：待测溶液pH的预调节在待测止咳平喘中药中加入提取溶剂，超声提取，离心后取上清液作为待测溶液；采用酸或碱溶液，调节待测溶液的pH值在2.5～3.5范围内；分别配制茶碱、咖啡因、可可碱标准品水溶液，调节pH至2.5～3.5范围内；所述的提取溶剂为超纯水，乙醇或者乙醇和水体积比1:1混合溶剂，超声提取时间为10～30min；步骤二：一维动态表面增强拉曼光谱图的采集将步骤一中预调节pH后的待测溶液、茶碱标准品溶液、咖啡因标准品溶液、可可碱标准品溶液分别与等体积的纳米银溶胶混合，取1μL～3μL混合液滴于硅片上；采用拉曼光谱仪，选取，激光强度为60mW～200mW，光谱采集的积分时间为1s～10s，光谱采集时间间隔为0～5s，对硅片上液滴的边缘处进行连续的拉曼光谱采集，直到液滴由湿态挥发至干态，得到一系列一维动态表面增强拉曼光谱图；步骤三：pH依赖‑二维相关表面增强拉曼光谱图的绘制对步骤二所得图谱进行预处理，预处理包括选取300～1800cm‑1光谱范围，在选取范围内对光谱进行airPLS法基线校正，WhittakerSmooth法平滑；对预处理后的图谱再分别选取530～820cm‑1和1200～1400cm‑1两个范围进行二维相关计算并绘制二维相关谱图；二维相关图谱包括二维相关同步谱、二维相关异步谱；步骤四：根据二维相关谱图对待测样品中是否添加茶碱、可可碱、咖啡因中一种或多种化学药品进行鉴定。...

【技术特征摘要】
1.一种鉴定止咳平喘类中药中是否添加茶碱咖啡因可可碱中的一种或多种化学药品的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：待测溶液pH的预调节在待测止咳平喘中药中加入提取溶剂，超声提取，离心后取上清液作为待测溶液；采用酸或碱溶液，调节待测溶液的pH值在2.5～3.5范围内；分别配制茶碱、咖啡因、可可碱标准品水溶液，调节pH至2.5～3.5范围内；所述的提取溶剂为超纯水，乙醇或者乙醇和水体积比1:1混合溶剂，超声提取时间为10～30min；步骤二：一维动态表面增强拉曼光谱图的采集将步骤一中预调节pH后的待测溶液、茶碱标准品溶液、咖啡因标准品溶液、可可碱标准品溶液分别与等体积的纳米银溶胶混合，取1μL～3μL混合液滴于硅片上；采用拉曼光谱仪，选取，激光强度为60mW～200mW，光谱采集的积分时间为1s～10s，光谱采集时间间隔为0～5s，对硅片上液滴的边缘处进行连续的拉曼光谱采集，直到液滴由湿态挥发至干态，得到一系列一维动态表面增强拉曼光谱图；步骤三：pH依赖-二维相关表面增强拉曼光谱图的绘制对步骤二所得图谱进行预处理，预处理包括选取300～1800cm-1光谱范围，在选取范围内对光谱进行airPLS法基线校正，WhittakerSmooth法平滑；对预处理后的图谱再分别选取530～820cm-1和1200～1400cm-1两个范围进行二维相关计算并绘制二维相关谱图；二维相关图谱包括二维相关同步谱、二维相关异步谱；步骤四：根据二维相关谱图对待测样品中是否添加茶碱、可可碱、咖啡因中一种或多种化学药品进行鉴定。2.根据权利要求1所述的鉴定止咳平喘类中药中是否添加茶碱咖啡因可可碱中的一种或多种化学药品的方法，其特征在于，所述的步骤四的鉴定方法为：对...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆峰，武媚然，柴逸峰，黄超，柳艳，陈辉，李皓，吴棉棉，张彬彬，陈秀娟，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：上海;31