一种检测食品中喹诺酮类的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测食品中喹诺酮类的方法，包括如下步骤：(1) 食品样品经冷冻干燥；(2)粉碎食品样品并过筛；(3)利用缓冲溶液为溶剂，稀释样品至合适浓度，并使之带正电；(4)加入EDTA‑Mcllvaine和乙腈混合提取剂，漩涡混匀并超声处理；(5)离心获上清液为提取液，重复提取2‑5次，合并各次提取液；(6)去除有机溶剂后，提取液用滤膜过滤；(7)过滤液过HLB柱并抽干，用8%甲醇溶液清洗柱，最后经甲醇洗脱目标抗生素，收集洗脱液。本发明专利技术在无需仪器辅助的条件下，实现氟喹诺酮类的简单、快速、灵敏的检测，为各种奶制品、禽制品中氟喹诺酮类的检测提供了具有自主知识产权的快速检测方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测方法，具体是一种检测食品中喹诺酮类的方法。
技术介绍
食品安全问题因关系到人类的健康和安全而受到各国政府和全社会的高度重视，已成为全球关注的焦点。作为用量最大的抗生素之一，氟喹诺酮类(Fluoroquinolones，FQs)抗生素进入我国仅仅二三十年，耐药率已经达60～70%。研究表明：FQs已广泛存在于食品中。可见，FQs在食品中残留量问题十分突出，是影响食品安全的最重要的化学性因素之一。目前，国内外关于FQs残留检测分析方法还主要是一些传统的方法，如液相色谱法、毛细管电泳分析法、液相色谱-质谱联用法、化学发光法和免疫分析法等。其中，仪器分析方法虽然准确可靠，但需要昂贵精密的设备，费时费力，并需要专业的技术操作人员，不适合对大批量样品进行现场筛查。免疫分析方法具有高度的专一性和灵敏度，但是也存在一些缺陷，主要表现为：分析程序较为繁琐，对操作人员专业技能要求较高；大多需要在实验室中进行，难以进行现场检测。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种检测食品中喹诺酮类的方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种检测食品中喹诺酮类的方法，包括如下步骤：(1)食品样品经冷冻干燥；(2)粉碎食品样品并过筛；(3)利用缓冲溶液为溶剂，稀释样品至合适浓度，并使之带正电；(4)加入EDTA-Mcllvaine和乙腈混合提取剂，漩涡混匀并超声处理；(5)离心获上清液为提取液，重复提取2-5次，合并各次提取液；(6)去除有机溶剂后，提取液用滤膜过滤；(7)过滤液过HLB柱并抽干，用8%甲醇溶液清洗柱，最后经甲醇洗脱目标抗生素，收集洗脱液；(8)吹干，用乙腈/0.8%磷酸定容，取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，最后加入乙腈/0.8%磷酸定容后的标注溶液，充分反应一定时间，制成标准系列溶液；取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，加入待测样品，充分反应一定时间，与标准系列溶液进行比对，确定待测样品中氟喹诺酮类的含量。作为本专利技术进一步的方案：所述氟喹诺酮类是NOR、CIP、LOM、DAN、ENR和SAR六种物质。作为本专利技术进一步的方案：所述第(2)步粉碎并过筛是后过1mm筛。作为本专利技术进一步的方案：所述第(3)步加入EDTA-Mcllvaine：乙腈=1：1(体积比)的混合提取剂，漩涡混匀30s，超声10-25min，其中混合提取剂为pH≤3.0，优选pH=2，超声提取时间为15min。作为本专利技术再进一步的方案：第(4)步离心获上清液为提取液，重复提取2次，合并3次提取液，其中以3000至5000rpm进行离心。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术在无需仪器辅助的条件下，实现氟喹诺酮类的简单、快速、灵敏的检测，为各种奶制品、禽制品中氟喹诺酮类的检测提供了具有自主知识产权的快速检测方法。具体实施方式下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。本专利技术实施例中，一种检测食品中喹诺酮类的方法，包括如下步骤：(1)食品样品经冷冻干燥；(2)粉碎食品样品并过筛；(3)利用缓冲溶液为溶剂，稀释样品至合适浓度，并使之带正电；(4)加入EDTA-Mcllvaine和乙腈混合提取剂，漩涡混匀并超声处理；(5)离心获上清液为提取液，重复提取2-5次，合并各次提取液；(6)去除有机溶剂后，提取液用滤膜过滤；(7)过滤液过HLB柱并抽干，用8%甲醇溶液清洗柱，最后经甲醇洗脱目标抗生素，收集洗脱液；(8)吹干，用乙腈/0.8%磷酸定容，取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，最后加入乙腈/0.8%磷酸定容后的标注溶液，充分反应一定时间，制成标准系列溶液；取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，加入待测样品，充分反应一定时间，与标准系列溶液进行比对，确定待测样品中氟喹诺酮类的含量。所述氟喹诺酮类是NOR、CIP、LOM、DAN、ENR和SAR六种物质。所述第(2)步粉碎并过筛是后过1mm筛。所述第(3)步加入EDTA-Mcllvaine：乙腈=1：1(体积比)的混合提取剂，漩涡混匀30s，超声10-25min，其中混合提取剂为pH≤3.0，优选pH=2，超声提取时间为15min。第(4)步离心获上清液为提取液，重复提取2次，合并3次提取液，其中以3000至5000rpm进行离心。实施例1本专利技术检测食品中喹诺酮类的方法，包括如下步骤：(1)食品样品经冷冻干燥；(2)粉碎食品样品并过筛；(3)利用缓冲溶液为溶剂，稀释样品至合适浓度，并使之带正电；(4)加入EDTA-Mcllvaine和乙腈混合提取剂，漩涡混匀并超声处理；(5)离心获上清液为提取液，重复提取2次，合并各次提取液；(6)去除有机溶剂后，提取液用滤膜过滤；(7)过滤液过HLB柱并抽干，用8%甲醇溶液清洗柱，最后经甲醇洗脱目标抗生素，收集洗脱液；(8)吹干，用乙腈/0.8%磷酸定容，取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，最后加入乙腈/0.8%磷酸定容后的标注溶液，充分反应一定时间，制成标准系列溶液；取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，加入待测样品，充分反应一定时间，与标准系列溶液进行比对，确定待测样品中氟喹诺酮类的含量。所述氟喹诺酮类是NOR、CIP、LOM、DAN、ENR和SAR六种物质。所述第(2)步粉碎并过筛是后过1mm筛。所述第(3)步加入EDTA-Mcllvaine：乙腈=1：1(体积比)的混合提取剂，漩涡混匀30s，超声10min，其中混合提取剂为pH≤3.0，优选pH=2，超声提取时间为15min。第(4)步离心获上清液为提取液，重复提取2次，合并3次提取液，其中以3000rpm进行离心。实施例2本专利技术检测食品中喹诺酮类的方法，包括如下步骤：(1)食品样品经冷冻干燥；(2)粉碎食品样品并过筛；(3)利用缓冲溶液为溶剂，稀释样品至合适浓度，并使之带正电；(4)加入EDTA-Mcllvaine和乙腈混合提取剂，漩涡混匀并超声处理；(5)离心获上清液为提取液，重复提取3次，合并各次提取液；(6)去除有机溶剂后，提取液用滤膜过滤；(7)过滤液过HLB柱并抽干，用8%甲醇溶液清洗柱，最后经甲醇洗脱目标抗生素，收集洗脱液；(8)吹干，用乙腈/0.8%磷酸定容，取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，最后加入乙腈/0.8%磷酸定容后的标注溶液，充分反应一定时间，制成标准系列溶液；取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，加入待测样品，充分反应一定时间，与标准系列溶液进行比对，确定待测样品中氟喹诺酮类的含量。所述氟喹诺酮类是NOR、CIP、LOM、DAN、ENR和SAR六种物质。所述第(2)步粉碎并过筛是后过1mm筛。所述第(3)步加入EDTA-Mcllvaine：乙腈=1：1(体积比)的混合提取剂，漩涡混匀30s，超声25min，其中混合提取剂为pH≤3.0，优选本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测食品中喹诺酮类的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1) 食品样品经冷冻干燥；(2)粉碎食品样品并过筛；(3)利用缓冲溶液为溶剂，稀释样品至合适浓度，并使之带正电；(4)加入EDTA‑Mcllvaine和乙腈混合提取剂，漩涡混匀并超声处理；(5)离心获上清液为提取液，重复提取2‑5次，合并各次提取液；(6)去除有机溶剂后，提取液用滤膜过滤；(7)过滤液过HLB柱并抽干，用8%甲醇溶液清洗柱，最后经甲醇洗脱目标抗生素，收集洗脱液；(8)吹干，用乙腈/0.8%磷酸定容，取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，最后加入乙腈/0.8%磷酸定容后的标注溶液，充分反应一定时间，制成标准系列溶液；取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，加入待测样品，充分反应一定时间，与标准系列溶液进行比对，确定待测样品中氟喹诺酮类的含量。

【技术特征摘要】
1.一种检测食品中喹诺酮类的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)食品样品经冷冻干燥；(2)粉碎食品样品并过筛；(3)利用缓冲溶液为溶剂，稀释样品至合适浓度，并使之带正电；(4)加入EDTA-Mcllvaine和乙腈混合提取剂，漩涡混匀并超声处理；(5)离心获上清液为提取液，重复提取2-5次，合并各次提取液；(6)去除有机溶剂后，提取液用滤膜过滤；(7)过滤液过HLB柱并抽干，用8%甲醇溶液清洗柱，最后经甲醇洗脱目标抗生素，收集洗脱液；(8)吹干，用乙腈/0.8%磷酸定容，取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，最后加入乙腈/0.8%磷酸定容后的标注溶液，充分反应一定时间，制成标准系列溶液；取一定体积和浓度的金纳米胶体水溶液放入洁净的玻璃容器中，再加入适量灵敏反应增强剂，加入待测...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋韦艳，刘金杰，吴敏芳，徐静，赵春城，胡勇，朱倩倩，
申请(专利权)人：无锡艾科瑞思产品设计与研究有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32