一种法斗木莲组织快繁育苗方法技术

技术编号:14934615 阅读:114 留言:0更新日期:2017-03-31 16:37
本发明专利技术公开一种法斗木莲组织快繁育苗方法,属于植物的组织培养技术领域。本发明专利技术通过ML培养基设置、不同激素成份及浓度水平配比优化,以种子为外植体,经腋芽诱导、腋芽增殖和生根培养,形成完整植株,移栽到基质后,得到生长整齐、表型一致的健壮苗木。本发明专利技术中腋芽诱导速度快、诱导率高;增殖系数大、丛芽粗壮、伸长生长快;生根率高,根系发达,生根苗粗壮、移栽成活率高。本发明专利技术为法斗木莲组培育苗提供了有效途径,通过规模化育苗,可以大规模的获得法斗木莲苗木苗,将为法斗木莲乃至木莲属植物的无性化推广提供技术支持,应用前景广阔,对广东乃至华南地区园林绿化及生态文明建设有着极其重大的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物的组织培养
,具体涉及一种法斗木莲组织快繁育苗方法
技术介绍
法斗木莲(ManglietiafadouensisLawetR.Z.Zhouined)隶属木兰科(Magnoliaceae)木莲属(Manglietia),常绿乔木,高达15m,胸径达30cm;树皮灰褐色,光滑;嫩枝绿色,老枝紫褐色,具褐色细点状皮孔。叶薄革质,狭卵状椭圆形或狭椭圆形,长6~12cm,宽2.5~4cm。花蕾绿色,椭圆体形;花白色、芳香而美丽,雌蕊群多数、白色,雄蕊群多数、绿色,花期4~5月;聚合果成熟时鲜红色,果熟期9-10月。法斗木莲为阳性树种,多为森林上层乔木。原产于云南(西畴)海拔1300~1500m的山地常绿阔叶林中。其树冠宽广,树形开阔,枝繁叶茂,花洁白芳香,聚合果熟时鲜红夺目,适应热带、南亚热带、中亚热带、亚热带、温带等气候种植,具有较强的抗风、抗污染和净化环境能力,是极优良的庭园观赏与绿化树种;枝、叶、花可提取具有较强香气和活性的精油,其主要成分是倍半萜类,可调制香料用,是医药、食品、化妆品的重要原料;树干通直,木材轻软,纹理细致,易加工,可供一般家具、建筑用材。综上,法斗木莲是既具有很高观赏价值的园林、庭园绿化树种,又是具有工业开发用途的多功能树种,综合开发潜力大。由于法斗木莲天然分布狭窄,种子发芽率低,生境遭破坏,天然更新不良,种群数量越来越小。加之采种困难,缺乏行之有效的育苗措施、快繁技术和管理方法,严重制约了法斗木莲的开发利用。经文献检索,目前尚未见关于法斗木莲组培快繁的报道,,目前仅有一篇(4种木莲幼苗生长特性与光和生理研究,2014,朱贤良等)文献中提到过法斗木莲。
技术实现思路
为了克服现有技术的缺点与不足,本专利技术的目的在于提供一种法斗木莲组织快繁育苗方法。该方法具有不定芽诱导快、增殖倍率高、芽粗壮伸长快、生根率高、生根苗根系发达健壮、移栽成活率高等特点。本专利技术的目的通过下述技术方案实现:一种法斗木莲组织快繁育苗方法,包括以下步骤:a、无菌种子苗获得:消毒后的法斗木莲种子接种到滤纸桥上,放到液体培养基上进行液体培养,得到无菌种子苗;所述的液体培养基为1/2ML培养基,pH为5.8~6.0;所述的液体培养的条件为:温度为25±2℃,60μmol.m-2.s-1光照下培养12h/d;b、腋芽诱导:截取步骤a获得的无菌种子苗的子叶节转接到诱导培养基上进行培养,得到腋芽;所述的诱导培养基为ML培养基+6-BA1.0~3.0mg/L+NAA0.05~0.2mg/L+蔗糖25~40g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0;所述的培养的条件为:温度为25±2℃,60μmol.m-2.s-1光照下培养12h/d;c、增殖培养:将步骤b获得的腋芽切下接种到增殖培养基上进行培养,得到增殖苗;所述的增殖培养基为ML培养基+6-BA0.5~1.5mg/L+NAA0.05~0.2mg/L+蔗糖25~40g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0;所述的培养的条件为:温度为25±2℃,60μmol.m-2.s-1光照下培养12h/d;d、生根培养:从步骤c获得的增殖苗中切取嫩芽接种到生根培养基中进行生根培养,得到生根苗。所述的生根培养基为1/2ML培养基+NAA0.5~1.0mg/L+蔗糖15~20g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0;所述的培养的条件为:温度为25±2℃,60μmol.m-2.s-1光照下培养12h/d。为了更好的实现本专利技术:将步骤d得到的生根苗移到温室中炼苗,然后取出幼苗,洗净黏在苗上的培养基,移植到按体积比泥炭土:珍珠岩=3:1的混合基质中,进行培养管理,得到法斗木莲苗。所述的ML培养基,其含有以下成份:560mg/LNH4NO3、720mg/LKNO3、360mg/LCa(NO3)2·2H2O、370mg/LMgSO4·7H2O、170mg/LKH2PO4、65mg/LKCl、22.3mg/LMnSO4·4H2O、8.6mg/LZnSO4·7H2O、6.2mg/LH3BO3、0.83mg/LKI、0.25mg/LNa2MoO4·2H2O、0.25mg/LCuSO4·5H2O、0.05mg/LNiSO4.6H2O、0.025mg/LCoCl2、27.8mg/LFeSO4·7H2O、37.3mg/LNa2·EDTA·H2O、150mg/L肌醇(Myo-Insitol)、2.0mg/L甘氨酸(Glycine)、0.5mg/L盐酸硫胺素(Thiamine·HCl)、0.2mg/L烟酸(Nicotinic·acid)、0.2mg/L盐酸吡哆醇(Pyridoxine·HCl),pH5.8~6.0、121℃灭菌15~20min;所述的1/2ML培养基为将ML培养基中所含大量元素(NH4NO3、KNO3、Ca(NO3)2·4H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、KCl)的用量减半,其余成分不变。步骤a中所述的消毒优选为:将外植体(种子)用体积分数70%~75%酒精溶液浸泡,时间为20~30s,倒掉酒精溶液后,用无菌水冲洗1~2次,然后加入质量分数0.05%~0.1%升汞溶液,依据外植体幼嫩程度浸泡3~10min,其间不断摇动,倒掉升汞溶液,再用无菌水冲洗5~6次,得到消毒后的外植体(种子)。步骤a中所述的液体培养的时间为培养约5~14d后发芽,约28~32天长成幼苗;步骤b中所述的截取无菌种子苗的子叶节接种到诱导培养基上是将无菌种子苗用无菌刀片切除部分子叶和子叶节上下多余部分,再接种到诱导培养基上。步骤c中所述的增殖培养优选是将腋芽切下,接种到增殖培养基上培养,腋芽分化形成新芽丛,将新芽丛中的芽高≥2cm的幼嫩枝条切割成1.0~1.5cm的茎段,再接入到新的增殖培养基中培养得到增殖苗,所述的增殖培养基为ML培养基+6-BA0.5~1.5mg/L+NAA0.05~0.2mg/L+蔗糖25~40g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0;所述的培养的条件为:温度为25±2℃,60μmol.m-2.s-1光照下培养12h/d。步骤c中所述的培养的时间为28~32d;步骤d中所述的生根培养的时间为20~30d。本专利技术通过基本培养基(ML培养基,专门针对法斗木莲生理状态设定的基本培养基)设置、不同激素成份及浓度水平配比优化,以种子为外本文档来自技高网
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一种法斗木莲组织快繁育苗方法

【技术保护点】
一种法斗木莲组织快繁育苗方法,其特征在于包括以下步骤:a、无菌种子苗获得:消毒后的法斗木莲种子接种到滤纸桥上,放到液体培养基上进行液体培养,得到无菌种子苗;所述的液体培养基为1/2ML培养基,pH为5.8~6.0;b、腋芽诱导:截取步骤a获得的无菌种子苗的子叶节转接到诱导培养基上进行培养,得到腋芽;所述的诱导培养基为ML培养基+6‑BA 1.0~3.0mg/L+NAA 0.05~0.2mg/L+蔗糖25~40g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0;c、增殖培养:将步骤b获得的腋芽切下接种到增殖培养基上进行培养,得到增殖苗;所述的增殖培养基为ML培养基+6‑BA 0.5~1.5mg/L+NAA 0.05~0.2mg/L+蔗糖25~40g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0;d、生根培养:从步骤c获得的增殖苗中切取嫩芽接种到生根培养基中进行生根培养,得到生根苗;所述的生根培养基为1/2ML培养基+NAA 0.5~1.0mg/L+蔗糖15~20g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0。

【技术特征摘要】
1.一种法斗木莲组织快繁育苗方法,其特征在于包括以下步骤:
a、无菌种子苗获得:消毒后的法斗木莲种子接种到滤纸桥上,放到液体培
养基上进行液体培养,得到无菌种子苗;所述的液体培养基为1/2ML培养基,
pH为5.8~6.0;
b、腋芽诱导:截取步骤a获得的无菌种子苗的子叶节转接到诱导培养基上
进行培养,得到腋芽;所述的诱导培养基为ML培养基+6-BA1.0~3.0mg/L+NAA
0.05~0.2mg/L+蔗糖25~40g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0;
c、增殖培养:将步骤b获得的腋芽切下接种到增殖培养基上进行培养,得
到增殖苗;所述的增殖培养基为ML培养基+6-BA0.5~1.5mg/L+NAA0.05~0.2
mg/L+蔗糖25~40g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0;
d、生根培养:从步骤c获得的增殖苗中切取嫩芽接种到生根培养基中进行
生根培养,得到生根苗;所述的生根培养基为1/2ML培养基+NAA0.5~1.0
mg/L+蔗糖15~20g/L+卡拉胶7~8.5g/L,pH为5.8~6.0。
2.根据权利要求1所述的法斗木莲组织快繁育苗方法,其特征在于:
步骤a、b、c和d中的培养的条件均为:温度为25±2℃,60μmol.m-2.s-1光照下培养12h/d。
3.根据权利要求1所述的法斗木莲组织快繁育苗方法,其特征在于:
所述的ML培养基,其含有以下成份:560mg/LNH4NO3、720mg/LKNO3、
360mg/LCa(NO3)2·2H2O、37...

【专利技术属性】
技术研发人员:邓小梅崔媛媛奚如春赵帅鲁好君叶小玲
申请(专利权)人:华南农业大学
类型:发明
国别省市:广东;44

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