用于黑素瘤的抗‑DLL3抗体和药物缀合物制造技术

用于黑素瘤的诊断和治疗的抗‑DLL3抗体和抗体药物缀合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请要求2014年2月21日提交的美国临时申请No.61/942,796(其通过引用整体并入本文)的优先权。序列表本申请包含已通过EFS-Web以ASCII格式提交并且在此通过引用整体并入的序列表。2015年2月23日创建的所述ASCII拷贝被命名为S69697_1200WO_SEQL_022315.txt并且大小为609KB(624,296字节)。专利
本申请总的来说涉及使用抗-DLL3抗体、抗-DLL3药物缀合物及其组合物诊断、治疗、监测和预防黑素瘤的方法。专利技术背景皮肤癌是最常见的癌症形式，其包括角质形成细胞癌(基底和鳞状细胞癌)(其来源于皮肤的上皮组织)和黑素瘤(其来源于驻留在皮肤和机体的其它部位的色素生成性黑素细胞)。黑素瘤占皮肤癌的少于5％，但却是80％的皮肤癌相关死亡的原因。如果早在皮肤局部阶段诊断，手术切除通常可以治愈疾病。因此，对于I期黑素瘤，预后是相当良好的，有超过90％的五年存活率。然而，由于黑素瘤的侵入和转移倾向性，预后随着病变在皮肤下更深地延伸而恶化。转移性黑素瘤仍然是最难以治疗的癌症之一并且手术切除通常不是治愈性治疗选择。IV期黑素瘤的5年存活率为15％至20％。在世界范围内，黑素瘤的发病率已以令人担忧的速度增加，发生黑素瘤的终生风险高至1/58(对于美国的男性)至1/25(对于澳大利亚的男性)。最近数十年中增加的发病率部分地通过人群的改变的阳光照射习惯来解释，但几个遗传风险因素也是已知的。黑素瘤的发展是复杂的并且与环境和遗传因素相关。色素特征与黑素瘤发病率强烈相关，I型皮肤类型中的风险高于VI皮肤类型(如通过Fitzpatrick量表定义的)。其它重要风险因素是色素痣(寻常痣)的数目、发育异常痣的数目和恶性黑素瘤的家族史。已显示MAPK途径中的突变在黑素瘤的发展中是非常重要的；高达90％的黑素瘤和良性黑素细胞肿瘤在BRAF或NRAS中携带激活突变。BRAF突变在约50％的原发性皮肤黑素瘤和多达70％的恶性黑素瘤中发生(Thomas等，2004,PMID:15140228)，其中这些突变的80％是位置600上的缬氨酸至谷氨酸的变化(V600E)(Davies等，2002,PMID:12068308)。NRAS突变在约20％的原发性皮肤黑素瘤中发生。最近开发的黑素瘤治疗已集中于与黑素瘤相关的这些常见遗传突变，例如针对BRAFV600E突变的维罗菲尼。然而，这样的治疗剂对于特征不在于特异性突变的黑素瘤是无效的。此外，这些治疗剂中的许多治疗剂提供一些短期益处，但是，在大多数情况下，不能提供无肿瘤复发或再现的持久治愈。仍然非常需要开发可用于治疗具有各种突变特征的黑素瘤和提供持续的缓解的疗法。专利技术概述本专利技术公开了使用抗-DLL3抗体和抗体药物缀合物(ADC)、其药物组合物以及制品诊断、预后、治疗、监测和预防黑素瘤包括难治性黑素瘤的方法。另外，本文中公开了用于DLL3的替代生物标志物。本专利技术的一个方面提供了评估患者的预后的方法，该方法包括以下步骤：(a)测定获自患者的生物样品中的DLL3表达水平；和(b)当测定的DLL3表达水平在阈指标值以上时，评估不良预后。在相关方面,提供了选择患者来进行治疗的方法，该方法包括以下步骤：(a)测定获自患者的生物样品中的DLL3表达水平；和(b)当所测定的DLL3表达水平在阈指标值以上时，选择患者来使用抗-DLL3抗体进行治疗。在这些方法中，测定DLL3表达水平的步骤可包括例如使用抗-DLL3抗体来检测DLL-3蛋白表达。所述检测步骤可包括本领域中已知的任何适当的技术，包括免疫组织化学。所述阈指标值根据所使用的技术而变化，如本领域中在阅读本公开内容后将充分理解的。作为一个实例，当将免疫组织化学用作检测方法时，所述阈指标值通常将大于70、80、90、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280和高达300的H-评分。用于预后、患者选择和/或DLL3水平检测的所公开的方法可利用任何DLL3抗体，包括例如包含SEQIDNO:173的轻链可变区氨基酸序列的3个CDR和SEQIDNO:175的重链可变区氨基酸序列的3个CDR的抗-DLL3抗体，或在特定的方面，含有SEQIDNO:173的轻链可变区氨基酸序列和SEQIDNO:175的重链可变区氨基酸序列的抗-DLL3抗体。另外，用于预后、患者选择和/或DLL3水平检测的所公开的方法还可包括施用治疗有效量的如由本公开内容所示的抗-DLL3抗体药物缀合物的治疗步骤。例如，在本专利技术的一些方面，治疗性抗体药物缀合物可包含内化抗体和/或嵌合抗体、CDR移植抗体或人源化抗体。在本专利技术的特定方面，治疗性抗体药物缀合物包含含有SEQIDNO:149的轻链可变区氨基酸序列的3个CDR和SEQIDNO:151的重链可变区氨基酸序列的3个CDR的抗-DLL3抗体，或在特定的方面，含有SEQIDNO:405的轻链可变区氨基酸序列和SEQIDNO:407的重链可变区氨基酸序列的抗-DLL3抗体。本专利技术的另一个方面提供了治疗黑素瘤的方法，所述方法包括施用分离的抗-DLL3抗体药物缀合物(ADC)或其药学上可接受的盐，其中所述抗体药物缀合物(ADC)包含式M-[L-D]n，其中M包括抗-DLL3抗体；L包括任选的接头；D包括吡咯苯并二氮杂(PBD)；并且n为1至20的整数。黑素瘤的特征通常在于已通过各种点突变激活的癌基因(例如，BRAF、NRAS、KIT)或已通过各种机制沉默的肿瘤抑制基因(例如，TP53、CDKN2A和PTEN)的表达。本专利技术人已经发现，表达DLL3的黑素瘤独立于黑素瘤中癌基因和肿瘤抑制基因的最常见注释的突变而进行表达。这些数据表明了治疗还在利用靶向剂(例如，威罗菲尼、曲美替尼、达沙替尼)治疗的黑素瘤患者或对于这样的治疗是难治性的黑素瘤的可能性。因此，在本专利技术的一个方面，本专利技术的方法可用于治疗难治性黑色素瘤，包括达卡巴嗪难治性黑素瘤或威罗菲尼难治性黑素瘤。在本专利技术的另一个方面，本专利技术的抗-DLL3ADC可用于治疗表达野生型BRAF的黑素瘤或治疗表达突变的BRAF的黑素瘤。在另一个方面，本专利技术的抗-DLL3ADC可用于治疗表达野生型NRAS的黑素瘤或治疗表达突变的NRAS的黑素瘤。在本专利技术的特定方面，提供了治疗具有II期黑素瘤的受试者的方法，所述方法包括以下步骤：(a)测定获自患者的生物样品中的DLL3表达水平，其中所测定的DLL3表达水平在阈指标值以上；和(b)利用抗-DLL3抗体药物缀合物治疗患者。如本文中所公开的，已发现DLL3表达与黑素瘤中表达的各种基因正相关。因此，本专利技术的另一个方面提供了治疗受试者的黑素瘤的方法，所述方法包括以下步骤：(a)就一种或多种正相关替代生物标志物问询获自患者的生物样品；(b)检测样品中的一种或多种正相关替代生物标志物的表达；和(c)利用治疗有效量的抗-DLL3抗体药物缀合物治疗受试者。在其它方面，正相关替代生物标志物选自由以下标志物之一组成的组：PUS7、EFHD1、PTP4A3、MYO1B、NFATC1、NUDT14、NR6A1、JAG2、HAUS5、ADAT3、PAFAH1B3、CCDC136、GAS5、PPFIA3、C本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种评估患者的预后的方法，所述方法包括以下步骤：(a)测定获自所述患者的生物样品中的DLL3表达水平；和(b)当测定的DLL3表达水平在阈指标值以上时，评估不良预后。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.02.21 US 61/942,7961.一种评估患者的预后的方法，所述方法包括以下步骤：(a)测定获自所述患者的生物样品中的DLL3表达水平；和(b)当测定的DLL3表达水平在阈指标值以上时，评估不良预后。2.一种选择患者以进行治疗的方法，所述方法包括以下步骤：(a)测定获自所述患者的生物样品中的DLL3表达水平；和(b)当所测定的DLL3表达水平在阈指标值以上时，选择患者来使用抗-DLL3抗体进行治疗。3.权利要求1或2的方法，其中测定DLL3表达水平的步骤包括检测DLL3蛋白表达。4.权利要求3的方法，其中使用抗-DLL3抗体检测DLL3蛋白表达。5.权利要求4的方法，其中所述抗-DLL3抗体包含SEQIDNO:173的轻链可变区氨基酸序列的3个CDR和SEQIDNO:175的重链可变区氨基酸序列的3个CDR。6.权利要求5的方法，其中所述抗-DLL3抗体包含SEQIDNO:173的轻链可变区氨基酸序列和SEQIDNO:175的重链可变区氨基酸序列。7.权利要求4-6的任一项的方法，其中在免疫组织化学测定中检测DLL3蛋白表达。8.权利要求1-7的任一项的方法，其还包括利用治疗量的抗-DLL3抗体治疗患者的步骤(c)。9.一种治疗黑素瘤的方法，其包括施用分离的抗-DLL3抗体药物缀合物或其药学上可接受的盐，其中所述抗体药物缀合物包含式M-[L-D]n，其中：M包含抗-DLL3抗体；L包含任选的接头；D包含吡咯苯并二氮杂(PBD)；和n为1至20的整数。10.权利要求9的方法，其中所述黑素瘤是难治性黑素瘤。11.权利要求10的方法，其中所述黑素瘤是达卡巴嗪难治性黑素瘤或威罗菲尼-难治性黑素瘤。12.权利要求9-11的任一项的方法，其中所述黑素瘤包含野生型BRAF。13.权利要求9-11的任一项的方法，其中所述黑素瘤包含突变的BRAF。14.权利要求9-11的任一项的方法，其中所述黑素瘤包含野生型NRAS。15.权利要求9-11的任一项的方法，其中所述黑素瘤包含突变的NRAS。16.一种治疗患有II期黑素瘤的受试者的方法，其包括以下步骤：(a)测定获自所述患者的生物样品中的DLL3表达水平，其中所测定的DLL3表达水平在阈指标值以上；和(b)利用抗-DLL3抗体药物缀合物治疗所述患者。17.一种治疗受试者的黑素瘤的方法，其包括以下步骤：(a)就一种或多种正相关替代生物标志物问询获自所述患者的生物样品；(b)检测所述样品中的一种或多种正相关替代生物标志物的表达；和(c)利用治疗有效量的抗-DLL3抗体药物缀合物治疗受所述试者。1...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·威廉斯，L·桑德斯，K·A·洛文，
申请(专利权)人：艾伯维施特姆森特克斯有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US