本发明专利技术涉及一种利用复合修饰剂负载热解石墨电极电致化学发光行为测定药物中苦参碱含量的方法，其是利用硅溶胶、二氧化钛溶胶的成膜性、纳米氧化锌-银的大比表面积及碳纳米管良好的电学性能，制备了复合修饰剂，基于此复合材料将联吡啶钌固定在热解石墨电极表面，建立了制备高性能电化学发光传感器的新方法，并基于苦参碱对Ru(bpy)32+增敏作用实现了对苦参碱栓的测定。在最佳实验条件下，苦参碱在1.0×10-8～1.0×10-5 mol/L范围内与相对发光强度呈线性关系，检出限为8.16×10-10mol/L，连续平行测定1.0×10-5 mol/L的苦参碱溶液10次，发光强度的相对标准偏差为4.25%。本方法用于苦参碱栓的测定具有较高的选择性和灵敏度，且实现了联吡啶钌的重复使用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种测定药物中苦参碱含量的方法，特别涉及一种利用复合修饰剂负载热解石墨电极电致化学发光行为测定药物中苦参碱含量的方法。
技术介绍
苦参碱是由豆科植物苦参的根、株及果实经乙醇等有机溶剂提取制成的，是生物碱。苦参碱具有清热、利尿、杀虫、祛湿等功效，同时还具有抗病毒、抗肿瘤、抗过敏等多种作用，各类制剂已被广泛用于临床，因此测定药物中苦参碱的含量，对临床用药安全具有重要意义。目前，有关苦参碱的测定方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、高效液相-质谱法（HPLC-MS）、反相高效色谱法（RP-HPLC）、离子对色谱法、毛细管电泳法、薄层扫描法、气相色谱法（GC）、气相色谱-质谱法、荧光淬灭法等。但这些方法或操作烦琐或使用贵重的仪器设备或灵敏度不高，不能完全满足临床痕量分析的要求。因此，建立简单、快速、灵敏的分析新方法具有重要的意义。目前公开的文献中，以下2篇论文是本专利技术最接近的现有技术：(1)李利军，罗应，李彦青等前期关于“联吡啶钌体系电化学发光法测定苦参碱的研究”中，采用裸电极（金电极）为工作电极，在联吡啶钌浓度为4.0×10-4mol/L的苦参碱测定体系中，其线性范围为1.5×10-7~1.5×10-4mol/L，检出限为7.3×10-9mol/L。该技术不足之处一方面在于每次测定均需要添加昂贵的联吡啶钌，测量成本高，同时易造成环境污染；另一方面与修饰电极体系相比，苦参碱测定操作相对复杂，且易造成因操作引起测量误差。（2）罗应，李利军，李彦青等在“硅溶胶-纳米金修饰金电极电化学发光法测定苦参碱的研究”中，采用以纳米金为增敏材料，通过联吡啶钌固定技术，实现了联吡啶钌的高效利用，但硅溶胶成膜时易龟裂，需添加合适的助膜剂聚乙烯醇和L-半胱氨酸，而该成膜技术相对传统，所以在电极修饰技术方面缺乏足够创新，且在苦参碱检出限方面也较本技术处于劣势。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：提供一种利用复合修饰剂负载热解石墨电极电致化学发光行为测定药物中苦参碱含量的方法，该方法利用硅溶胶（Silicasol）、二氧化钛溶胶（TiO2sol）的成膜性、纳米氧化锌-银（ZnAg）的大比表面积及碳纳米管（MWCNTs）良好的电学性能，制备了Silicasol/MWCNTs-ZnOAg/TiO2sol复合修饰剂，并通过传感器修饰技术将联吡啶钌（Ru(bpy)32+）负载在热解石墨电极表面，制备出稳定性好、灵敏度高的用于测定苦参碱的电致化学发光传感器，实现了对苦参碱的简单、快速测定，该方法用于苦参碱栓的测定具有较高的选择性和灵敏度，且实现了联吡啶钌的重复使用。解决上述技术问题的技术方案是：一种利用复合修饰剂负载热解石墨电极电致化学发光行为测定药物中苦参碱含量的方法，包括以下步骤：A、将纯化后的多壁碳纳米管配制成0.001mol/L~1.0mol/L的多壁碳纳米管溶液；B、纳米二氧化钛溶胶的制备：将TiCl4通入乙醇中配制体积分数为3.5～4.5%的TiCl4-EtOH溶液，取TiCl4-EtOH溶液并用氨水调节pH=8.5～9.0，抽滤，滤饼用去离子水洗涤至中性，用H2O2溶解，再加入硅溶胶和水，于92～98℃回流3.5～4.5h得到纳米二氧化钛溶胶；H2O2、硅溶胶、水的用量按TiCl4-EtOH溶液∶H2O2∶硅溶胶∶水的体积比为1∶1.4～1.6∶0.2～0.3∶3.2～3.4计算；C、纳米氧化锌-银核壳量子点的制备：C-1、按0.1g硝酸银∶28～32mL乙醇计，将硝酸银加入快速搅拌的乙醇溶液中，并在38～43℃下分散5～15min，得到硝酸银溶液；C-2、按1g聚乙烯吡咯烷酮∶48～53mL乙醇计，将聚乙烯吡咯烷酮加入乙醇中并于58～63℃溶解5～15min，得到聚乙烯吡咯烷酮溶液；C-3、将硝酸银溶液逐滴加入到聚乙烯吡咯烷酮溶液中，硝酸银溶液与聚乙烯吡咯烷酮溶液的体积比为1∶1～1.1，反应1.8～2.2h得银溶胶；C-4、按0.01gNaOH∶22～28mL乙醇计，将NaOH在48～53℃下加入乙醇中分散15～25min，得到NaOH溶液；C-5、按0.1g无水醋酸锌∶20～25mL乙醇计，将无水醋酸锌加入乙醇中，在58～63℃下持续搅拌15～25min溶解，得到无水醋酸锌溶液；C-6、将无水醋酸锌溶液和银溶胶混合均匀得混合溶液，无水醋酸锌溶液与银溶胶体积比为1∶1.9～2.2，混合溶液由最初的黄色逐步变为深灰色，最终稳定在灰色，此时加入混合溶液体积分数3.0～3.6%的聚乙二醇，在48～53℃条件下搅拌5～15min后，于30s内迅速加入步骤C-4制备好的NaOH溶液，NaOH溶液的加入量为混合溶液体积分数64～70%，在38～43℃下反应0.8～1.2h，得到ZnAg核壳量子点；D、传感器的制备：D-1、热解石墨电极经过打磨、抛光、清洗后，室温晾干待用；D-2、将0.001mol/L~1.0mol/L的多壁碳纳米管溶液与0.0025mol/L的ZnOAg核壳量子点按体积比为1:19～21超声分散25～35min，制备出MWCNTs-ZnOAg复合材料，再与硅溶胶、纳米二氧化钛溶胶按MWCNTs-ZnOAg复合材料：硅溶胶：纳米二氧化钛溶胶体积比1:1:2超声混合均匀得到均一、稳定的Silicasol/MWCNTs-ZnOAg/TiO2sol复合溶液，按联吡啶钌溶液:硅溶胶:MWCNTs-ZnOAg复合材料:纳米二氧化钛溶胶体积比为1:1:1:2向该Silicasol/MWCNTs-ZnOAg/TiO2sol复合溶液中加入0.001mol/L联吡啶钌溶液，超声振荡使其混匀，然后取1~4μL加入联吡啶钌溶液的Silicasol/MWCNTs-ZnOAg/TiO2sol复合溶液，滴加在步骤D-1得到的热解石墨电极表面，于23～28℃下晾干，即可得到Silicasol/MWCNTs-ZnOAg/TiO2sol-Ru(bpy)32+修饰的热解石墨电极；E、测定药物中苦参碱含量：使用步骤D制备得到的Silicasol/MWCNTs-ZnOAg/TiO2sol-Ru(bpy)32+修饰的热解石墨电极，按照常规方法测定药物中苦参碱含量。本专利技术的进一步技术方案是：步骤A的具体操作为：取部分多壁碳纳米管置于浓硫酸与浓硝酸体积比为3:1的溶液中，于60℃回流反应12h，使用0.22μm微孔滤膜过滤，滤饼用去离子水洗涤至中性，烘干后以二甲基甲酰胺为溶剂配制成1mol/L多壁碳纳米管溶液。所述聚乙二醇为PEG200的聚本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种利用复合修饰剂负载热解石墨电极电致化学发光行为测定药物中苦参碱含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：A、将纯化后的多壁碳纳米管配制成0.001mol/L~1.0mol/L的多壁碳纳米管溶液；B、纳米二氧化钛溶胶的制备：将TiCl4通入乙醇中配制体积分数为3.5～4.5%的TiCl4‑EtOH溶液，取TiCl4‑EtOH溶液并用氨水调节pH=8.5～9.0，抽滤，滤饼用去离子水洗涤至中性，用H2O2溶解，再加入硅溶胶和水，于92～98℃回流3.5～4.5h得到纳米二氧化钛溶胶；H2O2、硅溶胶、水的用量按TiCl4‑EtOH溶液∶H2O2∶硅溶胶∶水的体积比为1∶1.4～1.6∶0.2～0.3∶3.2～3.4计算；C、纳米氧化锌‑银核壳量子点的制备：C‑1、按0.1g硝酸银∶28～32mL乙醇计，将硝酸银加入快速搅拌的乙醇溶液中，并在38～43℃下分散5～15min，得到硝酸银溶液；C‑2、按1g聚乙烯吡咯烷酮∶48～53mL乙醇计，将聚乙烯吡咯烷酮加入乙醇中并于58～63℃溶解5～15min，得到聚乙烯吡咯烷酮溶液；C‑3、将硝酸银溶液逐滴加入到聚乙烯吡咯烷酮溶液中，硝酸银溶液与聚乙烯吡咯烷酮溶液的体积比为1∶1～1.1，反应1.8～2.2h得银溶胶；C‑4、按0.01g NaOH∶22～28mL乙醇计，将NaOH在48～53℃下加入乙醇中分散15～25min，得到NaOH溶液；C‑5、按0.1g无水醋酸锌∶20～25mL乙醇计，将无水醋酸锌加入乙醇中，在58～63℃下持续搅拌15～25min溶解，得到无水醋酸锌溶液；C‑6、将无水醋酸锌溶液和银溶胶混合均匀得混合溶液，无水醋酸锌溶液与银溶胶体积比为1∶1.9～2.2，混合溶液由最初的黄色逐步变为深灰色，最终稳定在灰色，此时加入混合溶液体积分数3.0～3.6%的聚乙二醇，在48～53℃条件下搅拌5～15min后，于30s内迅速加入步骤C‑4制备好的NaOH溶液，NaOH溶液的加入量为混合溶液体积分数64～70%，在38～43℃下反应0.8～1.2h，得到Zn@Ag核壳量子点；D、传感器的制备：D‑1、热解石墨电极经过打磨、抛光、清洗后，室温晾干待用；D‑2、将0.001mol/L~1.0mol/L 的多壁碳纳米管溶液与0.0025 mol/L的ZnO@Ag核壳量子点按体积比为1:19～21超声分散25～35min，制备出MWCNTs‑ZnO@Ag复合材料，再与硅溶胶、纳米二氧化钛溶胶按MWCNTs‑ZnO@Ag复合材料：硅溶胶：纳米二氧化钛溶胶体积比1:1:2超声混合均匀得到均一、稳定的Silica sol / MWCNTs‑ ZnO@Ag / TiO2 sol复合溶液，按联吡啶钌溶液:硅溶胶:MWCNTs‑ZnO@Ag复合材料:纳米二氧化钛溶胶体积比为1:1:1:2向该Silica sol / MWCNTs‑ ZnO@Ag / TiO2 sol复合溶液中加入0.001mol/L联吡啶钌溶液，超声振荡使其混匀，然后取1~4 μL加入联吡啶钌溶液的Silica sol / MWCNTs‑ ZnO@Ag / TiO2 sol复合溶液，滴加在步骤D‑1得到的热解石墨电极表面，于23～28℃下晾干，即可得到Silica sol / MWCNTs‑ZnO@Ag / TiO2 sol ‑ Ru(bpy)32+修饰的热解石墨电极；E、测定药物中苦参碱含量：使用步骤D制备得到的Silica sol / MWCNTs‑ZnO@Ag / TiO2 sol ‑ Ru(bpy)32+修饰的热解石墨电极，按照常规方法测定药物中苦参碱含量。...
【技术特征摘要】
1.一种利用复合修饰剂负载热解石墨电极电致化学发光行为测定药物中苦参碱含量
的方法，其特征在于：包括以下步骤：
A、将纯化后的多壁碳纳米管配制成0.001mol/L~1.0mol/L的多壁碳纳米管溶液；
B、纳米二氧化钛溶胶的制备：将TiCl4通入乙醇中配制体积分数为3.5～4.5%的TiCl4-
EtOH溶液，取TiCl4-EtOH溶液并用氨水调节pH=8.5～9.0，抽滤，滤饼用去离子水洗涤至中
性，用H2O2溶解，再加入硅溶胶和水，于92～98℃回流3.5～4.5h得到纳米二氧化钛溶胶；
H2O2、硅溶胶、水的用量按TiCl4-EtOH溶液∶H2O2∶硅溶胶∶水的体积比为1∶1.4～1.6∶0.2～
0.3∶3.2～3.4计算；
C、纳米氧化锌-银核壳量子点的制备：
C-1、按0.1g硝酸银∶28～32mL乙醇计，将硝酸银加入快速搅拌的乙醇溶液中，并在38～
43℃下分散5～15min，得到硝酸银溶液；
C-2、按1g聚乙烯吡咯烷酮∶48～53mL乙醇计，将聚乙烯吡咯烷酮加入乙醇中并于58～
63℃溶解5～15min，得到聚乙烯吡咯烷酮溶液；
C-3、将硝酸银溶液逐滴加入到聚乙烯吡咯烷酮溶液中，硝酸银溶液与聚乙烯吡咯烷酮
溶液的体积比为1∶1～1.1，反应1.8～2.2h得银溶胶；
C-4、按0.01gNaOH∶22～28mL乙醇计，将NaOH在48～53℃下加入乙醇中分散15～
25min，得到NaOH溶液；
C-5、按0.1g无水醋酸锌∶20～25mL乙醇计，将无水醋酸锌加入乙醇中，在58～63℃下持
续搅拌15～25min溶解，得到无水醋酸锌溶液；
C-6、将无水醋酸锌溶液和银溶胶混合均匀得混合溶液，无水醋酸锌溶液与银溶胶体积
比为1∶1.9～2.2，混合溶液由最初的黄色逐步变为深灰色，最终稳定在灰色，此时加入混合
溶液体积分数3.0～3.6%的聚乙二醇，在48～53℃条件下搅拌5～15min后，于30s内迅速加
入步骤C-4制备好的NaOH溶液，NaOH溶液的加入量为混合溶液体积分数64～70%，在38～43
℃下反应0.8～1.2h，得到ZnAg核壳量子点；
D、传感器的制备：
D-1、热解石墨电极经过打磨、抛光、...
【专利技术属性】
技术研发人员：李彦青，罗应，李利军，程昊，黄文艺，冯军，孔红星，
申请(专利权)人：广西科技大学，
类型：发明
国别省市：广西;45
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