橄榄的液体植物混杂物的抗炎应用制造技术

本发明专利技术涉及源自含油橄榄的植物水或源自橄榄研磨过程产生的橄榄渣的富含多酚化合物(例如羟基酪醇和3,4-DHPA-EDA)的植物混杂物或天然浓缩物，其用于治疗和预防血管生成和炎症。具体地，所述血管生成和炎症是病理性血管生成和炎症，例如维持肿瘤发育和肿瘤扩散或与非肿瘤病理相关的血管生成和炎症。本发明专利技术还涉及含所述多酚浓缩物的饮品以及其在治疗和预防血管生成和炎症中的应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及，源自压榨含油橄榄植物所得的水(通常称为植物水(vegetationwater))或源自橄榄油研磨过程产生的残余橄榄油渣的，富含多酚化合物(具体富含羟基酪醇和3,4-DHPA-EDA)的天然植物混杂物在治疗或预防血管生成和/或炎症中的应用。具体地，所述血管生成和炎症是病理性类型，例如维持肿瘤发育和肿瘤扩散或与非肿瘤病理相关的血管生成和炎症。血管生成是个体生长和发育过程期间发生的生理过程，其涉及从已存在的血管腔隙形成新血管。血管生成过程还是各种病理性现象的特点，包括肿瘤。肿瘤(或瘤)团块可自发生长和发育多达约1-2mm3；然而，为了继续生长，其必须确保自身有必需的营养和氧气供给，所以其需要形成自己的血管腔隙。肿瘤能分泌血管原性因子，例如VEGF(血管内皮生长因子)、bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)和PDGF(血小板衍生生长因子)，它们能促进血管发育。肿瘤分泌的血管原性因子激活内皮细胞，其经响应开始增殖并分泌降解细胞基质和基底膜的物质(例如基质金属蛋白酶-MMP)，从而迁移并入侵周围组织。随后，内皮细胞经组织形成由周细胞(即围绕新形成的血管，并能改善血流并调节血管渗透性的收缩性细胞)稳定的管状结构。源自肿瘤的血管不规则并且其特征为与“正常”血管不一样的结构元素。例如，它们的特征是缺乏周细胞、大膜孔以及显著的血管扩张。这些特征会改变血管的渗透性和压力水平，并且还因此干扰了抗肿瘤药物的递送，这些药物在隙间液体中分散而不接触肿瘤，因此无法行使其功能。考虑到血管生成在肿瘤发育、生长和转移过程中的重要性，进行了目的在于鉴定能阻断肿瘤血管无规则发育并能改善药物向肿瘤位置递送的物质的大量研究。具体地，已在鉴定能阻止血管异常发育的分子方面进行了大量尝试；形成了称为“血管阻止(angioprevention)”的概念(即阻止肿瘤相关的血管生成)。这些分子中大部分是天然来源(或在一些情况中是合成类似物)。一种非常有趣的示例是源自橄榄油的分子。事实上，已知心血管疾病和肿瘤的发病率在地中海饮食群体中显著较低，这种饮食基于对橄榄油的消耗。科学证据为橄榄油研究提供了显著的动力，所述研究目的在于定义其组成，尤其是鉴定具有医学-药学潜能的物质。引起特别兴趣的橄榄油的一个特征是其含有高水平的多酚。这些化合物是植物源性的天然抗氧化剂，其能抑制自由基的形成。橄榄油的有益特性引起了橄榄种植和橄榄油生产的大量增长，主要在意大利。因此，橄榄油生产也伴随副产物的大量增加，主要是植物水和残渣，它们具有高度污染性，因此对环境产生了显著影响。在意大利，这些材料的处置于国家和地区水平上均受到严格管控，并且法律的实施(11/1996的574号法案)使生产者产生了繁重的成本，他们无法从这些废料中获取任何价值，但其中事实上富含具有高度药学潜能的分子。羟基酪醇(hydroxytyrosol)是植物水中所含的研究最多的多酚。其存在于植物水和残渣中，还通过橄榄苦苷的水解形成，后者是主要存在于橄榄树叶子中的物质。近期研究证实羟基酪醇自身具有针对PC12细胞(嗜铬细胞瘤性细胞系)的细胞保护功能、在给予U937细胞(人骨髓单核细胞系)和C2C12细胞(小鼠成肌细胞系)时抗凋亡、在诱导的骨髓瘤病例中抑制体内乳腺肿瘤增殖、在针对HL60和HL60R肿瘤细胞系(人早幼粒细胞性白血病细胞系和其多药物抗性衍生物)的研究中是化学预防剂，并且预防经前综合征和骨质疏松症。此外，已证实体内给予羟基酪醇(即便以高浓度给予)没有毒性作用。其他研究证实，当单独给予橄榄苦苷时，其产生抗微生物活性，在结直肠肿瘤细胞系、转移性乳腺癌和ER阴性细胞系中具有抗肿瘤潜能，并且具有在细胞骨架水平改变细胞稳定性的能力。虽然对植物水进行了许多研究，但仍需要鉴定可以使该废产物的利用价值提高的新特征，否则其对生产者来说只是徒增成本，还有害于环境。特别需要鉴定可使这些废料发挥余热的新的营养和医学-药学性质。因此，专利技术人惊奇地发现植物水可以在体内和体外阻断/防止血管生成和炎症，特别是病理血管生成和炎症，例如支持肿瘤发育和扩散的那些血管生成和炎症，或与非肿瘤病理相关的血管生成和炎症。具体地，申请人发现通过利用反渗透方式而集中经历微过滤的植物水的渗透，可获得富含多酚化合物的植物混杂物，其能防止并阻断血管生成和炎症，尤其是病理性血管生成和炎症，例如与肿瘤相关的那些或与非肿瘤病理相关的那些，其作用方式比单独地摄取相同化合物(即通过纯化技术从植物水和残渣中分离的相同化合物)所能实现的作用更有效。该作用对人体健康，主要是血管阻止方面有特别优势。事实上，就此而言，本专利技术植物水浓缩物可以其自身使用或与其他抗肿瘤和抗血管生成和抗炎物联用，例如以饮品的形式，以治疗或预防血管生成和炎症，尤其是与肿瘤相关的病理学血管生成和炎症或与非肿瘤疾病相关的病理学血管生成和炎症。本专利技术的进一步优势根据下述详细描述而显见，在所附附图的辅助下进行说明，其中：-图1显示MTT试验的结果，旨在评估在下述逐级稀释物处理后的HUVE细胞增殖：A)本专利技术的多酚浓缩物(样品A009)；B)空白(样品A012)；C)纯化的羟基酪醇(HyT)；和D)纯化的羟基酪醇空白(即乙醇-EtOH)。-图2显示处理后24和48小时，用下述逐步稀释物处理后的凋亡和HUVE细胞死亡试验的结果。A,C)本专利技术的多酚浓缩物(样品A009)；B,D空白(样品A012)。-图3显示处理后24和48小时，用下述逐步稀释物处理后的凋亡和HUVE细胞死亡试验的结果。A,C)纯化的羟基酪醇(HyT)；B,D纯化的羟基酪醇空白(即乙醇-EtOH)。-图4显示用下述试剂处理后，基于评估HUVE细胞在基质胶中形成毛状管型结构的能力的形态发生分析：A)无血清培养基(SFM)，完全培养基(CTRL)，本专利技术多酚浓缩物(样品A009)的1:500和1:250稀释物，空白(样品A012)的1:500和1:250稀释物；B)无血清培养基(SFM)，完全培养基(CTRL)，纯化的羟基酪醇(HyT)的1:500和1:250稀释物，纯化的羟基酪醇空白(即乙醇-EtOH)的1:500和1:250稀释物。-图5显示用下述试剂处理后HUVE细胞的趋化性试验结果：A)完全培养基(CTRL)，无血清培养基(SFM)，本专利技术多酚浓缩物(样品A009)的逐步稀释物，空白(样品A012)；B)完全培养基(C+)，无血清培养基(SFM)，纯化本文档来自技高网...

【技术保护点】
含羟基酪醇和3,4‑DHPA‑EDA的植物水和/或橄榄油渣的浓缩物，其用于治疗和/或预防炎症。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.10.31 IT MI2013A0018151.含羟基酪醇和3,4-DHPA-EDA的植物水和/或橄榄油渣的浓缩物，其用于治
疗和/或预防炎症。
2.如权利要求1所述的浓缩物，其还包含：优选自酪醇、氯原酸、β-羟基毛蕊
花甙、芸香苷、毛蕊花甙和藤黄菌素的至少一种酚类化合物；和/或优选自
钠、钙、镁和钾的至少一种金属；和/或优选自氯化物、硫酸盐、磷酸盐和
硝酸盐的至少一种阴离子；和/或选自葡萄糖、果糖、甘露醇和蔗糖的至少
一种糖；和/或氮。
3.生产植物水和/或橄榄油渣的浓缩物的方法，所述方法包括：
(i)微过滤植物水和/或橄榄油渣的样品，以获得微过滤的透过物和浓缩物；
和
(ii)通过反渗透来浓缩步骤(i)的微过滤透过物。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述微过滤步骤涉及使用至少一个陶瓷膜，
其优选管状。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述膜用氧化铝和氧化锆制成。
6.如权利要求3-5中任一项所述的方法，其中所述反渗透通过使用聚合膜进行，
所述聚合膜优选由...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·洛弗兰科，A·阿尔比尼，M·皮兹奇尼，T·罗西，A·布鲁诺，A·帕加尼，
申请(专利权)人：吉安尼，安东尼奥和班迪诺弗朗哥的维亚拉农场农业基础公司，
类型：发明
国别省市：意大利;IT