一种唾液酸供体的制备方法技术

一种唾液酸供体的制备方法，包括以下步骤：步骤1：用酸性树酯催化进行酯化反应，用碱性树酯除去残留的原料；步骤2：乙酰化对羟基进行保护；步骤3：用1‑金刚烷硫醇进行糖硫苷化；步骤4：脱羟基和氨基的乙酰基保护基；步骤5：在NaHCO3引发下，用三光气对5位氨基和4位羟基进行保护，引入噁唑烷酮结构；步骤6：乙酰化对羟基和氨基进行保护得到目标唾液酸供体；本发明专利技术制备目标唾液酸供体的路线中提纯工艺只涉及简单的搅洗或析晶，不涉及过硅胶柱等复杂提纯工艺，整个制备路线操作简单，容易提纯，适合产业化生产，降低了目标唾液酸供体的合成成本，缩短了合成周期，为研发人体母乳寡糖提供了便利。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及糖化学
，具体说是一种唾液酸供体的制备方法。
技术介绍
人体母乳寡糖HMO是一组在母乳中由不同寡糖组成的复合糖，其通过多种直接或间接的方式调控婴儿的肠道菌群，其中一种唾液酸化的二唾液酸基乳糖基-N-四糖DSLNT对幽门杆菌与胃肠道上皮细胞的黏附有很好的抑制效果，从而对预防婴幼儿胃肠道疾病扮演着至关重要的角色。但是目前DSLNT还不能作为添加剂成为婴幼儿配方粉的成分，主要原因是其天然原料稀缺，分离技术难度大，价格非常昂贵；人工合成DSLNT到目前还处于研发阶段，无法进行产业化生产。人工合成DSLNT的关键技术是在分子结构中高立体选择性和高收率的引入唾液酸片段；由于唾液酸具有特殊的分子结构，在偶联反应中活性差、立体选择性低，副反应多，给产品的分离提纯带来了很大难度，在目前的报道的各种唾液酸供体合成砌块中，含有噁唑烷酮结构和金刚烷硫苷离去基团的唾液酸表现出优良的立体选择性和反应活性，但是目前的方法路线长，步骤多，副产物多，且不易分离，收率低，并且每一步均需要过硅胶柱，甚至需要多次过硅胶柱，提纯困难，难以大量制备。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术的目的是提供一种唾液酸供体的制备方法，该唾液酸供体含有噁唑烷酮结构和金刚烷硫苷离去基团，具有高活性、高立体选择性。本专利技术为实现上述目的，通过以下技术方案实现：一种唾液酸供体的制备方法，生产路线如下所示：所述制备方法包括以下步骤：①将唾液酸加入酸性树脂和甲醇1中，搅拌反应20~24小时，抽滤，得到滤液，将所得滤液旋蒸，得到油状物，将所得油状物加入有机溶剂中，搅拌，抽滤，得到滤饼，将所得滤饼溶于甲醇2中，在0~5℃下加入碱性树脂，搅拌50~60分钟，抽滤，滤液旋蒸得到化合物1；其中唾液酸、酸性树脂、甲醇1、有机溶剂、甲醇2和碱性树脂的质量体积比为100g：190~210g：2~2.5L：1.5~2L：1.5~2L：45~55g；所述的有机溶剂由体积比为3：1二氯甲烷和甲醇组成；②将步骤①所得化合物1溶于吡啶中，降温至0~5℃后向其中滴加乙酸酐，滴加完毕，升温至20~30℃搅拌反应20~24小时，然后在0~5℃下滴加饱和碳酸氢钠溶液，滴加完毕后向其中加入乙酸乙酯分液，有机相旋蒸得到油状粗品，将所得油状粗品加入甲基叔丁基醚，加热至40~50℃搅洗，冷却至20~30℃，抽滤，得到化合物2；其中步骤①所得化合物1、吡啶、乙酸酐、饱和碳酸氢钠溶液、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚的质量体积比为80~90g：450~500ml：230~250ml：280~320ml：450~500ml：450~500ml；③将步骤②所得化合物2溶于二氯甲烷中，向其中依次加入BF3-Et2O和1-金刚烷硫醇，搅拌反应10~15小时，然后降温至0~5℃，滴加饱和碳酸氢钠溶液至pH至8~9，分液，将有机相旋蒸，得到油状粗产品；将所得油状粗产品加入乙醇，升温至35~45℃然后在搅拌下向其中滴加水，滴加完毕降温至20~30℃析晶2小时，抽滤，滤饼用石油醚重结晶，得到化合物3；其中步骤②所得化合物2、二氯甲烷、BF3-Et2O、1-金刚烷硫醇、乙醇、水和石油醚的质量体积比为75~85g：150~180ml：5~6g：2~3g：180~220ml：140~160ml：240~260ml；④将步骤③所得化合物3溶于甲醇中，向其中滴加甲磺酸，滴加完毕回流搅拌20~25小时，然后降温至0~5℃，滴加三乙胺淬灭反应，减压蒸馏得到化合物4；其中步骤③所得化合物3、甲醇、甲磺酸和三乙胺的质量体积比为55~60g：580~620ml：20~25g：35~40ml；⑤向步骤④所得化合物4中加入碳酸氢钠，然后向其中加入体积比为1：1的乙腈水溶液，降温至0~5℃，向其中滴加三光气的二氯甲烷溶液，并在该温度下搅拌反应2~4小时，滴加饱和氯化钠溶液淬灭反应，加入乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压蒸馏得到粗产品，将所得粗产品用体积比1：1的丙酮和甲基叔丁基醚的混合液析晶，得到化合物5；所述三光气的二氯甲烷溶液的浓度为0.2~0.3mol/L；其中步骤④所得化合物4、碳酸氢钠、乙腈水溶液、三光气的二氯甲烷溶液、饱和氯化钠溶液、乙酸乙酯、无水硫酸钠、丙酮和甲基叔丁基醚的混合液的质量体积比为55~60g：110~120g：2.5~3L：220~230ml：2.5~3L：4~5L：400~500g：1~2L；⑥将步骤⑤所得化合物5溶于吡啶中，向其中滴加乙酸酐，搅拌反应20~24小时，减压蒸馏加入二氯甲烷和N，N-二异丙基乙胺，降温至0~5℃，向其中滴加乙酰氯，滴加结束后20~30℃下反应1~2小时，然后降温至0~5℃，用饱和碳酸氢钠溶液调节pH至8~9，分液，将有机相减压蒸馏得到油状产品，将所得油状产品用体积比1：1的丙酮水溶液析晶，得到唾液酸供体，其结构式为I；其中步骤⑤所得化合物5、吡啶、乙酸酐、二氯甲烷、N，N-二异丙基乙胺、乙酰氯和丙酮水溶液的质量体积比为20~25g：380~420ml：460~500ml：380~420ml：75~85ml：25~30ml：450~500ml。优选的，酸性树脂为AmberliteIR-120H；所述的碱性树酯为AmberliteIRA-900。优选的，步骤①中唾液酸、酸性树脂、甲醇1、有机溶剂、甲醇2和碱性树脂的质量体积比为100g：200g：2L：1.8L：1.8L：50g。优选的，三光气的二氯甲烷溶液的浓度为0.25mol/L。进一步优选的，所述制备方法包括以下步骤：①将唾液酸加入酸性树脂和甲醇1中，搅拌反应22小时，抽滤，得到滤液，将所得滤液旋蒸，得到油状物，将所得油状物加入有机溶剂中，搅拌，抽滤，得到滤饼，将所得滤饼溶于甲醇2中，在0℃下加入碱性树脂，搅拌55分钟，抽滤，滤液旋蒸得到化合物1；其中唾液酸、酸性树脂、甲醇1、有机溶剂、甲醇2和碱性树脂的质量体积比为100g：200g：2L：1.8L：1.8L：50g；所述的所述的有机溶剂由体积比为3：1二氯甲烷和甲醇组成；②将步骤①所得化合物1溶于吡啶中，降温至0℃后向其中滴加乙酸酐，滴加完毕，升温至25℃搅拌反应22小时，然后在0℃下滴加饱和碳酸氢钠溶液，滴加完毕后向其中加入乙酸乙酯分液，有机相旋蒸得到油状粗品，将所得油状粗品加入甲基叔丁基醚，加热至45℃搅洗，冷却至22℃，抽滤，得到化合物2；其中步骤①所得化合物1、吡啶、乙酸酐、饱和碳酸氢钠溶液、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚的质量体积比为85g：480ml：240ml：300ml：480ml：480ml；③将步骤②所得化合物2溶于二氯甲烷中，向其中依次加入BF3-Et2O和1-金刚烷硫醇，搅拌反应12小时，然后降温至0℃，滴加饱和碳酸氢钠溶液至pH至8，分液，将有机相旋蒸，得到油状粗产品；将所得油状粗产品加入乙醇，升温至40℃然后在搅拌下向其中滴加水，滴加完毕降温至25℃析晶2小时，抽滤，滤饼用石油醚重结晶，得到化合物3；其中步骤②所得化合物2、二氯甲烷、BF3-Et2O、1-金刚烷硫醇、乙醇、水和石油醚的质量体积比为80g：160ml：5.5g：2.5g：200ml：150ml：250ml；④将步骤③所得化合物3溶于甲醇中，向其中滴加甲磺酸，滴加完毕回本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种唾液酸供体的制备方法，其特征在于：生产路线如下所示：所述制备方法包括以下步骤：①将唾液酸加入酸性树脂和甲醇1中，搅拌反应20~24小时，抽滤，得到滤液，将所得滤液旋蒸，得到油状物，将所得油状物加入有机溶剂中，搅拌，抽滤，得到滤饼，将所得滤饼溶于甲醇2中，在0~5℃下加入碱性树脂，搅拌50~60分钟，抽滤，滤液旋蒸得到化合物1；其中唾液酸、酸性树脂、甲醇1、有机溶剂、甲醇2和碱性树脂的质量体积比为100g：190~210g：2~2.5L：1.5~2L：1.5~2L：45~55g；所述的有机溶剂由体积比为3：1二氯甲烷和甲醇组成；②将步骤①所得化合物1溶于吡啶中，降温至0~5℃后向其中滴加乙酸酐，滴加完毕，升温至20~30℃搅拌反应20~24小时，然后在0~5℃下滴加饱和碳酸氢钠溶液，滴加完毕后向其中加入乙酸乙酯分液，有机相旋蒸得到油状粗品，将所得油状粗品加入甲基叔丁基醚，加热至40~50℃搅洗，冷却至20~30℃，抽滤，得到化合物2；其中步骤①所得化合物1、吡啶、乙酸酐、饱和碳酸氢钠溶液、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚的质量体积比为80~90g：450~500ml：230~250ml：280~320ml：450~500ml：450~500ml；③将步骤②所得化合物2溶于二氯甲烷中，向其中依次加入BF3‑Et2O和1‑金刚烷硫醇，搅拌反应10~15小时，然后降温至0~5℃，滴加饱和碳酸氢钠溶液至pH至8~9，分液，将有机相旋蒸，得到油状粗产品；将所得油状粗产品加入乙醇，升温至35~45℃然后在搅拌下向其中滴加水，滴加完毕降温至20~30℃析晶2小时，抽滤，滤饼用石油醚重结晶，得到化合物3；其中步骤②所得化合物2、二氯甲烷、BF3‑Et2O、1‑金刚烷硫醇、乙醇、水和石油醚的质量体积比为75~85g：150~180ml：5~6g：2~3g：180~220ml：140~160ml：240~260ml；④将步骤③所得化合物3溶于甲醇中，向其中滴加甲磺酸，滴加完毕回流搅拌20~25小时，然后降温至0~5℃，滴加三乙胺淬灭反应，减压蒸馏得到化合物4；其中步骤③所得化合物3、甲醇、甲磺酸和三乙胺的质量体积比为55~60g：580~620ml：20~25g：35~40ml；⑤向步骤④所得化合物4中加入碳酸氢钠，然后向其中加入体积比为1：1的乙腈水溶液，降温至0~5℃，向其中滴加三光气的二氯甲烷溶液，并在该温度下搅拌反应2~4小时，滴加饱和氯化钠溶液淬灭反应，加入乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压蒸馏得到粗产品，将所得粗产品用体积比1：1的丙酮和甲基叔丁基醚的混合液析晶，得到化合物5；所述三光气的二氯甲烷溶液的浓度为0.2~0.3mol/L；其中步骤④所得化合物4、碳酸氢钠、乙腈水溶液、三光气的二氯甲烷溶液、饱和氯化钠溶液、乙酸乙酯、无水硫酸钠、丙酮和甲基叔丁基醚的混合液的质量体积比为55~60g：110~120g：2.5~3L：220~230ml：2.5~3L：4~5L：400~500g：1~2L；⑥将步骤⑤所得化合物5溶于吡啶中，向其中滴加乙酸酐，搅拌反应20~24小时，减压蒸馏加入二氯甲烷和N，N‑二异丙基乙胺，降温至0~5℃，向其中滴加乙酰氯，滴加结束后20~30℃下反应1~2小时，然后降温至0~5℃，用饱和碳酸氢钠溶液调节pH至8~9，分液，将有机相减压蒸馏得到油状产品，将所得油状产品用体积比1：1的丙酮水溶液析晶，得到唾液酸供体，其结构式为I；其中步骤⑤所得化合物5、吡啶、乙酸酐、二氯甲烷、N，N‑二异丙基乙胺、乙酰氯和丙酮水溶液的质量体积比为20~25g：380~420ml：460~500ml：380~420ml：75~85ml：25~30ml：450~500ml。...

【技术特征摘要】
1.一种唾液酸供体的制备方法，其特征在于：生产路线如下所示：所述制备方法包括以下步骤：①将唾液酸加入酸性树脂和甲醇1中，搅拌反应20~24小时，抽滤，得到滤液，将所得滤液旋蒸，得到油状物，将所得油状物加入有机溶剂中，搅拌，抽滤，得到滤饼，将所得滤饼溶于甲醇2中，在0~5℃下加入碱性树脂，搅拌50~60分钟，抽滤，滤液旋蒸得到化合物1；其中唾液酸、酸性树脂、甲醇1、有机溶剂、甲醇2和碱性树脂的质量体积比为100g：190~210g：2~2.5L：1.5~2L：1.5~2L：45~55g；所述的有机溶剂由体积比为3：1二氯甲烷和甲醇组成；②将步骤①所得化合物1溶于吡啶中，降温至0~5℃后向其中滴加乙酸酐，滴加完毕，升温至20~30℃搅拌反应20~24小时，然后在0~5℃下滴加饱和碳酸氢钠溶液，滴加完毕后向其中加入乙酸乙酯分液，有机相旋蒸得到油状粗品，将所得油状粗品加入甲基叔丁基醚，加热至40~50℃搅洗，冷却至20~30℃，抽滤，得到化合物2；其中步骤①所得化合物1、吡啶、乙酸酐、饱和碳酸氢钠溶液、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚的质量体积比为80~90g：450~500ml：230~250ml：280~320ml：450~500ml：450~500ml；③将步骤②所得化合物2溶于二氯甲烷中，向其中依次加入BF3-Et2O和1-金刚烷硫醇，搅拌反应10~15小时，然后降温至0~5℃，滴加饱和碳酸氢钠溶液至pH至8~9，分液，将有机相旋蒸，得到油状粗产品；将所得油状粗产品加入乙醇，升温至35~45℃然后在搅拌下向其中滴加水，滴加完毕降温至20~30℃析晶2小时，抽滤，滤饼用石油醚重结晶，得到化合物3；其中步骤②所得化合物2、二氯甲烷、BF3-Et2O、1-金刚烷硫醇、乙醇、水和石油醚的质量体积比为75~85g：150~180ml：5~6g：2~3g：180~220ml：140~160ml：240~260ml；④将步骤③所得化合物3溶于甲醇中，向其中滴加甲磺酸，滴加完毕回流搅拌20~25小时，然后降温至0~5℃，滴加三乙胺淬灭反应，减压蒸馏得到化合物4；其中步骤③所得化合物3、甲醇、甲磺酸和三乙胺的质量体积比为55~60g：580~620ml：20~25g：35~40ml；⑤向步骤④所得化合物4中加入碳酸氢钠，然后向其中加入体积比为1：1的乙腈水溶液，降温至0~5℃，向其中滴加三光气的二氯甲烷溶液，并在该温度下搅拌反应2~4小时，滴加饱和氯化钠溶液淬灭反应，加入乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压蒸馏得到粗产品，将所得粗产品用体积比1：1的丙酮和甲基叔丁基醚的混合液析晶，得到化合物5；所述三光气的二氯甲烷溶液的浓度为0.2~0.3mol/L；其中步骤④所得化合物4、碳酸氢钠、乙腈水溶液、三光气的二氯甲烷溶液、饱和氯化钠溶液、乙酸乙酯、无水硫酸钠、丙酮和甲基叔丁基醚的混合液的质量体积比为55~60g：110~120g：2.5~3L：220~230ml：2.5~3L：4~5L：400~500g：1~2L；⑥将步骤⑤所得化合物5溶于吡啶中，向其中滴加乙酸酐，搅拌反应20~24小时，减压蒸馏加入二氯甲烷和N，N-二异丙基乙胺，降温至0~5℃，向其中滴加乙酰氯，滴加结束后20~30℃下反应1~2小时，然后降温至0~5℃，用饱和碳酸氢钠溶液调节pH至8~9，分液，将有机相减压蒸馏得到油状产品，将所得油状产品用体积比1：1的丙酮水溶液析晶，得到唾液酸供体，其结构式为I；其中步骤⑤所得化合物5、吡啶、乙酸酐、二氯甲烷、N，N-二异丙基乙胺、乙酰氯和丙酮水溶液的质量体积比为20~25g：380~420ml：460~500ml：380~420ml：75~85ml：25~30ml：450~500ml。2.根据权利要求1所述的唾液酸供体的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：李文举，贾元雪，
申请(专利权)人：济南山目生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37