一种基于磁分离快速测定动物肌肉组织中磺胺类抗生素残留量的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于磁分离快速测定动物肌肉组织中磺胺类抗生素残留量的方法，它涉及动物体内中药物残留的理化检测技术领域；它的方法为：先将动物肌肉样品经酸化乙腈提取，Fe3O4磁颗粒的快速相分离，上层清液经正己烷去除脂肪，用HPLC-MS/MS分析测定磺胺类化合物含量，具体步骤如下：制备：动物解剖、匀浆，-20℃冰箱中低温保存；提取；净化：吸取下层清液经0.22μm有机相滤膜过滤后进行HPLC-MS/MS分析；它克服了现有的方法前处理过程步骤多、耗时长的缺点，提供一种混合溶液提取，磁性分离的快速相分离，正己烷净化，该方法的前处理简便、高效、节省溶剂，灵敏度高和成本低。

【技术实现步骤摘要】

：本专利技术涉及动物体内中药物残留的理化检测
，具体涉及一种基于磁分离一种基于磁分离快速测定动物肌肉组织中磺胺类抗生素残留量的方法。
技术介绍
：随着人民的生活水平的不断提高，动物源性食品的消费量越来越大。为了满足不断增长的消费需求，提高动物的养殖产出，人们在其养殖过程中加入很多禁限用药物，以保证其存活率。养殖过程中所涉及的药物会通过食物链在生物体内累积浓缩并最终传递到人体，对人的食用安全带来了潜在危害。磺胺类抗生素凭借其广谱、高效和价格低的特点，已经广泛应用到水产等各种动物的养殖环节中，给动物源性食品的食用安全性带来了潜在的风险。虽然动物体内磺胺类抗生素的分析方法有高效液相色谱(HPLC)、高效液相色谱三重四级杆串联质谱(HPLC-MS/MS)等检测方法，但由于动物组织样品的脂肪和蛋白质等干扰物质含量高，导致样品制备方法复杂：需采用溶剂萃取、固相萃取、氮气吹干、悬蒸浓缩等多种前处理技术进行纯化、富集。
技术实现思路
：本专利技术的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供一种基于磁分离一种基于磁分离快速测定动物肌肉组织中磺胺类抗生素残留量的方法。为了解决
技术介绍
所存在的问题，本专利技术的一种基于磁分离快速测定动物肌肉组织中磺胺类抗生素残留量的方法，它的方法为：先将动物肌肉样品经酸化乙腈提取，Fe3O4磁颗粒的快速相分离，上层清液经正己烷去除脂肪，用HPLC-MS/MS分析测定磺胺类化合物含量，具体步骤如下：(1)、制备：动物解剖、肌肉组织匀浆，-20℃冰箱中低温保存；(2)、提取：实验过程中，肌肉糜室温下融解；称取肌肉糜样品于具盖离心试管中，加提取溶液充分浸润，漩涡振荡，加入Fe3O4磁性材料混合物，在外界磁铁作用下快速相分离；(3)、净化：移取1mL样品提取液上清液于离心管中，氮吹浓缩，加入1mL1‰甲酸溶液溶解残杂，将溶液转移到含有1mL正己烷的离心管中涡旋振荡，离心，弃去上层正己烷相，吸取下层清液经0.22μm有机相滤膜过滤后进行HPLC-MS/MS分析。作为优选，所述的提取溶液由1‰(V/V)甲酸的乙腈组成；所述的Fe3O4磁性材料混合物由2g无水硫酸镁、0.5g氯化钠和100mgFe3O4磁性颗粒组成。本专利技术的仪器参数为：液相色谱：带自动进样器，毛细管电压3.2kV；壳气45Arb；辅助气10Arb；毛细管温度350℃；蒸发温度200℃；峰宽Q10.7Da、Q30.7Da，碰撞气压力1.5mTorr；反相色谱柱为kromasilC18反相色谱柱(4.0mm×100mm，5.0μm)；液体自动进样器：进样体积3μL；三元流动相，流动相A：0.5％甲酸溶液(V/V)、流动相B：甲醇。本专利技术具有以下有益效果：它克服了现有的方法前处理过程步骤多、耗时长的缺点，提供一种混合溶液提取，磁性分离的快速相分离，正己烷净化，采用配置有自动进样器的HPLC-MS/MS直接测定动物肌肉组织中磺胺类抗生素的方法，该方法的前处理简便、高效、节省溶剂，灵敏度高和成本低。具体实施方式：本具体实施方式采用如下技术方案：先将动物肌肉样品经酸化乙腈提取，Fe3O4磁颗粒的快速相分离，上层清液经正己烷去除脂肪，用HPLC-MS/MS分析测定磺胺类化合物含量，具体步骤如下：(1)、制备：动物解剖、肌肉组织匀浆，-20℃冰箱中低温保存；(2)、提取：实验过程中，肌肉糜室温下融解。称取肌肉糜样品于具盖离心试管中，加提取溶液充分浸润，漩涡振荡，加入Fe3O4磁性材料混合物，在外界磁铁作用下快速相分离；(3)、净化：移取1mL样品提取液上清液于离心管中，氮吹浓缩，加入1mL1‰甲酸溶液溶解残杂，将溶液转移到含有1mL正己烷的离心管中涡旋振荡，离心，弃去上层正己烷相，吸取下层清液经0.22μm有机相滤膜过滤后进行HPLC-MS/MS分析。进一步的，所述的提取溶液由1‰(V/V)甲酸的乙腈组成；所述的Fe3O4磁性材料混合物由2g无水硫酸镁、0.5g氯化钠和100mgFe3O4磁性颗粒组成。本具体实施方式的仪器参数为：液相色谱：带自动进样器，毛细管电压3.2kV；壳气45Arb；辅助气10Arb；毛细管温度350℃；蒸发温度200℃；峰宽Q10.7Da、Q30.7Da，碰撞气压力1.5mTorr；反相色谱柱为kromasilC18反相色谱柱(4.0mm×100mm，5.0μm)；液体自动进样器：进样体积3μL；三元流动相，流动相A：0.5％甲酸溶液(V/V)、流动相B：甲醇。实施例：实施例一：1、鱼体样品制备：鲤鱼组织经过匀浆，保存在-20℃冰箱中；2、提取：鱼糜室温下融解，称取2g样品于50mL具盖离心管中，加5mL混合溶液充分浸润，涡旋混匀；加入Fe3O4磁性材料混合物(由2g无水硫酸镁、0.5g氯化钠和100mgFe3O4磁性颗粒组成)，立即涡旋混匀，防止无水硫酸镁结块，在外界磁铁的作用下快速相分离；3、净化：移取样品提取液上清液1mL于5mL离心管中，氮吹浓缩，加入加入1mL1‰甲酸溶液溶解残杂，将溶液转移到含有1mL正己烷的5mL离心管中涡旋振荡，离心，弃去上层正己烷相，吸取下层清液经0.22μm有机相滤膜过滤后进行HPLC-MS/MS分析。仪器参数：HPLC-MS/MS：带自动进样器，毛细管电压3.2kV；鞘气45Arb；辅助气10Arb；毛细管温度350℃；蒸发温度200℃；峰宽Q10.7Da、Q30.7Da，碰撞气压力1.5mTorr；反相色谱柱为kromasilC18反相色谱柱(4.0mm×100mm，5.0μm)；液体自动进样器：进样体积3μL；液体自动进样器：进样体积3μL。实施例二：分别在空白鱼样品中添加0.1、0.25、0.5mg/kg三档浓度的磺胺类类抗生素标样，提取、净化后进样，计算回收率，重复5次。鲤鱼肌肉的加标回收率如下：以上所述，仅用以说明本专利技术的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本专利技术的技术方案所做的其它修改或者等同替换，只要不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的权利要求范围当中。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于磁分离快速测定动物肌肉组织中磺胺类抗生素残留量的方法，其特征在于：，它的方法为：先将动物肌肉样品经酸化乙腈提取，Fe3O4磁颗粒的快速相分离，上层清液经正己烷去除脂肪，用HPLC‑MS/MS分析测定磺胺类化合物含量，具体步骤如下：(1)、制备：动物解剖、肌肉组织匀浆，‑20℃冰箱中低温保存；(2)、提取：实验过程中，肌肉糜室温下融解；称取肌肉糜样品于具盖离心试管中，加提取溶液充分浸润，漩涡振荡，加入Fe3O4磁性材料混合物，在外界磁铁作用下快速相分离；(3)、净化：移取1mL样品提取液上清液于离心管中，氮吹浓缩，加入1mL 1‰甲酸溶液溶解残杂，将溶液转移到含有1mL正己烷的离心管中涡旋振荡，离心，弃去上层正己烷相，吸取下层清液经0.22μm有机相滤膜过滤后进行HPLC‑MS/MS分析。

【技术特征摘要】
1.一种基于磁分离快速测定动物肌肉组织中磺胺类抗生素残留量的方法，其特征在于：，它的方法为：先将动物肌肉样品经酸化乙腈提取，Fe3O4磁颗粒的快速相分离，上层清液经正己烷去除脂肪，用HPLC-MS/MS分析测定磺胺类化合物含量，具体步骤如下：(1)、制备：动物解剖、肌肉组织匀浆，-20℃冰箱中低温保存；(2)、提取：实验过程中，肌肉糜室温下融解；称取肌肉糜样品于具盖离心试管中，加提取溶液充分浸润，漩涡振荡，加入Fe3O4磁性材料混合物，在外界磁铁作用下快速相分离；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晋成，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11