用于执行多重分析方法的对照技术

本发明专利技术涉及可以用于确保多重分析方法的结果的对照。本发明专利技术因此涉及包含一种或若干种对照的固体支持体，和它们在多重分析方法中检测在样品中潜在存在的若干被分析物的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及能够用于确保包括一个或若干个步骤的多重分析方法的结果的对照。专利技术背景多重分析方法允许同时检测在同一样品中的若干种被分析物的潜在存在。多重分析具有若干优点，如：通过使得可以同时分析若干种被分析物而节省时间，试剂和消费品的较低消耗，以及较低量的为检测被分析物所需的样品。通常，使用一种或若干种对照，以验证在寻求检测一种或若干种被分析物的存在的分析方法的结束时获得的结果。由分析装置提供的结果的可靠性实际上是一个主要问题，尤其是当涉及意在用于医学诊断和/或献血(transfusiondonation)资格的分析的时候。一种传统上使用的阳性对照由校验对已知化合物的检测来构成，所述已知化合物以已知的量使用并且对应于在给定样品中寻求其潜在存在的被分析物。然而，此类型的对照仅使得可以验证分析方法的总体的执行，并且没有使得可以验证方法的每个步骤。此外，可以使用其他类型的对照。例如，文献WO2004/046685使用对照以校验在免疫组织化学试验中使用的试剂的品质。对于那种目标，使用对照载片，其包含不同的对照化合物的一系列溶液。在对照化合物处的对照侧的阳性着色必须仅在如果在免疫标记方法期间使用了所述对照化合物的专门抗体或所述对照化合物的报道物(reporter)或底物的情况下才被观察到。这一用于校验试剂的品质的方法需要在对照载片上使用大数量的对照化合物。事实上，目前没有使得可以在多重分析方法的情况下对全部步骤(尤其是，样品的沉积、试剂的沉积、不同的水和温育循环)进行对照的简单手段。然而，在输血和医疗诊断的领域中，获得高水平的安全性和追踪能力是至关重要的。因此，对于提供使得可以保证在执行多重分析方法期间获得的结果的可靠性并且尤其使得可以验证方法的每个步骤的方案，存在着实际需要。专利技术详述本专利技术基于由专利技术人发现的对照手段，其通过校验多重分析方法的每个步骤已经正确进行(且不是通过仅仅校验方法的总体的执行)，使得可以保证获得的结果的可靠性。因此，专利技术人首次提供了使得可以验证样品本身的沉积以及更一般地验证方法的不同步骤的对照。这样，通过仅将根据本专利技术的两或三种对照组合，可以验证样品的沉积步骤、在样品中待检测的被分析物的专门检测配体的一个或多个沉积步骤、不同的洗涤和温育步骤，以及如果可能，检测标记物的报道物的沉积步骤和/或偶联到所述报道物的标记物的底物的沉积步骤。在根据本专利技术的多重分析方法中，为了验证整个多重方法的每个步骤，仅需要两或三种对照。除了验证结果以外，使用根据本专利技术的对照也使得可以鉴别在执行多重分析方法期间存在的潜在错误，以及例如修改相应的一个或多个步骤以对分析方法的执行进行改进。本专利技术也具有容易执行、仅需要有限数量的对照、不对分析方法添加附加步骤以及不需要使用附加器材(例如，不需要使用分光光度计)的优点。事实上，在单一位置(例如，具有其中安放样品的孔的管)完成分析方法的多个步骤，并且同时加工对照(例如以斑点(spot)或珠的形式)作为用于检测被分析物的斑点或珠。第一类根据本专利技术的对照是样品的沉积的对照，使得可以校验样品的沉积。在下文概述某些实施方案中，样品的沉积的对照也使得可以校验一种或若干种被分析物检测配体的沉积。“样品或添加剂的沉积”或者“样品或添加剂的添加”指的是，样品或至少一种添加剂在固定在固体支持体上的感兴趣的化合物的存在下的安放。“至少一”在本申请的含义内指的是一或若干，若干尤其意味着二、三、四、五、六、七、八、九、十、十一、十二、十三、十四、十五、十六或多于十六。“检测配体、报道物或底物的沉积”或“检测配体、报道物或底物的添加”指的是检测配体、报道物或底物在固定在固体支持体上的感兴趣的化合物或任何固定在所述感兴趣的化合物上的化合物的存在下的安放。第二类对照是被分析物的检测配体的沉积的对照，使得可以校验在样品中待检测的被分析物的一种以上专门检测配体(检测配体的混合物)的沉积。此对照也使得可以验证温育和洗涤步骤。第三类对照是报道物的沉积的对照，使得可以校验一个或多个显影步骤已经正确进行。报道物的沉积的对照在检测配体的间接标记的情况下是有用的。最后，根据本专利技术的对照特别适合用于在微列阵中(例如在微量培养板(microplate)型的固体支持体上)或者在液相芯片中(例如在珠型的固体支持体上)进行多重分析方法。样品待分析的样品优选是生物样品。生物样品可以是生物流体，如血液、血液衍生物(如血浆或血清)、尿液、脑脊髓液、唾液，或组织样品，如由活组织检查获得的组织、细胞或细胞组、植物提取物，或它们的组合。血液衍生物指的是任何从血液样品获得的产物，尤其是流体。待分析的样品也可以是培养基和/或培养物上清液。在被分析之前，样品可以经历一个或若干个前处理步骤，如稀释、离心、热和/或化学处理、细胞溶解(例如通过一种或若干种离液剂、一种或若干种还原剂和/或通过加热)、萃取、PCR(聚合酶链反应)、添加未被标记的检测配体、或它们的组合。对于执行中和试验来说，添加未被标记的检测配体尤其有用，中和试验本身是本领域技术人员已知的试验。样品也可以是至少两种样品的混合物，所述样品可以是相同性质或不同性质的。不同性质的样品的混合物的实例是血浆和血清的混合物、血液和血浆的混合物、血清和血浆的混合物、或血液、血清和血浆的混合物。一种优选的根据本专利技术的样品是血液和/或血液衍生物的样品或样品混合物。被分析物在样品中待检测的被分析物可以是人们希望在样品中检测和/或量化任何类型的天然的或合成的化合物。被分析物可以是例如蛋白、肽、糖蛋白、碳水化合物、脂质、细胞、细胞器、病毒或核酸。细胞可以是动物细胞、植物细胞、细菌细胞、原生动物、后生动物细胞、酵母细胞、真菌细胞或原生动物。核酸指代通过磷酸二酯键连接的核苷的聚合物，如脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)或它们的类似物，如硫代膦酸酯或硫代酯，以单链或双链的形式。被分析物或多种被分析物的至少一种或多种被分析物例如选自由以下各项组成的组：抗原、抗体、抗体片段、半抗原、激素、激素受体、酶或核酸。在一个优选的实施方案中，一种或多种被分析物不是核酸。一种或多种被分析物例如选自由以下各项组成的组：抗原、抗体、抗体片段、半抗原、激素、激素受体和酶。在此，“抗原”指的是天然的、重组的或合成的分子，其被免疫系统的抗体或细胞所识别并且当它在对宿主的免疫系统合适的条件下存在时能够引起免疫应答。这可以是分子，尤其是多肽，包括或由以下构成：至少一个可以是线性或构象的表位。术语“线性表位”指的是能够结合至针对所述抗原的抗体分子的多肽，尤其是包含或由以下构成的肽：3至15个、更通常5至15个氨基酸，优选至少6、8、10或12个氨基酸。术语“构象表位”指的是被抗体所识别并且由空间中的若干氨基酸的并列所决定的三维结构，所述若干氨基酸在此抗体所针对的蛋白质的肽序列(或多肽)中可以是不连续的，但是所述若干氨基酸由于多肽链的折叠而使它们自己在空间中相互靠近，并且因此可以形成可以被抗体识别的图案。抗原是例如蛋白质(尤其是天然的或重组的蛋白质)、肽(例如，合成肽)、糖蛋白、碳水化合物或脂质，所述肽能够与载体分子例如BSA(牛血清白蛋白)有关联或没有关联。在本申请中，“载体分子”尤其指的是蛋白质或碳水化合物载体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种适合用于至少一种样品的多重分析的固体支持体，所述固体支持体包含至少一个区划，所述区划包含至少一个对照斑点和至少两个用于被分析物的检测斑点，其特征在于，所述对照斑点选自由以下各项组成的组：用于对样品的沉积进行对照的斑点，用于对被分析物的检测配体的沉积进行对照的斑点，和用于对报道物的沉积进行对照的斑点。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.04.04 FR 14530381.一种适合用于至少一种样品的多重分析的固体支持体，所述固体支持体包含至少一个区划，所述区划包含至少一个对照斑点和至少两个用于被分析物的检测斑点，其特征在于，所述对照斑点选自由以下各项组成的组：用于对样品的沉积进行对照的斑点，用于对被分析物的检测配体的沉积进行对照的斑点，和用于对报道物的沉积进行对照的斑点。2.根据权利要求1所述的固体支持体，其特征在于，所述对照斑点或多个对照斑点中的一个是用于对样品的沉积进行对照的斑点或用于对被分析物的检测配体的沉积进行对照的斑点。3.根据权利要求2所述的固体支持体，其特征在于，所述区划包含至少一个用于对报道物的沉积进行对照的斑点。4.根据权利要求1至3中的一项所述的固体支持体，其特征在于，所述区划包含至少一个用于对样品的沉积进行对照的斑点和至少一个用于对被分析物的检测配体的沉积进行对照的斑点。5.根据权利要求1至4中的一项所述的固体支持体，其特征在于，所述用于对样品的沉积进行对照的斑点包含对照化合物的至少一种捕捉配体。6.根据权利要求1至5中的一项所述的固体支持体，其特征在于，所述用于对被分析物的检测配体的沉积进行对照的斑点包含添加剂的至少一种捕捉配体。7.根据权利要求1或3至6中的一项所述的固体支持体，其特征在于，所述用于对报道物的沉积进行对照的斑点包含间接标记物或偶联到间接标记物的载体分子。8.适合用于样品的多重分析的成套珠，所述成套珠包含至少一种对照珠和至少两种用于被分析物的检测珠，其特征在于，所述对照珠选自由以下各项组成的组：用于对样品的沉积进行对照的珠，用于对被分析物的检测配体的沉积进行对照的珠，和用于对报道物的沉积进行对照的珠。9.根据权利要求8所述的成套珠，所述成套珠包含至少一种用于对样品的沉积进行对照的珠，至少一种用于对被分析物的检测配体的沉积进行对...

【专利技术属性】
技术研发人员：克里斯托夫·勒内·罗歇·韦德里纳，纳迪娜·玛丽·勒妮·郎贝尔，
申请(专利权)人：伯乐创新公司，
类型：发明
国别省市：法国;FR