适配体靶向脂质体载药系统及制备方法和应用技术方案

本发明专利技术涉及一种适配体靶向脂质体载药系统及其制备方法，该适配体靶向脂质体载药系统由核酸适配体、抗肿瘤药物以及使用鞘磷脂制备的纳米脂质体组成，其中所述抗肿瘤药物包裹在所述纳米脂质体中，所述核酸适配体通过化学键连接在所述纳米脂质体上特异识别肿瘤细胞。本发明专利技术使用鞘磷脂来制备纳米脂质体，在包裹抗肿瘤药物后连接适量的核酸适配体，其中鞘磷脂含有较多的酰胺键能够更好地抵抗化学和生物的降解，保护脂质体结构的稳定，提高肿瘤细胞的药物富集量，从而提高抗肿瘤效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于癌症的靶向给药系统，更具体地说，涉及一种适配体靶向脂质体载药系统及制备方法和应用。
技术介绍
脂质体(Liposome)，由磷脂或其他类脂化合物形成的具有双分子层结构的封闭囊泡，是一种性质稳定、在血液循环中具有长效半衰期的非病毒载体。将抗肿瘤药物包封在脂质体中，不仅可以保护药物在进入病灶部位前免受机体酶的分解，延长药物循环时间，增加药物在病灶部位的浓度和作用时间，提高疗效，降低毒性；而且和其它传递系统相比，脂质体能够提供优越的生物相溶性、生物可降解性、低毒性、尺寸可控性及表面功能可修饰性。虽然抗肿瘤药物的脂质体制剂传递药物的高效性，降低了抗肿瘤药物的毒副作用，增强了癌症的治疗效果。但是以传统的卵磷脂、胆固醇制备的常规脂质体在体内多被网状内皮系统(reticuloendothelialsystem，RES)吞噬，在血液循环中驻留时间较短，并且其物理化学稳定性差，储存和应用过程中容易发生融合聚集，包封药物容易泄漏、表面官能团少、不易进行多功能化修饰，并且无靶向性、功能单一等。因此，抗肿瘤药物脂质体制剂的稳定性、靶向性和药物传递效率有待提高。适配体是一类经筛选得到的单链DNA或RNA，通过三维结构以高亲和力特异性结合在靶标上，又被称作“化学抗体”。和单克隆抗体相比，适配体分子量小、易于修饰合成、低毒低免疫原性、组织渗透性强等，因此，适配体被广泛应用于药物靶向治疗及肿瘤检测等领域。>现有技术中已有研究将核酸适配体通过化学键连接到抗肿瘤药物脂质体上，以制备适配体靶向脂质体载药系统，增强其稳定性、靶向性和药物传递效率。但是这些适配体靶向脂质体载药系统仍然采用常规的磷脂如卵磷脂等原料制备，难以抵抗体内的化学和生物的降解，因而也不适于制备尺寸较小的纳米颗粒。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题在于，针对现有常规磷脂制备的适配体靶向脂质体载药系统稳定性不高的缺陷，提供一种使用鞘磷脂制备的适配体靶向脂质体载药系统及制备方法和应用。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：构造一种适配体靶向脂质体载药系统，由核酸适配体、抗肿瘤药物以及使用鞘磷脂制备的纳米脂质体组成，其中所述抗肿瘤药物包裹在所述纳米脂质体中，所述核酸适配体通过化学键连接在所述纳米脂质体上特异识别肿瘤细胞。在根据本专利技术所述的适配体靶向脂质体载药系统中，所述使用鞘磷脂制备的纳米脂质体包括鞘磷脂、磷脂稳定剂、胆固醇类成分和功能性磷脂；其中，所述磷脂稳定剂选自二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇和磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇中的一种或多种；所述胆固醇类成分选自胆固醇及其衍生物、胆甾烷、胆酸和胆汁酸中的一种或多种；所述功能性磷脂选自二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺交联物、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基交联物、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-N-琥珀酰亚胺和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基交联物中的一种或多种。在根据本专利技术所述的适配体靶向脂质体载药系统中，所述适配体靶向脂质体载药系统的粒径为100-120nm。在根据本专利技术所述的适配体靶向脂质体载药系统中，所述核酸适配体为sgc8、A10、S2.2、AS1411或TLS11a；所述抗肿瘤药物为硫酸长春新碱、阿霉素、柔红霉素、顺铂或紫杉醇。在根据本专利技术所述的适配体靶向脂质体载药系统中，优选地，所述适配体靶向脂质体载药系统由核酸适配体sgc8、硫酸长春新碱以及使用鞘磷脂制备的纳米脂质体组成，其中使用鞘磷脂制备的纳米脂质体包括以下成分：鞘磷脂、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、胆固醇和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺交联物。本专利技术还提供了一种适配体靶向脂质体载药系统的制备方法，该制备方法包括：S1、将鞘磷脂、胆固醇类成分、磷脂稳定剂和功能性磷脂按摩尔比为50-60：35-45：4-5：0.2-0.4溶解在有机溶剂中制备空白脂质体；S2、使用步骤S1的空白脂质体制备包裹抗肿瘤药物的脂质体；S3、将核酸适配体连接至包裹抗肿瘤药物的脂质体上，制备适配体靶向脂质体载药系统。在根据本专利技术所述的适配体靶向脂质体载药系统的制备方法中，所述步骤S1具体为：将鞘磷脂成分、胆固醇类成分、磷脂稳定剂和功能性磷脂按摩尔比为50-60：35-45：4-5：0.2-0.4溶解在氯仿中的混合，在50-70℃下以转速为100-200rpm/min旋转并抽真空形成干燥的脂质薄膜，去除有机溶剂；所述脂质薄膜分散在枸橼酸缓冲液中，在液氮和50-60℃水浴反复冻融多次，并经过粒径筛选后得到空白脂质体。在根据本专利技术所述的适配体靶向脂质体载药系统的制备方法中，所述步骤S3中采用核酸适配体为sgc8时，在包裹抗肿瘤药物的脂质体的溶液中按照核酸适配体sgc8和功能性磷脂的摩尔比为1：5-1：10加入核酸适配体sgc8，氮气保护环境下室温反应，并透析洗涤多余的功能性磷脂、抗肿瘤药物和核酸适配体，得到所述适配体靶向脂质体载药系统。本专利技术还提供了一种治疗和/或预防肿瘤药物，该治疗和/或预防肿瘤药物的活性成分为如前所述的适配体靶向脂质体载药系统。本专利技术还提供了如前所述的适配体靶向脂质体载药系统在治疗和/或预防肿瘤中的应用。实施本专利技术的适配体靶向脂质体载药系统及制备方法和应用，具有以下有益效果：本专利技术使用鞘磷脂来制备纳米脂质体，在包裹抗肿瘤药物后连接适量的核酸适配体，其中鞘磷脂含有较多的酰胺键能够更好地抵抗化学和生物的降解，保护脂质体结构的稳定，提高肿瘤细胞的药物富集量，从而提高抗肿瘤效果。附图说明下面将结合附图及实施例对本专利技术作进一步说明，附图中：图1为根据本专利技术优选实施例的适配体靶向脂质体载药系统的制备方法图；图2为根据本专利技术优选实施例的适配体靶向脂质体载药系统的结构示意图；图3A-C分别为根据本专利技术优选实施例的适配体靶向脂质体载药系统各个阶段颗粒的透射电镜图；图4为根据本专利技术优选实施例的适配体靶向脂质体载药系统各个阶段颗粒的粒径分布图；图5为CEM细胞与sgc8/VCR-Lipo和VCR-Lipo的结合实验图；图6为不同处理组的荷瘤小鼠的肿瘤体积的变化图；图7为荷瘤小鼠在不同的存活率时距接种肿瘤的时间图；图8为不同处理的荷瘤BalB/c裸鼠的肿瘤大小图；图9为适配体靶向脂质体载药系统的体内靶向作用图。具体实施方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种适配体靶向脂质体载药系统，其特征在于，由核酸适配体、抗肿瘤药物以及使用鞘磷脂制备的纳米脂质体组成，其中所述抗肿瘤药物包裹在所述纳米脂质体中，所述核酸适配体通过化学键连接在所述纳米脂质体上特异识别肿瘤细胞。

【技术特征摘要】
1.一种适配体靶向脂质体载药系统，其特征在于，由核酸适配体、抗肿
瘤药物以及使用鞘磷脂制备的纳米脂质体组成，其中所述抗肿瘤药物包裹在所
述纳米脂质体中，所述核酸适配体通过化学键连接在所述纳米脂质体上特异识
别肿瘤细胞。
2.根据权利要求1所述的适配体靶向脂质体载药系统，其特征在于，所
述使用鞘磷脂制备的纳米脂质体包括鞘磷脂、磷脂稳定剂、胆固醇类成分和功
能性磷脂；
其中，所述磷脂稳定剂选自二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、二肉豆
蔻酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇和磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇中的一种或多种；
所述胆固醇类成分选自胆固醇及其衍生物、胆甾烷、胆酸和胆汁酸中的一
种或多种；
所述功能性磷脂选自二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺交
联物、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基交联物、二硬脂酰基磷脂酰乙
醇胺-聚乙二醇-N-琥珀酰亚胺和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基交联
物中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的适配体靶向脂质体载药系统，其特征在于，所
述适配体靶向脂质体载药系统的粒径为100-120nm。
4.根据权利要求1所述的适配体靶向脂质体载药系统，其特征在于，所
述核酸适配体为sgc8、A10、S2.2、AS1411或TLS11a；所述抗肿瘤药物为硫
酸长春新碱、阿霉素、柔红霉素、顺铂或紫杉醇。
5.根据权利要求1所述的适配体靶向脂质体载药系统，其特征在于，所
述适配体靶向脂质体载药系统由核酸适配体sgc8、硫酸长春新碱以及使用鞘磷
脂制备的纳米脂质体组成，其中使用鞘磷脂制备的纳米脂质体包括以下成分：
鞘磷脂、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、胆固醇和二硬脂酰基磷脂酰乙
醇胺-聚乙二醇-...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢小玲，赵永祥，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：广西;45