一种诊断与热化疗相结合的新型淋巴瘤靶向探针的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种诊断与热化疗相结合的新型淋巴瘤靶向探针的制备方法，将氯金酸和表面活性剂的水溶液混合，加入硝酸银溶液，对苯二酚，冰冻的硼氢化钠溶液，加入碱、硅源、磁性化合物，分散在正乙烷中，加入硅烷偶联剂得到粉末状产物；将粉末分散于去离子水中，加入交联剂和透明质酸钠，得到纳米颗粒；将纳米颗粒分散在含有硝酸铵/乙醇溶液中，加入阿霉素，得到诊断与热化疗相结合的新型淋巴瘤靶向探针。本发明专利技术利用金纳米棒在近红外下所产生的热效应，使组织升温，加速肿瘤细胞死亡，另外掺杂磁性离子的介孔二氧化硅具有良好的磁共振成像效果。

Method for preparing new type lymphoma target probe combined with diagnosis and thermotherapy

The present invention provides a novel target for lymphoma diagnosis and combined thermochemotherapy preparation method to probe, chloroauric acid and surfactant aqueous solution, adding silver nitrate solution, hydroquinone, sodium borohydride solution frozen, adding alkali, silica source, magnetic compounds are dispersed in ethane silane coupling agent, powder products; the powder dispersed in deionized water, adding cross-linking agent and sodium hyaluronate, particles; nano particles dispersed in containing ammonium nitrate / ethanol solution, adding doxorubicin, diagnosis and thermochemotherapy combination of new lymphoma targeting probe. The invention makes use of the thermal effect generated by the gold nanorods in the near infrared to make the organization to warm up and accelerate the death of the tumor cells.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及纳米材料的制备领域，具体地涉及一种诊断与热化疗相结合的新型淋巴瘤靶向探针的制备方法。
技术介绍
恶性肿瘤是威胁人类生命和健康的首要敌人，其中淋巴结转移是肿瘤最常见的转移方式。因此，对早期的淋巴转移瘤进行准确诊断和治疗将有助于提高患者的生存机率。热化疗是指将化疗和热疗结合应用治疗肿瘤的一种新疗法，进而使肿瘤组织温度上升到有效治疗温度，并维持一定时间，利用正常组织和肿瘤细胞对温度耐受能力的差异，达到既能使肿瘤细胞凋亡、又不损伤正常组织的治疗目的。热疗-化疗的联合治疗可以明显增强抗肿瘤疗效,主要由于热疗在杀死癌细胞的同时,有助于化疗药物进入肿瘤细胞和增加化疗药物的细胞毒性（DengH,DaiF,MaG,etal.TheranosticGoldNanomicellesmadefromBiocompatibleComb‐likePolymersforThermochemotherapyandMultifunctionalImagingwithRapidClearance[J].AdvancedMaterials,2015）。有效热疗的关键就是选择适合的产热材料。近年来，金纳米棒应用于肿瘤热疗已成为关注的研究热点。金纳米棒随长宽比变化，从可见（550nm）到近红外（1550nm）连续可调的表面等离子共振波长，因此可以吸收连续波激光器发射出的近红外低能辐射，使得金纳米棒内部产生电子跃迁形成不稳定电子-空穴对，当电子-空穴对重排恢复至稳定状态时就会产生大量的热（TongL,WeiQ,WeiA,etal.Goldnanorodsascontrastagentsforbiologicalimaging:opticalproperties,surfaceconjugationandphotothermaleffects??[J].PhotochemistryandPhotobiology,2009,85(1):21-32）。由此产生的热量能起到对癌症细胞的加热作用，从而达到杀死癌细胞的目的。当前，纳米材料由于其纳米尺度所固有的独特物理性质，在肿瘤的诊断与治疗方面可以发挥重要的作用。新型纳米系统的热疗-化疗联合治疗研究正成为肿瘤治疗的研究热点。目前，已报道Tang等（TangH,ShenS,GuoJ,etal.GoldnanorodsmSiO2withasmartpolymershellresponsivetoheat/near-infraredlightforchemo-photothermaltherapy[J].JournalofMaterialsChemistry,2012,22(31):16095-16103）利用金纳米棒复合介孔二氧化硅的纳米粒负载阿霉素,实现了集热疗、化疗和近红外成像于一体的生物应用，并证实DOX-GNRsmSiO2加激光照射的疗效优于单纯化疗。虽然肿瘤高通透性和滞留效应可以促进纳米粒在肿瘤组织的选择性分布，但是摄取效率相比主动靶向低，因此治疗效果仍受到影响。临床应用更倾向于发展能主动识别肿瘤细胞表面受体——靶向肿瘤组织的“智能型”纳米材料。
技术实现思路
针对现有技术中的缺陷，以临床最广泛使用的阳性造影剂为基础，提供一种诊断与热化疗相结合的新型淋巴瘤靶向探针的制备方法。盖方法先合成具有热疗效果的金纳米棒，再在其外部合成掺杂磁性化合物的介孔二氧化硅，并接上靶向大分子，随后吸附抗癌药物阿霉素，形成诊断与热化疗相结合的新型淋巴瘤靶向探针。该技术制备方法简单，所得的产物稳定性好，能满足临床应用的需求。为实现这样的目的，在本专利技术的技术方案中，以氯金酸和硼氢化钠、对苯二酚为原料合成具有热疗功能的金纳米棒，以表面活性剂为辅助介质，通过添加碱，硅源合成壳结构，同时添加磁性离子参与水解，由此实现磁共振造影剂的功能。本专利技术的方法包括如下步骤：a．将质量份数为100~200份氯金酸和50~100份的表面活性剂的水溶液混合，加入5~20份的硝酸银溶液，随后加入40~60份的对苯二酚，最后加入冰冻的硼氢化钠溶液10~30份，搅拌一定时间后，静置一段时间得到充分生长的金纳米棒水溶液；b．在质量份数为800~1000份金纳米棒水溶液中加入20~50份碱、20~50份硅源、10~20份磁性化合物，在20℃以上搅拌6~10小时后用乙醇和去离子水在5000转以上离心洗涤，并分散在300~400份正乙烷中，加入2~6份硅烷偶联剂在20℃以上搅拌4~6小时后，用乙醇和去离子水在5000转以上离心洗涤，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物；c．将上述b所得的质量份数为100～200份的粉末状纳米颗粒分散于800～900份的去离子水中，加入10～20份的交联剂和50～60份的透明质酸钠，在30℃以上搅拌5小时以上后，用水洗涤，并5000转以上离心，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物；d．将上述c所得质量份数为20~30份粉末状产物后，加入质量份数为100～200份乙醇、1～5份硝酸铵，60～80℃下回流并搅拌至少1小时后得以去除表面活性剂，最后用乙醇和去离子水洗涤，并5000转以上离心，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物；e.将上述d中所得到的质量份数为30~50份粉末状产物溶于200~400份去离子水中，并加入5~10份阿霉素，在30℃以上搅拌8小时以上后，用水洗涤，并5000转以上离心，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物。优选地，其所述的表面活性剂为十六烷基三甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴化铵、双十八烷基二甲基溴化铵、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、四丁酚醛、十二烷基苯磺酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯、山梨醇酐单硬脂酸酯、椰油脂肪酸二乙醇酰胺、脂肪醇聚氧乙烯醚、月桂醇聚氧乙烯醚中的至少一种。优选地，其所述的碱为氢氧化钾、氢氧化钠、氨水、氢氧化钙、氢氧化钡、氢氧化铜、氢氧化镁、氢氧化亚铁、氢氧化铁、氢氧化铝中的至少一种。优选地，其所述的磁性化合物为二氧化锰、四氧化三锰、氯化锰、硫酸锰、铬酸钙、碳化锰、醋酸钙、高锰酸钾、氯化钆，硫酸钆、氧化钆、四氧化三铁、氧亚铁、四氧化三铁、氧化铁、氢氧化亚铁、氢氧化铁、硫酸亚铁和氯化铁中的至少一种。优选地，其所述的硅源为一氧化硅、三氯氢硅、二硫化硅、原硅酸、四氟化硅、四氯化硅、四溴化硅、四碘化硅、1,1,3,3-四甲基二硅氮烷、N-三甲基硅基咪唑、甲硅烷、乙硅烷、丙硅烷、异丁硅烷、正戊硅烷、环戊硅烷、白炭黑中的至少一种。优选地，其所述的交联剂为四异氰本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诊断与热化疗相结合的新型淋巴瘤靶向探针的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：a．将质量份数为100～200份氯金酸和50～100份的表面活性剂的水溶液混合，加入5～20份的硝酸银溶液，随后加入40～60份的对苯二酚，最后加入冰冻的硼氢化钠溶液10～30份，搅拌一定时间后，静置一段时间得到充分生长的金纳米棒水溶液；b．在质量份数为800～1000份金纳米棒水溶液中加入20～50份碱、20～50份硅源、10～20份磁性化合物，在20℃以上搅拌6～10小时后用乙醇和去离子水在5000转以上离心洗涤，并分散在300～400份正乙烷中，加入2～6份硅烷偶联剂在20℃以上搅拌4～6小时后，用乙醇和去离子水在5000转以上离心洗涤，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物；c．将上述b所得的质量份数为100～200份的粉末状纳米颗粒分散于800～900份的去离子水中，加入10～20份的交联剂和50～60份的透明质酸钠，在30℃以上搅拌5小时以上后，用水洗涤，并5000转以上离心，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物；d．将上述c所得质量份数为20～30份粉末状产物后，加入质量份数为100～200份乙醇、1～5份硝酸铵，60～80℃下回流并搅拌至少1小时后得以去除表面活性剂，最后用乙醇和去离子水洗涤，并5000转以上离心，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物；e. 将上述d中所得到的质量份数为30～50份粉末状产物溶于200～400份去离子水中，并加入5～10份阿霉素，在30℃以上搅拌8小时以上后，用水洗涤，并5000转以上离心，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物。...

【技术特征摘要】
1.一种诊断与热化疗相结合的新型淋巴瘤靶向探针的制备方法，其特征在于该方法包
括如下步骤：
a．将质量份数为100～200份氯金酸和50～100份的表面活性剂的水溶液混合，加入5～
20份的硝酸银溶液，随后加入40～60份的对苯二酚，最后加入冰冻的硼氢化钠溶液10～30
份，搅拌一定时间后，静置一段时间得到充分生长的金纳米棒水溶液；
b．在质量份数为800～1000份金纳米棒水溶液中加入20～50份碱、20～50份硅源、10～
20份磁性化合物，在20℃以上搅拌6～10小时后用乙醇和去离子水在5000转以上离心洗涤，
并分散在300～400份正乙烷中，加入2～6份硅烷偶联剂在20℃以上搅拌4～6小时后，用乙
醇和去离子水在5000转以上离心洗涤，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状
产物；
c．将上述b所得的质量份数为100～200份的粉末状纳米颗粒分散于800～900份的去离
子水中，加入10～20份的交联剂和50～60份的透明质酸钠，在30℃以上搅拌5小时以上后，
用水洗涤，并5000转以上离心，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物；
d．将上述c所得质量份数为20～30份粉末状产物后，加入质量份数为100～200份乙醇、
1～5份硝酸铵，60～80℃下回流并搅拌至少1小时后得以去除表面活性剂，最后用乙醇和去
离子水洗涤，并5000转以上离心，随后在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物；
e.将上述d中所得到的质量份数为30～50份粉末状产物溶于200～400份去离子水中，
并加入5～10份阿霉素，在30℃以上搅拌8小时以上后，用水洗涤，并5000转以上离心，随后
在烘箱中60℃以上烘干至少20小时得到粉末状产物。
2.根据权利要求1所述的一种诊断与热化疗相结合的新型淋巴瘤靶向探针的制备方
法，其特征在于所述的表面活性剂为透明质酸、十六烷基三甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴
化铵、双十八烷基二甲基溴化铵、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、四丁酚醛、十二烷基苯
磺酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯、山梨醇酐单硬脂酸酯、椰油脂
肪酸二乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：何丹农，朱君，乔宇，易帆，姚燕杰，刘恬，王杰，
申请(专利权)人：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31