醛酮还原酶1B1抑制剂在制备抗乳腺癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种醛酮还原酶1B1抑制剂在制备抗乳腺癌药物中的应用。本发明专利技术发现醛酮还原酶1B1抑制剂能够有效地抑制肿瘤干细胞，明显减弱肿瘤细胞的迁移和侵袭能力，抑制肿瘤细胞在小鼠体内的成瘤能力及肺转移能力，能够应用于抗乳腺癌药物的制备中，可用于靶向治疗乳腺癌的新适应症。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医疗
，尤其涉及醛酮还原酶1B1抑制剂在制备抗乳腺癌药物中的应用。
技术介绍
乳腺癌是女性常见的癌症。尽管人们对于乳腺癌的研究已超过30年，但是大约90％的乳腺癌患者仍死于肿瘤细胞的局部浸润和转移中，乳腺癌患者在肿瘤细胞转移后的平均生存时间约为2年。乳腺癌的基因分型包括管腔上皮A型(luminalsubtypeA)、管腔上皮B型(luminalsubtypeB)、HER2过表达型(HER-2overexpressionsubtype)和基底样型(basal-likesubtype)。在所有的亚型中，基底样乳腺癌具有增殖活力高、易复发、侵袭和转移能力强等特征，且预后性最差。典型的基底样乳腺癌表型特征为ER、PR和HER2阴性，即三阴性(triple-negative)，同时表达基底细胞型角蛋白(CK5/6和CK14)。基底样乳腺癌可能起源于干细胞，因为它具有腺上皮和肌上皮双向分化潜能。与这个观察一致，基底样乳腺癌具有许多肿瘤干细胞特征和上皮间质转化(EMT)标志物。上皮间质转化(EMT)是指上皮细胞向间质细胞转化的现象，它在胚胎发育、组织重塑、伤口愈合及肿瘤转移过程中起到关键的作用。通过EMT，细胞从“静态”转变为“运动”并开始转移。这是由于细胞间粘附分子E-cadherin的丢失，细胞脱离了肿瘤组织，并开始转移和侵入周围组织。EMT能够赋予肿瘤细胞许多干细胞的特征，并贯穿于恶性肿瘤发生、发展、侵袭及转移的整个过程。基底样乳腺癌患者对内分泌治疗不敏感，对化疗易耐药，同时又缺少相应的靶向治疗方法。目前，科学家们正致力寻找特异性基底乳腺癌靶向位点，希望在靶向治疗方面有所突破。依帕司他(英文名为epalrestat)，化学命名为5-[(1Z，2E)-2-甲基-3-苯基-2-丙烯亚基]-4-氧代-2-硫代-噻唑烷乙酸，分子式：C15H13NO3S2，分子量：319.401，结构式如下：依帕司他为醛糖还原酶抑制剂，主要用于预防、改善和治疗糖尿病并发的末梢神经障碍(麻木感、疼痛)等，也有研究报道其可用于糖尿病肾病的治疗。依帕司他毒副作用小，为口服用药。成人每次50～200毫克，每日三次，通常被认为安全剂量。成年人口服本品50毫克，1小时后达血药浓度峰值(3.9μg/ml)。动物实验证实本品主要分布消化道、肝脏及肾脏，24小时后约有8％经尿道排除，80％左右是由粪排出体外。
技术实现思路
本专利技术发现醛酮还原酶1B1抑制剂能够显著抑制乳腺癌的发生、浸润和转移，可用于制备抗乳腺癌药物。本专利技术通过基因芯片对51株不同亚型的乳腺癌细胞系进行分析,我们发现基底样乳腺癌细胞的醛酮还原酶1B1(AKR1B1)表达水平明显高于其它亚型细胞。进一步地，通过TCGA数据分析发现三阴性乳腺癌中AKR1B1的表达水平也显著的高于其它亚型。研究发现，AKR1B1有助于促进乳腺癌的发生与发展；而AKR1B1抑制剂可显著抑制乳腺癌发生、侵润和转移。上述三阴性乳腺癌是指ER、PR和HER2受体均阴性的乳腺癌，与基底样乳腺癌有高度的一致性。本专利技术提供了依帕司他在制备抗基底样乳腺癌药物中的应用。本专利技术以醛酮还原酶1B1抑制剂依帕司他为例进行实验，以乳腺癌细胞系(SUM159和MDA-MB231)为细胞模型，用肿瘤干细胞检测技术检测依帕司他对肿瘤干细胞的抑制作用，用软琼脂克隆形成法体外检测依帕司他对细胞成瘤的影响、用细胞迁移以及细胞侵袭法体外检测依帕司他对细胞迁移和侵袭的抑制效果；结果发现，依帕司他对肿瘤干细胞具有抑制作用，对细胞成瘤、细胞迁移和侵袭均有影响。此外，本专利技术以小鼠成瘤及肿瘤肺转移模型体内检测依帕司他对成瘤及转移的抑制作用，也证明依帕司他能够显著抑制肿瘤细胞在小鼠內的成瘤能力以及肺转移能力。本专利技术提供了一种抗乳腺癌药物，包含醛酮还原酶1B1抑制剂。本专利技术还提供了一种抗基底样乳腺癌药物，包含醛酮还原酶1B1抑制剂。本专利技术还提供了一种抗三阴性乳腺癌药物，包含醛酮还原酶1B1抑制剂。作为优选，所述醛酮还原酶1B1抑制剂为依帕司他。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术发现醛酮还原酶1B1抑制剂能够有效地抑制肿瘤干细胞，明显减弱肿瘤细胞的迁移和侵袭能力，抑制肿瘤细胞在小鼠体内的成瘤能力及肺转移能力，能够应用于抗乳腺癌药物的制备中，可用于靶向治疗乳腺癌的新适应症。附图说明图1为AKR1B1在51株不同亚型的乳腺癌细胞系的表达情况效果图。图2为AKR1B1在349个不同亚型的乳腺癌样本的表达情况效果图。图3为依帕司他抑制乳腺癌细胞成球能力的效果图。图4为依帕司他抑制乳腺癌细胞软琼脂克隆形成能力的效果图。图5为依帕司他抑制乳腺癌细胞迁移能力的效果图。图6为依帕司他抑制乳腺癌细胞侵袭能力的效果图。图7为依帕司他抑制肿瘤细胞在小鼠的成瘤能力的效果图。图8为依帕司他抑制肿瘤细胞在小鼠的肺转移能力的效果图。具体实施方式下面结合具体实施案例对本专利技术做进一步描述。下列实施例中涉及的依帕司他均购自山东达因海洋生物制药股份有限公司(也可采用市面上出售的依帕司他片)；涉及的“SUM159和MDA-MB231”两株乳腺癌细胞系由肯塔基大学PeterZhou实验室惠赠，也可在市面上购买，上述细胞系仅用于实验的验证，不涉及细胞的保藏。实施例1AKR1B1在不同亚型乳腺癌细胞系的表达情况为了检测醛酮还原酶1B1(AKR1B1)在不同亚型乳腺癌细胞系的表达情况，对51株乳腺癌细胞系cDNA文库(GSE12777)基因表达情况进行分析。通过T检验对23株基底乳腺癌细胞系和28株其它亚型细胞系的AKR1B1表达差异进行比较。结果如图1所示，基底样乳腺癌细胞的AKR1B1表达水平明显高于其它亚型细胞。实施例2AKR1B1在不同亚型乳腺癌样本的表达情况为了检测AKR1B1在不同亚型乳腺癌的表达情况，对349个乳腺癌组织样本cDNA文库(TCGA)基因表达情况进行分析。通过T检验对49株三阴性乳腺癌样本和300株其它亚型样本的AKR1B1表达差异进行比较。结果如图2所示，三阴性乳腺癌中AKR1B1的表达水平显著的高于其它亚型。(注：乳腺癌细胞系cDNA文库(GSE12777)和乳腺癌组织样本cDNA文库(TCGA)可分别通过http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi？acc＝GSE12777及https://tcga-data.nci.nih.gov/tcga/dataAccessMatrix.htm获得。)实施例3依帕司他对乳腺癌干细胞的抑制作用(1)分别取对数生长期的乳腺癌细胞吹打成单个细胞，用干细胞培养基制成浓度为20,000个/mL，取2mL加入到无粘附6孔板中进行肿瘤干细胞成球(mammoshere)实验；(2)选用SUM159和MDA-MB231两株乳腺癌细胞系为细胞模型；(3)给药剂量：终浓度为20mM依帕司他，对照组为同体积的溶剂DMSO；给药时间：细胞加入到无粘附6孔板中时给药，周期为10天；用倒置光学显微镜进行观察计数，并进行分析统计。结果如图3所示，依帕司他显著抑制肿瘤细胞的成球能力。实施例4依帕司他体外对乳腺癌细胞成瘤的抑制作用(1)分别取对数生长期的乳腺癌细胞吹本文档来自技高网...

【技术保护点】
醛酮还原酶1B1抑制剂在制备抗乳腺癌药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.醛酮还原酶1B1抑制剂在制备抗乳腺癌药物中的应用。2.依帕司他在制备抗乳腺癌药物中的应用。3.依帕司他在制备抗基底样乳腺癌药物中的应用。4.一种抗乳腺癌药物，其特征在于，包含醛酮还原酶1B1抑制剂。5.如权利要求4所述的抗乳腺癌药物，其特征在于，所述醛酮还原酶1B1抑制剂为依帕司他。6.一种抗基底...

【专利技术属性】
技术研发人员：董辰方，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33