卷柏素类化合物在作为抗真菌药物增效剂中的应用制造技术

技术编号:14431659 阅读:148 留言:0更新日期:2017-01-14 02:50
本发明专利技术公开了selaginellin、selaginellin A等卷柏素类化合物作为抗真菌增效剂的用途。实验结果表明,卷柏素selaginellin、selaginellin A与氟康唑、酮康唑等抗真菌药物合用时,可达到协同增效的作用,可降低唑类药物的用药剂量,从而减轻药物的毒副作用。并且通过实时荧光定量PCR(qRT‑PCR)实验表明,卷柏素selaginellin、selaginellin A可显著逆转唑类药物耐药基因的上调,有逆转唑类药物耐药的作用,具有重要的临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种抗真菌增效剂,具体涉及selaginellin或selaginellinA等卷柏素类化合物在作为抗真菌药物增效剂中的应用,属医药

技术介绍
近年来,临床真菌感染的发病率和死亡率逐年上升。念珠菌是人体重要的条件致病性真菌,是引起医院感染性疾病主要病原菌之一。唑类药物是临床上常用的能有效治疗深部及浅表部真菌感染的抗真菌药,如咪唑类中的酮康唑;三唑类中的氟康唑等。但是,随着药物长期、大量使用,使得真菌对唑类药物的敏感性降低,且耐药性显著增高,导致不得不加大药物剂量,某些抗真菌药物甚至加大用药量也无效。目前通行的做法为、加快新药研发、联合用药。加大药物剂量的危害是显而易见的,比如副作用增大、加速真菌耐药、增加社会经济负担等等;如酮康唑等对肝脏或心脏有毒副作用的药物,从而限制了这些药物在临床上的应用。寻找唑类药物的增效剂日益受到重视,已成为抗真菌治疗的主要发展方向之一。所谓增效剂是指对受试生物无药效或药效很低,但与某种药物混合使用时,能明显提高该药物效果的辅助化合物卷柏素为从卷柏属植物中提取的系列有效成分。具有抗微生、抗氧化、抗衰老,及神经保护等活性,但未见其作为抗真菌药物增效剂与抗菌药物联合使用治疗真菌病的报道。其中代表性成分selaginellin及selaginellinA的结构式如下;
技术实现思路
专利技术目的:本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术的不足,对selaginellin及selaginellinA的活性进行深入研究,提供selaginellin或selaginellinA卷柏素类化合物在作为抗真菌药物增效剂中的应用。技术方案:为解决以上技术问题,本专利技术采取如下技术方案:卷柏素类化合物在作为抗真菌药物增效剂中的应用selaginellin或selaginellinA在作为抗真菌药物增效剂中的应用。作为优选方案,selaginellin或selaginellinA与唑类抗真菌药物合用在制备抗真菌药物中的应用。selaginellin或selaginellinA与唑类抗真菌药物合用在制备抗真菌药物中的应用,作为优选方案,所述的selaginellin或selaginellinA在总药物中的浓度为0.5~256μg/mL。selaginellin或selaginellinA与唑类抗真菌药物合用在制备抗真菌药物中的应用,作为优选方案,所述的selaginellin或selaginellinA在总药物中的浓度为2~64μg/mL。本专利技术所述的selaginellin或selaginellinA与唑类抗真菌药物合用在制备抗真菌药物中的应用,所述的唑类抗真菌药物为咪唑类或三唑类抗真菌药物。如酮康唑或氟康唑。所述的真菌为念珠菌。唑类药物发挥抗真菌作用主要是抑制了与细胞膜麦角甾醇合成有关的酶,如:由ERG11编码的14α-羊毛甾醇-去甲基化酶(14-DM)和由ERG5编码的Δ222去饱和酶。ERG11、ERG5发生突变或过表达可以降低真菌对唑类药物的敏感性,并产生耐药。真菌外排作用的增加,导致药物在细胞内蓄积减少,从而降低了菌株对药物的敏感性,因此编码外排蛋白的基因过度表达是真菌对唑类药物耐药的主要机制之一。目前已知与耐药有关的外排蛋白包括含ABC转运蛋白超家族(ABCT)的CDR1、CDR2,多药耐药转运蛋白MDR1,以及易化扩散超家族转运蛋白FLU1。本研究表明白念珠菌暴露于FLC后,ERG11、ERG5、CDR1、CDR2、MDR1与FLU1表达上调,而卷柏素与氟康唑合用可以显著逆转这一趋势,说明两药联用,有可能逆转耐药。有益效果:本专利技术和现有技术相比具有如下优点:本专利技术通过大量实验深入研究selaginellin或selaginellinA的活性,实验结果表明白念珠菌暴露于氟康唑后,ERG11、ERG5、CDR1、CDR2、MDR1与FLU1表达上调,而卷柏素selaginellin或selaginellinA与氟康唑合用可以显著逆转这一趋势,表明两药联用,可逆转耐药。selaginellin和selaginellinA可用作抗真菌药物的增效剂,从而可减轻药物的毒副作用,特别是氟康唑、酮康唑;并有可能逆转真菌耐药,有效治疗真菌感染,具有重要的临床应用价值。附图说明图1为selaginellin或selaginellinA联合氟康唑对白念株菌相关基因表达相对变化差异的结果图。图2为selaginellin或selaginellinA联合氟康唑对白念株菌相关基因表达水平变化趋势图。具体实施方式下面结合具体实施例,进一步阐明本专利技术,应理解这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围,在阅读了本专利技术之后,本领域技术人员对本专利技术的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。实施例1Selaginellin和氟康唑合用对不同临床真菌株的作用一、材料和方法试药:selaginellin及selaginellinA卷柏素类化合物:实验室自制,使用1H-NMR,13C-NMR及ESI-MS对其进行了对其进行结构解析,与文献对照确定其化学结构。经HPLC-UV面积归一化法计算,纯度均在98%以上。氟康唑(FLC),酮康唑(KEC):辉瑞制药有限公司。菌株:分别为美国模式培养物集存库(AmericanTypeCultureCollection,ATCC)标准菌株白念珠菌(Candidaalbicans)ATCC90028,近平滑念珠菌(C.parapsilosis)ATCC22019,白念珠菌临床株(62342)。。培养液:RMPI-1640培养基:RMPI-1640(Gibco公司)10.0g,吗啡啉丙磺酸(Sigma)34.5g,加双蒸水900mL溶解,定容置1000mL,滤过消毒,-20℃保存,使用前检查培养基是否无菌。SDA培养基:蛋白胨10g,琼脂15g,加双蒸水1000mL,高压灭菌,4℃备用。YEPD培养液:酵母浸膏10g,蛋白胨20g,加双蒸水1000mL,高压灭菌,4℃备用。菌液制备:念珠菌菌液:从4℃保存的SDA培养基上挑取菌少量,接种至1mLYEPD培养液,于30℃以100r/min振荡培养活化,使真菌处于指数生长期。吸取菌液至适量无菌生理盐水中,经血球计数板计数,孢子数约为1.0×106~5.0×106cfu/ml。用倍量RMPI-1640液体培养基稀释成菌1.0×103cfu/ml。药液的配制:氟康唑以灭菌蒸馏水配成2560μg·mL-1,selaginellin、selaginellinA以DMSO配成药物原液(浓度为2560μg·mL-1),置于-20℃冰箱冻存。实验前再用灭菌蒸馏水依次进行倍比稀释。联合药敏孔内药物终浓度范围如下,FLC:16~0.03μg·mL-1,KEC:4~0.008μg·mL-1,selaginellin:128~2μg·mL-1;selaginellinA:64~1μg·mL-1。96孔平板孔内DMSO终浓度≤1%,对菌株生长的影响可忽略不计。于96孔板中每孔加入100μL不同浓度的药液备用,注意避光。MIC值判定:100%MIC:以溶媒对照为参照,肉眼观察药基孔中无菌生长为最低抑菌浓度,100%MIC值本文档来自技高网...
卷柏素类化合物在作为抗真菌药物增效剂中的应用

【技术保护点】
卷柏素类化合物在作为抗真菌药物增效剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.卷柏素类化合物在作为抗真菌药物增效剂中的应用。2.selaginellin或selaginellinA在作为抗真菌药物增效剂中的应用。3.selaginellin或selaginellinA与唑类抗真菌药物合用在制备抗真菌药物中的应用。4.根据权利要求2所述的selaginellin或selaginellinA与唑类抗真菌药物合用在制备抗真菌药物中的应用,其特征在于,selaginellin或selaginellinA在总药物中的浓...

【专利技术属性】
技术研发人员:曹园段金廒吴永平姚毅
申请(专利权)人:江苏省中医院
类型:发明
国别省市:江苏;32

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