一种昆虫病原线虫的人工培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种昆虫病原线虫的人工培养基，其特征在于：包括营养琼脂培养基，营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆25g～50g、豆粉80～150g、猪油120～200g、蛋黄粉60～200g、琼脂8～15g、酵母粉12～20g、水800ml～1200ml。本发明专利技术针对固体培养方法，考虑不同线虫的营养需求、培养基来源的便利及成本，能够提高侵染期线虫产量，降低生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物繁殖培养的
，特别是昆虫病原线虫的人工培养基的

技术介绍
斯氏线虫科Steinernematidae的斯氏线虫属Steinernema线虫和异小杆线虫科Heterorhabditidae的异小杆线虫属Heterorhabditis线虫是昆虫病原线虫，它们是目前国际上新型的生物杀虫剂。与其它生物杀虫剂相比，这类线虫具有广泛的寄主范围；对寄主具主动搜索能力，特别对土栖性及钻蛀性害虫；对人畜、植物及有益生物安全，在欧美的一些国家可以豁免注册使用；易于大量培养；使用方便；在环境中可循环利用；能与多种化学和生物杀虫剂混用；并可用传统药械或灌溉设施来施用等优点。近年来，作为新型生物杀虫剂，昆虫病原线虫已广泛应用于农林、牧草和卫生害虫的安全防治，受到国内外学者及商业部门的高度重视，并走向商品化生产。在工业化国家的生物农药市场中，此类线虫的市场销售额排生物杀虫剂第二位。目前全球已有超过60个国家的100多个实验室在研究此类有益生物。在我国，昆虫病原线虫也已经商业化生产，并应用于防治多种农林、草地、花卉以及卫生害虫等，结果令人鼓舞。昆虫病原线虫的培养经历了从活体培养到离体培养的过程，离体培养又从无菌培养到单菌培养。目前，线虫的商业化生产主要是通过无菌操作技术于人工培养基中加入单一共生细菌和无菌线虫完成的，即体外单菌培养系统。根据培养基质可分为固体培养和液体发酵培养，两者在技术上不尽相同，如培养容器、培养基配比、培养过程等。
技术实现思路
本专利技术的目的就是解决现有技术中的问题，提出一种昆虫病原线虫的人工培养基，考虑不同线虫的营养需求、培养基来源的便利及成本，能够提高侵染期线虫产量，降低生产成本。为实现上述目的，本专利技术提出了一种昆虫病原线虫的人工培养基，包括营养琼脂培养基，营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆25g～50g、豆粉80～150g、猪油120～200g、蛋黄粉60～200g、琼脂8～15g、酵母粉12～20g、水800ml～1200ml。作为优选，所述营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆40g、豆粉100g、猪油140g、蛋黄粉100g、琼脂10g、酵母粉15g、水900ml。作为优选，所述营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆35g、豆粉120g、猪油150g、蛋黄粉150g、琼脂12g、酵母粉16g、水1100ml。作为优选，所述营养琼脂培养基的使用方法为按比例调配好的营养琼脂培养基均匀混入120g碎海绵，装入透气金属培养盒，进行高温灭菌消毒，冷却待用；将培养好的共生菌接入消毒后的营养琼脂培养基中，培养4天后接种线虫。本专利技术的有益效果：本专利技术针对固体培养方法，培养基配方的选择考虑不同线虫的营养需求、培养基来源的便利及成本。固体培养方法的生产成本要明显低于液体培养方法，固体培养方法生产的线虫致病力也要明显高于液体培养方法。因此，当市场需求量增大，固体培养方法更具产业化生产发展前景，本专利技术的对昆虫病原线虫的规模化生产具有重要的意义，培养基中的黄粉虫干粉可以使线虫一级种的退化时间延长一倍以上，能够提高侵染期线虫产量，降低生产成本，发展前景好。本专利技术的特征及优点将通过实施例进行详细说明。【具体实施方式】本专利技术一种昆虫病原线虫的人工培养基，包括营养琼脂培养基，营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆25g～50g、豆粉80～150g、猪油120～200g、蛋黄粉60～200g、琼脂8～15g、酵母粉12～20g、水800ml～1200ml。所述动物组织匀浆选用黄粉虫干粉，水选用超净水。所述营养琼脂培养基的使用方法为按比例调配好的营养琼脂培养基均匀混入120g碎海绵，装入透气金属培养盒，进行高温灭菌消毒，冷却待用；将培养好的共生菌接入消毒后的营养琼脂培养基中，培养4天后接种线虫。实施例1：营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆40g、豆粉100g、猪油140g、蛋黄粉100g、琼脂10g、酵母粉15g、水900ml。营养琼脂培养基的使用方法为按比例调配好的营养琼脂培养基均匀混入120g碎海绵，装入透气金属培养盒，进行高温灭菌消毒，冷却待用；确定适宜的培养温度，范围为19～28℃，将培养好的共生菌接入消毒后的营养琼脂培养基中，培养4天后，接种线虫。每培养一亿尾线虫的最佳接种量在20万尾～60万尾。实施例2：作为优选，所述营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆35g、豆粉120g、猪油150g、蛋黄粉150g、琼脂12g、酵母粉16g、水1100ml。营养琼脂培养基的使用方法为按比例调配好的营养琼脂培养基均匀混入120g碎海绵，装入透气金属培养盒，进行高温灭菌消毒，冷却待用；确定适宜的培养温度，范围为19～28℃，将培养好的共生菌接入消毒后的营养琼脂培养基中，培养4天后，接种线虫。每培养一亿尾线虫的最佳接种量在20万尾～60万尾。本专利技术达到的技术效果线虫产品的质量标准整齐度：在解剖镜下对线虫的侵染期线虫的比例进行检测，使用本专利技术的培养基生产的侵染期线虫能达到95％以上。致病力：以黄粉虫作为侵染对象，在25±1℃下对黄粉虫侵染96个小时，黄粉虫的死亡率可以达到80％以上。存活率：成品线虫包装为硅藻土粉剂吸附包装，带有保温材料，线虫的存活率可以达到90％以上。线虫一级种虫经过多代繁殖后，会遇到种虫退化的问题，具体表现为线虫活力、产量下降，培养基中的黄粉虫干粉可以使线虫一级种的退化时间延长一倍以上。本专利技术针对固体培养方法，培养基配方的选择考虑不同线虫的营养需求、培养基来源的便利及成本。固体培养方法的生产成本要明显低于液体培养方法，固体培养方法生产的线虫致病力也要明显高于液体培养方法。因此，当市场需求量增大，固体培养方法更具产业化生产发展前景，本专利技术的对昆虫病原线虫的规模化生产具有重要的意义，能够提高侵染期线虫产量，降低生产成本，发展前景好。上述实施例是对本专利技术的说明，不是对本专利技术的限定，任何对本专利技术简单变换后的方案均属于本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种昆虫病原线虫的人工培养基，其特征在于：包括营养琼脂培养基，营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆25g～50g、豆粉80～150g、猪油120～200g、蛋黄粉60～200g、琼脂8～15g、酵母粉12～20g、水800ml～1200ml。

【技术特征摘要】
1.一种昆虫病原线虫的人工培养基，其特征在于：包括营养琼脂培养基，营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆25g～50g、豆粉80～150g、猪油120～200g、蛋黄粉60～200g、琼脂8～15g、酵母粉12～20g、水800ml～1200ml。2.如权利要求1所述一种昆虫病原线虫的人工培养基，其特征在于：所述动物组织匀浆选用黄粉虫干粉，水选用无菌超净水。3.如权利要求1所述一种昆虫病原线虫的人工培养基，其特征在于：所述营养琼脂培养基的组分为：动物组织匀浆40g、豆粉100g、猪油140g、蛋黄粉...

【专利技术属性】
技术研发人员：盛锡良，张斌，夏博，李飞，
申请(专利权)人：浙江绿神天敌生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33