一种从美洲大蠊中连环提取得到两种有效成分的方法技术

本发明专利技术涉及一种从美洲大蠊中连环提取得到两种有效成分的方法，包括以下步骤：(1)美洲大蠊流浸膏的制备：将美洲大蠊虫体经粉碎、乙醇浸泡、乙醇回流提取、一级浓缩、脱脂和二级浓缩，得到比重为1.05～1.15的浸膏，即为美洲大蠊流浸膏；(2)第一种有效成分的制备：(3)第二种有效成分的制备。本发明专利技术的方法充分利用美洲大蠊原药材各用途，从美洲大蠊中连环提取得到两种有效成分，大大降低了成本，可操作性强，具有经济合理的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，具体来讲涉及一种从美洲大蠊中连环提取得到两种有效成分的方法。
技术介绍
美洲大蠊为昆虫纲有翅亚纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫，俗称蟑螂，是蜚蠊科中体积最大的昆虫，原产于南美洲。美洲大蠊是传统的中药材入药始载于《神农本草经》,谓“味咸,寒。主血瘀、症坚、寒热，破积聚，喉咽搏，内寒，无子”，用以治疗小儿疳积、疔疮、痈肿、喉蛾、无名肿毒、梅毒以及毒蛇、蜈松咬伤等疾病。随着现代科学的不断发展，美洲大蠊的化学成分和药理作用的研究愈加深入。据文献报道，美洲大蠊中含有蛋白质、肽类、氨基酸、甲壳素、粘糖氨酸、核苷、脂肪酸、烯醇、烯酸、烷烃、多元醇、大环内酯类，酶类以及丰富的矿物质和微量元素。通过国内已有产品及相关药理活性研究情况看，美洲大蠊体内药效成分的生物活性主要包括：对各种外伤创面及机体溃疡具有良好的肌肉组织修复活性；具有强心升压，改善血液循环的活性；具有抗菌抗病毒的活性；具有抗肿瘤，增强免疫功能活性。现有美洲大蠊提取分离的主要提取物有三种：治疗肝病的提取物、抗肿瘤作用的提取物和全虫提取物。如CN102885858B，专利技术名称：治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物的制备方法，包括步骤：A、灭活粉碎；B、提取；C、一级浓缩；D、脱脂吸附；E、洗脱；F、二级浓缩；G、干燥粉碎。采用该专利技术所述方法制备治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物，可以有效控制对乙型肝炎产生抑制效果的有效成份的水解，提高乙型肝炎治愈率。本专利技术提取的药物，对慢性乙肝患者和乙肝病毒携带者HBeAg转阴率、HBV-DNA转阴率总有效率可达80～95％；对治疗乙型肝炎用的特定有效成份提取得率可达3-5％；且可以提高最终提取物的抗腐性，避免因腐败变质造成浪费；可以避免最终提取物含有蛋白质，从而减少药物中的有害过敏源。如CN101214262B，专利技术名称：大孔吸附树脂制备的美洲大蠊抗肿瘤有效部位及用途，由蜚蠊科美洲大蠊(Periplanetaamericana)虫体鲜品或干品经醇水提取、大孔吸附树脂柱层析、醇溶剂洗脱精制而成。该专利技术得到的美洲大蠊提取物有效部位对口腔上皮癌(KB)细胞，低分化胃腺癌肿瘤(BGC-823)细胞，人慢性髓原细胞白血病癌(K562)细胞和人原髓细胞白血病细胞(HL-60)具有明显的细胞毒性和体内抗肿瘤功效，可以用于制备治疗上述肿瘤的药物或保健品。但是，该两种方法无法充分利用美洲大蠊原药材用途，造成经济上的浪费和成本高，有待开发新技术以克服成本上的缺陷。
技术实现思路
本专利技术提供了一种从美洲大蠊中连环提取得到两种有效成分的制备方法，解决了现有提取方法无法充分利用美洲大蠊原药材用途，造成经济上的浪费和成本高等问题。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案：一种从美洲大蠊中连环提取得到两种有效成分的方法，包括以下步骤：(1)美洲大蠊流浸膏的制备：将美洲大蠊虫体经粉碎、乙醇浸泡、乙醇回流提取、一级浓缩、脱脂和二级浓缩，得到比重为1.05～1.15的浸膏，即为美洲大蠊流浸膏；(2)第一种有效成分的制备：将步骤(1)得到的美洲大蠊流浸膏，经大孔吸附树脂柱层析，水洗，然后50～90％乙醇-水洗脱,收集洗脱液，最后用无水乙醇洗脱；将得到的50～90％乙醇洗脱液减压浓缩至无醇味，干燥，粉碎得第一种有效成分；(3)第二种有效成分的制备：将步骤(2)得到的水洗脱液与无水乙醇洗脱液合并，减压浓缩至比重为1.05～1.15，得浓缩液；将所得浓缩液加入浓缩液重量7～10倍量的蒸馏水，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入浓缩液0.5～1.0倍量药用活性炭在40～60℃温度下搅拌30～60分钟，使其充分吸附；将所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭10～30倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭30～60倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液；将所得洗脱滤液在温度50～60℃、真空度-0.05～-0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.20～1.30时，得美洲大蠊提取物浸膏；将所得美洲大蠊提取物浸膏在50℃～60℃温度、真空度-0.04～-0.07MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到第二种有效成分。优选地：所述的粉碎：将干燥的美洲大蠊虫体粉碎，过24目筛，制得美洲大蠊粗粉；所述的浸泡：将所得美洲大蠊粗粉用质量浓度90～95％的乙醇浸泡，使乙醇液面高出所述美洲大蠊粗粉5～10cm密闭保存，制得粗粉混合液；所述的提取：将所得粗粉混合液在75～80℃温度下进行3～5次回流提取，第一次提取时，加粗粉重量5～8倍量浓度90％～95％的乙醇，提取时间为4～6小时；第二次以后每次加粗粉重量3～6倍量浓度90％～95％的乙醇，提取时间为3～5小时；提取过程中，乙醇温度均保持在75～80℃；提取完成后，合并提取液，过滤得乙醇提取液；所述的一级浓缩：将所得乙醇提取液在真空度-0.05～-0.06MPa、温度50～60℃的条件下减压浓缩，至比重为1.05～1.15时，得乙醇浓缩液；所述的脱脂：将所得乙醇浓缩液加入乙醇浓缩液重量7～10倍量的纯化水，边搅拌边升温至80～90℃后，搅拌10～60分钟，搅拌速度为20～60转/分，然后保温静置1～5小时使油水分层；所述的二级浓缩：将所得下层水液放出，经滤纸过滤后，滤液在温度60～80℃、真空度-0.05～-0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.05～1.15时，制得美洲大蠊流浸膏。优选地：所述的大孔吸附树脂指AB-8或D101。优选地：所述步骤(3)中所用洗脱剂为浓度10％～20％、PH值2.0～3.0的醋酸乙醇液或浓度10％～20％醋酸的水饱和正丁醇溶液或苯酚浓度为10％～20％的苯酚乙醇液。优选地：所述的提取：用浓度为90％～95％的乙醇回流提取3次美洲大蠊粗粉：第一次提取时，加粗粉重量6倍量浓度90％～95％的乙醇，提取时间为5小时；第二次加粗粉重量4倍量浓度90％～95％的乙醇，提取时间为4小时；第三次加粗粉重量4倍量浓度90％～95％的乙醇，提取时间为4小时；提取过程中，乙醇温度均保持在75～80℃,提取完成后，合并三次提取液，过滤得乙醇提取液。优选地：所述的一级浓缩：将所得乙醇浓缩液加入乙醇浓缩液重量8倍量的蒸馏水，边搅拌边升温至80～90℃后，搅拌40分钟，搅拌速度为40转/分，然后保温静置4小时使油水分层。优选地：所述的减压浓缩时的温度不超过100℃，所述的干燥是指真空减压干燥或冷冻干燥。优选地：所述步骤3中将所得浓缩液加入浓缩液重量7～10倍量的蒸馏水，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入浓缩液0.8倍量药用活性炭在50℃温度下搅拌45分钟，使其充分吸附。本专利技术的方法中所制得的第一种有效成分在制备防治肿瘤药物中的用途。本专利技术的方法中所制得的第二种有效成分在制备治疗乙型肝炎的用途。本专利技术的有益效果：本专利技术所述方法致力于由纯中药应用向特定疾病、特定有效成份应用方向发展，所采用的工艺路线可使美洲大蠊中分别用于治疗肿瘤和乙型肝炎的两种特定有效成份聚集，从而提高单纯美洲大蠊提取物对治疗上述两类疾病的治疗效果。具体技术具有的有益效果如下：1、采用本专利技术所述方法制备美洲大蠊抗肿瘤有效成分，能够在体外抑制多种肿瘤细胞，包括口腔上皮癌(KB)细胞，低分化胃腺癌肿瘤(BGC-823本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从美洲大蠊中连环提取得到两种有效成分的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)美洲大蠊流浸膏的制备：将美洲大蠊虫体经粉碎、乙醇浸泡、乙醇回流提取、一级浓缩、脱脂和二级浓缩，得到比重为1.05～1.15的浸膏，即为美洲大蠊流浸膏；(2)第一种有效成分的制备：将步骤(1)得到的美洲大蠊流浸膏，经大孔吸附树脂柱层析，水洗，然后50～90％乙醇‑水洗脱,收集洗脱液，最后用无水乙醇洗脱；将得到的50～90％乙醇洗脱液减压浓缩至无醇味，干燥，粉碎得第一种有效成分；(3)第二种有效成分的制备：将步骤(2)得到的水洗脱液与无水乙醇洗脱液合并，减压浓缩至比重为1.05～1.15，得浓缩液；将所得浓缩液加入浓缩液重量7～10倍量的蒸馏水，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入浓缩液0.5～1.0倍量药用活性炭在40～60℃温度下搅拌30～60分钟，使其充分吸附；将所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭10～30倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭30～60倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液；将所得洗脱滤液在温度50～60℃、真空度‑0.05～‑0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.20～1.30时，得美洲大蠊提取物浸膏；将所得美洲大蠊提取物浸膏在50℃～60℃温度、真空度‑0.04～‑0.07MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到第二种有效成分。...

【技术特征摘要】
1.一种从美洲大蠊中连环提取得到两种有效成分的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)美洲大蠊流浸膏的制备：将美洲大蠊虫体经粉碎、乙醇浸泡、乙醇回流提取、一级浓缩、脱脂和二级浓缩，得到比重为1.05～1.15的浸膏，即为美洲大蠊流浸膏；(2)第一种有效成分的制备：将步骤(1)得到的美洲大蠊流浸膏，经大孔吸附树脂柱层析，水洗，然后50～90％乙醇-水洗脱,收集洗脱液，最后用无水乙醇洗脱；将得到的50～90％乙醇洗脱液减压浓缩至无醇味，干燥，粉碎得第一种有效成分；(3)第二种有效成分的制备：将步骤(2)得到的水洗脱液与无水乙醇洗脱液合并，减压浓缩至比重为1.05～1.15，得浓缩液；将所得浓缩液加入浓缩液重量7～10倍量的蒸馏水，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入浓缩液0.5～1.0倍量药用活性炭在40～60℃温度下搅拌30～60分钟，使其充分吸附；将所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭10～30倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭30～60倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液；将所得洗脱滤液在温度50～60℃、真空度-0.05～-0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.20～1.30时，得美洲大蠊提取物浸膏；将所得美洲大蠊提取物浸膏在50℃～60℃温度、真空度-0.04～-0.07MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到第二种有效成分。2.根据权利要求1所述的一种从美洲大蠊中连环提取得到两种有效成分的方法，其特征在于：所述的粉碎：将干燥的美洲大蠊虫体粉碎，过24目筛，制得美洲大蠊粗粉；所述的浸泡：将所得美洲大蠊粗粉用质量浓度90～95％的乙醇浸泡，使乙醇液面高出所述美洲大蠊粗粉5～10cm密闭保存，制得粗粉混合液；所述的提取：将所得粗粉混合液在75～80℃温度下进行3～5次回流提取，第一次提取时，加粗粉重量5～8倍量浓度90％～95％的乙醇，提取时间为4～6小时；第二次以后每次加粗粉重量3～6倍量浓度90％～95％的乙醇，提取时间为3～5小时；提取过程中，乙醇温度均保持在75～80℃；提取完成后，合并提取液，过滤得乙醇提取液；所述的一级浓缩：将所得乙醇提取液在真空度-0.05～-0.06MPa、温度50～60℃的条件下减压浓缩，至比重为1.05～1.15时，得乙醇浓缩液；所...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝振平，徐溧，
申请(专利权)人：昆明赛诺制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：云南;53