三马来酰亚胺型连接子及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种三马来酰亚胺型连接子及其应用。所述三马来酰亚胺型连接子可用于一种如式Ⅰ所示的抗体药物偶联物，L–(T–A–D)n   Ⅰ其中L是抗体，抗体片段或蛋白；T是三马来酰亚胺型连接子部分；A是其它连接子部分；D是药物部分；n是一个范围在1-8的整数。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及应用抗体药物偶联物治疗肿瘤或其它疾病，尤其涉及应用一种特殊的三马来酰亚胺型连接子来制备抗体药物偶联物以控制药物/抗体比值(Drug/AntibodyRatio,DAR)。
技术介绍
抗体药物偶联物(Antibody-DrugConjugates,ADCs)是一类新型靶向治疗药物，主要应用于癌症、自免疫等治疗领域。其基本设计思想最早源于保罗﹒埃尔利希(PaulEhrlich)于1913年首次提出的“魔术子弹”(magicbullet)及药物靶向输送(drugtargeting)概念，即通过适当载体将药物靶向输送到疾患部位。然而，受制于抗体及高活性细胞毒性药物技术的制约，直到2000年第一个用于治疗急性髓样白血病(AML)的抗体药物偶联物(MylotargTM)才被FDA批准上市。近期西雅图基因公司(SeattleGenetics)研制的用于治疗霍奇金淋巴瘤(HL)/复发性间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)的新药AdcetrisTM(2011)及健泰科生物技术公司(Genentech)研制的用于治疗乳腺癌的新药KadcylaTM(2013)相继通过FDA批准上市，则标志着抗体药物偶联物在肿瘤治疗领域的应用进入了快速发展阶段。在传统的抗体药物偶联物结构中，高活性的细胞毒性药物通常是通过双官能团连接子连接在抗体表面的赖氨酸残基，或者链间二硫键还原得到的半胱氨酸残基上，最佳的DAR为2-4。选用赖氨酸残基作为偶联位点时，由于抗体表面分布着大量的赖氨酸残基(超过80个)以及偶联反应的非选择性，因而导致偶联数目和位点的不确定性，进而导致生成的抗体药物偶联物的严重非均一性。例如，T-DM1的平均DAR值为3.5，DAR值分布(DARDistribution)为0-8(RapidCommun.MassSpectrom.2005，19，1806-1814)。同样，当选用半胱氨酸残基作为偶联位点时，尽管抗体的链间二硫键只有四个(IgG1)，但为达到最佳平均DAR值(2-4)的要求，需要部分还原链间二硫键(BioconjugateChem.2005,16,1282-1290)。由于现有的还原剂(DTT,TCEP等)无法选择性地还原链间二硫键，因此生成的偶联物也不是均一的产物，而是由多种组分组成，其主要组分的DAR值为0、2、4、6、8。同时，对应每一种特定DAR值的组分，都存在由于连接位点不同而形成的异构体，从而导致一定的非均一性。抗体药物偶联物产品的非均一性可以导致各成员组分间药物动力学性质，效价以及毒性的不均一性。例如，具有较高DAR值的组分在体内被清除得更快，并导致更高的毒性(BioconjugateChem.2011,22,1994-2004)。针对上述传统连接子技术的缺陷，本领域迫切需要开发新型的连接子技术，从而达到定点偶联的目的。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种可用于化学偶联方法制备抗体药物偶联物的新型三马来酰亚胺型连接子。在本专利技术的第一方面，提供了一种如式Ⅰ所示的抗体药物偶联物，L–(T–A–D)nⅠ其中L是抗体，抗体片段或蛋白；T是三马来酰亚胺型连接子部分；A是其它连接子部分；D是药物部分；n是一个范围在1-8的整数，包括1，2，3，4，5，6，7和8；所述三马来酰亚胺类型连接子部分的结构如式Ⅱ所示：其中Z选自O，S，NR2，NR3C(＝O)，C(＝O)NR4，C(＝O)O，OC(＝O)，C(＝S)O，OC(＝S)，C(＝S)NR5，NR6C(＝S)，C(＝S)S，SC(＝S)，NR7C(＝O)NR8，NR9C(＝S)NR10，OC(＝O)NR11，NR12C(＝O)O；R1选自亚烷基，亚烯基，亚炔基，亚芳基，-(CH2CH2O)t-，-(OCH2CH2)w-，或其中任意组合，其中t，w分别选自1-18范围内的整数，包括1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17和18；R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，R11和R12独立地选自H，烷基，芳基，杂环基，芳烷基，杂芳烷基；r选自0或1；s选自0-8范围内的整数，包括0，1，2，3，4，5，6，7和8；X选自NR13，O，S，C(＝O)，C(＝S)，C(＝O)NR14，NR15C(＝O)，NR16C(＝S)，C(＝S)NR17，OC(＝O)，C(＝O)O，OC(＝S)，C(＝S)O；其中R13，R14，R15，R16和R17独立地选自H，烷基，芳基，杂环基，芳烷基，杂芳烷基；o，p，q分别选自0-8范围内的整数，包括0，1，2，3，4，5，6，7和8，并且当o，p，q其中之一为0时，另外两个不能为0。在另一优选例中，所述A是可断裂连接子组合或不可断裂连接子；更佳地，所述A的结构如式Ⅲ或Ⅳ所示：C–Ee–FfⅢGgⅣ其中C是可断裂连接子；E，F是自杀式连接子；e，f分别选自0-5范围内的整数，包括0，1，2，3，4和5；G是不可断裂连接子；g选自0-5范围内的整数，包括0，1，2，3，4和5。在另一优选例中，所述抗体药物偶联物的结构如式Ⅴ、Ⅵ所示：其中L是抗体、抗体片段或蛋白；Z选自O，S，NR2，NR3C(＝O)，C(＝O)NR4，C(＝O)O，OC(＝O)，C(＝S)O，OC(＝S)，C(＝S)NR5，NR6C(＝S)，C(＝S)S，SC(＝S)，NR7C(＝O)NR8，NR9C(＝S)NR10，OC(＝O)NR11，NR12C(＝O)O；R1选自亚烷基，亚烯基，亚炔基，亚芳基，-(CH2CH2O)t-，-(OCH2CH2)w-，或其中任意组合，其中t，w分别选自1-18范围内的整数，包括1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17和18；R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，R11和R12独立地选自H，烷基，芳基，杂环基，芳烷基，杂芳烷基；r选自0或1；s选自0-8范围内的整数，包括0，1，2，3，4，5，6，7和8；X选自NR13，O，S，C(＝O)，C(＝S)，C(＝O)NR14，NR15C(＝O)，NR16C(＝S)，C(＝S)NR17，OC(＝O)，C(＝O)O，OC(＝S)，C(＝S)O；其中R13，R14，R15，R16和R17独立地选自H，烷基，芳基，杂环基，芳烷基，杂芳烷基；o，p，q分别选自0-8范围内的整数，包括0，1，2，3，4，5，6，7和8，并且当o，p，q其中之一为0时，另外两个不能为0。在另一优选例中，所述抗体为针对细胞表面受体和肿瘤相关抗原的抗体。在另一优选例中，所述药物为细胞毒性药物，治疗自身免疫疾病的药物和抗炎症的药物。在本专利技术的第二方面，提供了一种结构如下式所示的三马来酰亚胺型连接子：在本专利技术的第三方面，提供了一种结构如式Ⅶ所示的三马来酰亚胺型连接子在制备抗体药物偶联物中的应用：其中Z选自O，S，NR2，NR3C(＝O)，C(＝O)NR4，C(＝O)O，OC(＝O)，C(＝S)O，OC(＝S)，C(＝S)NR5，NR6C(＝S)，C(＝S)S，SC(＝S)，NR7C(＝O)NR8，NR9C(＝S)NR10，OC(＝O)NR11，NR12本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种如式Ⅰ所示的抗体药物偶联物，L–(T–A–D)n   Ⅰ其中L是抗体，抗体片段或蛋白；T是三马来酰亚胺型连接子部分；A是其它连接子部分；D是药物部分；n是一个范围在1‑8的整数；所述三马来酰亚胺型连接子部分的结构如式Ⅱ所示：其中，Z选自O，S，NR2，NR3C(＝O)，C(＝O)NR4，C(＝O)O，OC(＝O)，C(＝S)O，OC(＝S)，C(＝S)NR5，NR6C(＝S)，C(＝S)S，SC(＝S)，NR7C(＝O)NR8，NR9C(＝S)NR10，OC(＝O)NR11，NR12C(＝O)O；R1选自亚烷基，亚烯基，亚炔基，亚芳基，‑(CH2CH2O)t‑，‑(OCH2CH2)w‑，或其中任意组合，其中t，w分别选自1‑18范围内的整数；R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，R11和R12独立地选自H，烷基，芳基，杂环基，芳烷基，杂芳烷基；r选自0或1；s选自0‑8范围内的整数；X选自NR13，O，S，C(＝O)，C(＝S)，C(＝O)NR14，NR15C(＝O)，NR16C(＝S)，C(＝S)NR17，OC(＝O)，C(＝O)O，OC(＝S)，C(＝S)O；其中R13，R14，R15，R16和R17独立地选自H，烷基，芳基，杂环基，芳烷基，杂芳烷基；o，p，q分别选自0‑8范围内的整数，并且当o，p，q其中之一为0时，另外两个不能为0。...

【技术特征摘要】
1.一种如式Ⅰ所示的抗体药物偶联物，L–(T–A–D)nⅠ其中L是抗体，抗体片段或蛋白；T是三马来酰亚胺型连接子部分；A是其它连接子部分；D是药物部分；n是一个范围在1-8的整数；所述三马来酰亚胺型连接子部分的结构如式Ⅱ所示：其中，Z选自O，S，NR2，NR3C(＝O)，C(＝O)NR4，C(＝O)O，OC(＝O)，C(＝S)O，OC(＝S)，C(＝S)NR5，NR6C(＝S)，C(＝S)S，SC(＝S)，NR7C(＝O)NR8，NR9C(＝S)NR10，OC(＝O)NR11，NR12C(＝O)O；R1选自亚烷基，亚烯基，亚炔基，亚芳基，-(CH2CH2O)t-，-(OCH2CH2)w-，或其中任意组合，其中t，w分别选自1-18范围内的整数；R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，R11和R12独立地选自H，烷基，芳基，杂环基，芳烷基，杂芳烷基；r选自0或1；s选自0-8范围内的整数；X选自NR13，O，S，C(＝O)，C(＝S)，C(＝O)NR14，NR15C(＝O)，NR16C(＝S)，C(＝S)NR17，OC(＝O)，C(＝O)O，OC(＝S)，C(＝S)O；其中R13，R14，R15，R16和R17独立地选自H，烷基，芳基，杂环基，芳烷基，杂芳烷基；o，p，q分别选自0-8范围内的整数，并且当o，p，q其中之一为0时，另外两个不能为0。2.如权利要求1所述的抗体药物偶联物，其特征在于，所述A是可断裂连
\t接子组合或不可断裂连接子。3.如权利要求2所述的抗体药物偶联物，其特征在于，所述A的结构如式Ⅲ或Ⅳ所示：C–Ee–FfⅢGgⅣ其中C是可断裂连接子；E,F是自杀式连接子；e,f分别是在0-5范围内的整数；G是不可断裂连接子；g是0-5范围内的整数。4.如权利要求1-3任一项所述的抗体药物偶联物，其特征在于，所述抗体药物偶联物的结构如式Ⅴ或Ⅵ所示：其中，L是抗体、抗体片段或蛋白；Z选自O，S，NR2，NR3C(＝O)，C(＝O)NR4，C(＝O)O，OC(＝O)，C(＝S)O，OC(＝S)，C(＝S)NR5，NR6C(＝S)，C(＝S)S，SC(＝S)，NR7C(＝O)NR8，NR9C(＝S)NR10，OC(＝O)NR11，NR12C(＝O)O；R1选自亚烷基，亚烯基，亚炔基，亚芳基，-(CH2...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩念和，安德强，曾迪，王宝祥，杨航，荐立，杨春，
申请(专利权)人：上海新理念生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31