一种复合细菌纤维素医用敷料的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种复合细菌纤维素医用敷料的制备方法，属于生物材料制备技术领域。本发明专利技术首先将酿酒酵母菌、醋化醋杆菌和木葡糖酸醋杆菌接种到自制的活化培养基中进行活化培养后，再将活化后的菌种接种到种子培养基中进行培养，随后将种子液接种到发酵罐中与海藻酸钠、硫酸软骨素等一起进行厌氧发酵，再将得到的细菌纤维素膜取出并去除菌体和培养基，最后与地榆提取物进行冷冻干燥、缓冲溶液浸泡等操作得到一种复合细菌纤维素医用敷料。本发明专利技术解决了生物敷料需要不能用于干燥伤口的问题，并且本发明专利技术制备的医用敷料能够透过坚硬的坏死组织进入伤口内部，使伤口快速愈合，并且作用于软骨组织时，还能使促进软骨组织生长。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种复合细菌纤维素医用敷料的制备方法，属于生物材料制备

技术介绍
医用敷料主要功能是覆盖、保护破损皮肤，同时提供有助于伤口愈合的环境，传统主要使用脱脂棉纱布、纱布条、棉球和棉膜等天然纤维性材料类敷料，可使伤口干燥，具备物理隔离功能；但存在与渗出物结痂，造成伤口粘连，换药时引发疼痛及新的创伤，以及细菌滋生、保湿及止血性能不佳等问题。为此，学者们研究出了生物敷料，其能与伤口紧密贴合，保持伤口润湿避免其干燥，可辅助局部使用的药物及机体内源性分子促进伤口愈合。生物敷料通常应具备以下要求：（1）保湿、吸湿性良好，能有效保留伤口渗液同时不形成积液；（2）伤口组织处粘连程度轻，不易与伤口渗液粘连成痂，减轻换药时的疼痛及造成新生组织损伤；（3）抗菌、抑菌性较好，预防伤口感染；（4）生物相容性优良，对人体无刺激，不会引起中毒、病变等。目前的生物敷料根据用途以及材质，可将其分为天然材料类、人工合成材料类和载药类敷料。天然材料类包括海藻酸盐敷料、壳聚糖敷料、动物类敷料等，海藻酸盐敷料具有吸湿性强、揭除容易、有助于血液凝固及伤口愈合等优点，但是海藻酸盐敷料需要一定的湿度才能发挥作用，所以它们不能用于干燥的伤口和被坚硬的坏死组织所覆盖的伤口，这是海藻酸盐敷料的主要缺点。壳聚糖敷料具有良好的生物相容性和生物可降解性，还具有抗菌、消毒、无毒、止血、减少创面渗出和促进创伤组织再生等优点，其缺点是力学性能较差，抗水性能差等。动物类敷料在结构、黏附性及胶原含量上与人体皮肤组织比较接近，但是它的力学性能较差，容易分层，会影响自体皮肤移植，且病原微生物容易污染，不易储存。合成材料类包括薄膜型敷料、水胶体类敷料、泡沫类敷料，薄膜型敷料透气性、阻菌性及贴附性好，但是吸收性较差，水胶体类敷料胶体层吸收大量渗出物后会造成创面伤口的二次污染，泡沫类敷料由于其具有多孔结构，伤口组织易长入孔隙，造成脱膜困难，并常有泡沫碎屑遗留于伤口导致痂痕增多。载药类敷料的缺点为不具备粘连性，需要增加辅料加以固定，并且使用后会有着色现象，也有可能会产生耐药性，对其在临床上的应用也产生了一定的抑制作用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题：针对目前生物敷料需要一定的湿度才能发挥作用，所以它们不能用于干燥的伤口和被坚硬的坏死组织所覆盖的伤口，并且抑菌消毒效果差的问题，提供了一种复合细菌纤维素医用敷料的制备方法，本专利技术首先将酿酒酵母菌、醋化醋杆菌和木葡糖酸醋杆菌接种到自制的活化培养基中进行活化培养后，再将活化后的菌种接种到种子培养基中进行培养，随后将种子液接种到发酵罐中与海藻酸钠、硫酸软骨素等一起进行厌氧发酵，再将得到的细菌纤维素膜取出并去除菌体和培养基，最后与地榆提取物进行冷冻干燥、缓冲溶液浸泡等操作得到一种复合细菌纤维素医用敷料。本专利技术中的硫酸软骨素具有良好的引湿性，可以吸收空气中的水分，使自身含水量增加，解决了生物敷料需要不能用于干燥伤口的问题，并且本专利技术制备的医用敷料能够透过坚硬的坏死组织进入伤口内部，使伤口快速愈合，并且作用于软骨组织时，还能使促进软骨组织生长。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：（1）量取300～400mL去离子水加入到烧杯中，加热至沸腾，然后停止加热，再加入15～20g绿茶，浸泡30～40min，过滤，收集滤液，再加入20～30g蔗糖、5～8g蛋白胨、8～10g酵母粉，搅拌5～10min，并移入灭菌罐，在120～130℃下高温灭菌10～20min，制得种子培养基，备用；（2）称取100～200g马铃薯泥、10～20g葡萄糖和10～15g琼脂加入到培养皿中，再加入800～1000mL去离子水，搅拌均匀后，再加入质量浓度为5%醋酸溶液调节pH至6.5～6.8，随后移入灭菌罐中，在110～120℃下高温灭菌20～30min，制得活化培养基；（3）将3～5g酿酒酵母菌、3～5g醋化醋杆菌和6～8g木葡糖酸醋杆菌分别接种到三个活化培养基中，然后置于恒温培养箱中，在20～30℃下培养2～3天，将活化后的菌种按3～5%的接种量分别接种至备用的种子培养基中，于25～35℃、160～180r/min下摇床振荡24～36h；（4）然后分别将培养后的种子液按8～10%的接种量接种至同一发酵罐中，再称取10～20g葡萄糖、20～30g甘露醇、5～8g蛋白胨和800～1000mL去离子水一起加入到发酵罐中，搅拌10～20min后，再依次加入10～20g海藻酸钙、5～8g透明质酸、8～12g硫酸软骨素，搅拌均匀后，在25～35℃下厌氧发酵4～5天；（5）发酵完成后将细菌纤维素膜取出，然后用去离子水洗涤3～5次，再置于水浴锅中，在120～130℃下水浴加热1～2h，去除残余菌体和培养基，再用去离子水洗涤至中性，得到复合细菌纤维素；（6）称取10～20g地榆，用粉碎机进行粉碎，将地榆粉末加入到烧杯中，并加入200～300mL质量浓度为75%乙醇溶液，再置于超声波振荡仪中，在1000～1200W、50～60℃下超声振荡30～40min，过滤，得到滤液，将细菌纤维素和滤液一起加入到已消毒的模具中冷冻干燥得到复合膜，然后再置于烘箱中，在60～70℃下干燥3～4h，再置于烧杯中，加入pH为5.5～5.8的醋酸-醋酸钠缓冲溶液将复合膜浸没，常温下浸泡1～2天，然后将复合膜取出并自然晾干，于2～4℃下保存，即可得到一种复合细菌纤维素医用敷料。本专利技术的应用方法：本专利技术制备的医用敷料可用于治愈烧伤、烫伤、手术切口等多种皮肤类创伤，使用前先用医用酒精将创伤周围皮肤擦干，再选用比创面大5～8cm的本专利技术的医用敷料覆盖伤口，之后再用无菌纱布包扎，更换时间根据创面渗出液而定，渗出液多，敷料吸收饱和应及时更换，渗出液少，可隔1～2天更换即可。本专利技术与其他方法相比，有益技术效果是：（1）本专利技术中的细菌纤维素三维网络内部均匀分布有海藻酸钠、透明质酸、硫酸软骨素，这种结构提高了整体的力学性能和热稳定性，同时赋予了细菌纤维素敷料止血功能，并且能够促进伤口愈合；（2）本专利技术制备的医用敷料能够透过坚硬的坏死组织进入伤口内部，使伤口快速愈合，作用于软骨组织时，还能使促进软骨组织生长，具有保湿、透气、吸收伤口渗出液等功效；（3）本专利技术主制备步骤简单，所需成本低。具体实施方式首先量取300～400mL去离子水加入到烧杯中，加热至沸腾，然后停止加热，再加入15～20g绿茶，浸泡30～40min，过滤，收集滤液，再加入20～30g蔗糖、5～8g蛋白胨、8～10g酵母粉，搅拌5～10min，并移入灭菌罐，在120～130℃下高温灭菌10～20min，制得种子培养基，备用；接着称取100～200g马铃薯泥、10～20g葡萄糖和10～15g琼脂加入到培养皿中，再加入800～1000mL去离子水，搅拌均匀后，再加入质量浓度为5%醋酸溶液调节pH至6.5～6.8，随后移入灭菌罐中，在110～120℃下高温灭菌20～30min，制得活化培养基；再将3～5g酿酒酵母菌、3～5g醋化醋杆菌和6～8g木葡糖酸醋杆菌分别接种到三个活化培养基中，然后置于恒温培养箱中，在20～30℃下培养2～3天，将活化后的菌种按3～5%的接种量分别接种至备用的种子培养基中，于25～35℃、160～180r/min下本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合细菌纤维素医用敷料的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）量取300～400mL去离子水加入到烧杯中，加热至沸腾，然后停止加热，再加入15～20g绿茶，浸泡30～40min，过滤，收集滤液，再加入20～30g蔗糖、5～8g蛋白胨、8～10g酵母粉，搅拌5～10min，并移入灭菌罐，在120～130℃下高温灭菌10～20min，制得种子培养基，备用；（2）称取100～200g马铃薯泥、10～20g葡萄糖和10～15g琼脂加入到培养皿中，再加入800～1000mL去离子水，搅拌均匀后，再加入质量浓度为5%醋酸溶液调节pH至6.5～6.8，随后移入灭菌罐中，在110～120℃下高温灭菌20～30min，制得活化培养基；（3）将3～5g酿酒酵母菌、3～5g醋化醋杆菌和6～8g木葡糖酸醋杆菌分别接种到三个活化培养基中，然后置于恒温培养箱中，在20～30℃下培养2～3天，将活化后的菌种按3～5%的接种量分别接种至备用的种子培养基中，于25～35℃、160～180r/min下摇床振荡24～36h；（4）然后分别将培养后的种子液按8～10%的接种量接种至同一发酵罐中，再称取10～20g葡萄糖、20～30g甘露醇、5～8g蛋白胨和800～1000mL去离子水一起加入到发酵罐中，搅拌10～20min后，再依次加入10～20g海藻酸钙、5～8g透明质酸、8～12g硫酸软骨素，搅拌均匀后，在25～35℃下厌氧发酵4～5天；（5）发酵完成后将细菌纤维素膜取出，然后用去离子水洗涤3～5次，再置于水浴锅中，在120～130℃下水浴加热1～2h，去除残余菌体和培养基，再用去离子水洗涤至中性，得到复合细菌纤维素；（6）称取10～20g地榆，用粉碎机进行粉碎，将地榆粉末加入到烧杯中，并加入200～300mL质量浓度为75%乙醇溶液，再置于超声波振荡仪中，在1000～1200W、50～60℃下超声振荡30～40min，过滤，得到滤液，将细菌纤维素和滤液一起加入到已消毒的模具中冷冻干燥得到复合膜，然后再置于烘箱中，在60～70℃下干燥3～4h，再置于烧杯中，加入pH为5.5～5.8的醋酸‑醋酸钠缓冲溶液将复合膜浸没，常温下浸泡1～2天，然后将复合膜取出并自然晾干，于2～4℃下保存，即可得到一种复合细菌纤维素医用敷料。...

【技术特征摘要】
1.一种复合细菌纤维素医用敷料的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）量取300～400mL去离子水加入到烧杯中，加热至沸腾，然后停止加热，再加入15～20g绿茶，浸泡30～40min，过滤，收集滤液，再加入20～30g蔗糖、5～8g蛋白胨、8～10g酵母粉，搅拌5～10min，并移入灭菌罐，在120～130℃下高温灭菌10～20min，制得种子培养基，备用；（2）称取100～200g马铃薯泥、10～20g葡萄糖和10～15g琼脂加入到培养皿中，再加入800～1000mL去离子水，搅拌均匀后，再加入质量浓度为5%醋酸溶液调节pH至6.5～6.8，随后移入灭菌罐中，在110～120℃下高温灭菌20～30min，制得活化培养基；（3）将3～5g酿酒酵母菌、3～5g醋化醋杆菌和6～8g木葡糖酸醋杆菌分别接种到三个活化培养基中，然后置于恒温培养箱中，在20～30℃下培养2～3天，将活化后的菌种按3～5%的接种量分别接种至备用的种子培养基中，于25～35℃、160～180r/min下摇床振荡24～36h；（4）然后分别将培养后的种子液按8～10%的接种量...

【专利技术属性】
技术研发人员：仇颖莹，孟浩影，
申请(专利权)人：仇颖莹，
类型：发明
国别省市：江苏;32