联合用药抗肿瘤药物、制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种联合用药抗肿瘤药物，包括抗血管生成药物、抗肿瘤细胞增殖药物和两亲性高分子材料；所述抗血管生成药物为康普瑞汀A4的药物前体，所述抗肿瘤细胞增殖药物为喜树碱类抗肿瘤药物。本发明专利技术还公开了一种联合用药抗肿瘤药物制剂、制备方法以及应用。细胞毒性实验表明本发明专利技术中的纳米粒可以显著抑制肿瘤细胞(HT‑29)和人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的增殖，且有剂量依赖关系；划痕损伤和管腔形成实验也证实本发明专利技术中制备的纳米粒能抑制HUVEC的迁移和血管形成。对比单独用药体系，本发明专利技术中提供的联合用药纳米粒在体内显示了较好的抑瘤效果，具有良好的临床应用价值和应用前景。

Antineoplastic medicine for combined use, preparation method and application thereof

The invention discloses a drug combination of antitumor drugs, including anti tumor anti angiogenesis drugs, cell proliferation and drug two amphipathic polymer material; the anti angiogenic drugs for drug combretastatin A4 precursor, the anticancer drug camptothecin for cell proliferation and anti tumor drugs. The invention also discloses a combined use of antineoplastic drug preparation, a preparation method and application thereof. Cell toxicity test showed that the nanoparticles in the invention can significantly inhibit tumor cells (HT 29) and human umbilical vein endothelial cell (HUVEC) proliferation, and in a dose dependent manner; scratch damage and tube formation assay also confirmed the migration and vascular preparation of nanoparticles in the invention can inhibit the formation of HUVEC. Compared with the single drug administration system, the combined drug nanoparticles provided by the invention has good anti-tumor effect in vivo, and has good clinical application value and application prospect.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物合成领域，具体是涉及一种抗血管生成药物和抗肿瘤细胞增殖药物联合用药抗肿瘤药物、制备方法及应用。
技术介绍
7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)是临床抗肿瘤药物伊立替康(CPT-11)的活性产物。SN38以拓扑异构酶为靶向部位，抑制拓扑异构酶I-DNA复合物结合，从而阻止断裂单链的再连接，使DNA双链结构解旋而发挥抗肿瘤作用。SN38在体外显示较高的活性，是CPT-11活性的100～1000倍。因此，直接利用SN38分子，避开对CPT-11进行酶解从而释放SN38的途径，可望有效提高药物的抗肿瘤效果。但是SN38的水溶性很差，且不溶于药剂学上可以接受的溶剂(如吐温或者聚氧乙烯蓖麻油)，因此无法直接用于临床注射。此外，肿瘤治疗临床研究表明，长时间使用单一的抑制肿瘤细胞生长的化疗药物会产生耐药性。随着抗血管治疗肿瘤相关研究方案的不断深入，抗血管生成药物联合应用抗肿瘤细胞增殖药物的抗癌策略，为肿瘤的治疗提供了新的思路和方向。恶性肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤血管，随着肿瘤血管新生机制研究的深入以及以肿瘤血管为靶点的药物在临床治疗肿瘤时取得较好的疗效，证实了通过抑制肿瘤血管新生来抑制肿瘤生长的理念。康普瑞汀A4(Combretastatin，CA4)是从非洲灌木Combretum Caffrum 的树皮分离的一种顺式二苯乙烯类天然产物，属于秋水仙碱样的微管组装抑制剂，能够特异性地靶向肿瘤血管内皮细胞，破坏内皮细胞骨架引起细胞结构发生变化，从而导致肿瘤血管的减少，引起肿瘤中央区域发生坏死。CA4结构式如下式所示：但是我们前期的实验显示，SN38由于其独特的化学结构，难以直接与两亲性高分子材料共组装形成纳米粒。而CA4则在高分子材料纳米粒中存在快速释放的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种抗血管生成药物和抗肿瘤细胞增殖药物联合用药的抗肿瘤药物，实现抗血管生成药物和抗肿瘤细胞增殖药物联合用药的抗癌策略，提高联合用药的疗效。本专利技术还提供了一种抗血管生成药物和抗肿瘤细胞增殖药物联合用药的抗肿瘤药物制剂。本专利技术同时公开了一种抗血管生成药物和抗肿瘤细胞增殖药物联合用药的抗肿瘤药物制剂的制备方法。本专利技术中将采用先进的纳米制备技术，将难溶于水的抗肿瘤药物和抗血管生成药物包载于两亲性高分子材料中，形成载药纳米体系，同时克服了，SN38难以直接与两亲性高分子材料共组装形成纳米粒的问题。针对现有纳米技术制备抗血管生成药物联合应用抗肿瘤细胞增殖药物存在的问题，本专利技术将提出一种康普瑞汀前体联合应用喜树碱抗肿瘤药物前体的抗癌方法，并将该联合用药方法与先进纳米技术结合，制备抗肿瘤治疗的联合用药的纳米释放体系，实现抗血管生成药物和抗肿瘤细胞增殖药物联合应用的价值，改善临床抗肿瘤治疗的疗效。一种联合用药抗肿瘤药物，包括抗血管生成药物、抗肿瘤细胞增殖药物和两亲性高分子材料；所述抗血管生成药物为康普瑞汀A4的药物前体，所述抗肿瘤细胞增殖药物为喜树碱类抗肿瘤药物。作为优选，所述康普瑞汀A4的药物前体结构如下：所述R为C1～C10的烷酰基。作为进一步优选，所述康普瑞汀A4的药物前体为康普瑞汀A4(CA4)与丁酸或庚酸或其对应的酰氯、酸酐酯化得到的药物前体。作为优选，所述康普瑞汀A4的药物前体结构如下：上述康普瑞汀A4的药物前体可由康普瑞汀A4(CA4)与丁酸或庚酸酯化得到。作为优选，所述的抗肿瘤细胞增殖药物为7-乙基-10-羟基喜树碱与不饱和脂肪酸连接形成的药物前体。反应过程中，可根据需要添加催化剂，缩合剂等，比如可采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺的盐酸盐作为缩合剂，4-二甲氨基吡啶作为催化剂，同时可利用N,N-二异丙基乙胺中和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺的盐酸盐中的盐酸。作为进一步优选，所述康普瑞汀A4与羧酸、催化剂、缩合剂的摩尔比为1:(1～1.5):(0.5～1.5):(1～1.5)。作为优选，所述不饱和脂肪酸选自二十二碳六烯酸、全反式维甲酸、亚麻酸、油酸或亚油酸。作为优选，所述两亲性高分子材料选自聚乙二醇-聚乳酸(PEG-PLA)、聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸(PEG-PLGA)、甲氧基聚乙二醇-聚乳酸(mPEG-PLA)或甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸(mPEG-PLGA)中的任意一种。其中，PEG或mPEG的分子量为2k～8k，PLA的分子量为2k～16k，PLGA的分子量为2k～16k。优选为mPEG5k-PLA16k。本专利技术还提供了一种联合用药抗肿瘤药物制剂，所述抗肿瘤药物为上述任一项所述的抗肿瘤药物。所述制剂可为常见的剂型，比如可为粉剂或片剂、注射剂、丸剂等等。本专利技术还提供了一种上述联合用药抗肿瘤药物制剂的制备方法，包括：将抗血管生成药物、抗肿瘤细胞增殖药物和两亲性高分子材料溶于有机溶剂中，然后加入到水中，得到所述抗肿瘤药物制剂。具体讲，包括：第一步：对喜树碱衍生物7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)进行分子改性，偶联不饱和脂肪酸，选自二十二碳六烯酸(DHA)、全反式维甲酸(RA)、亚麻酸(LNA)、油酸或亚油酸(LA)，赋予药物分子亲脂性。而亲脂性SN38衍生物能够在体内释放具有抗癌活性的SN38分子；对康普瑞汀A4(CA4)进行分子改性，偶联饱和脂肪酸(丁酸或庚酸)，减缓药物从纳米粒中的释放速度；第二步：构建同时负载第一步SN38前药和CA4前药的纳米粒，该纳米粒由CA4前药、SN38前药和两亲性高分子组成。本专利技术提供了一种上述任一方案所述联合用药抗肿瘤药物在抗肿瘤中的应用。本专利技术的载抗血管生成药物和抗肿瘤细胞增殖药物联合用药纳米粒，在体外能够抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞的增殖、抑制血管内皮细胞的迁移和侵袭、抑制血管管腔的形成。本专利技术的联合用药纳米粒在体内也显示了较好的抑制肿瘤增长的能力，进一步证实本专利技术中抗血管生成药物和抗肿瘤细胞增殖药物联合用药纳米粒在抗肿瘤治疗中具有广阔的应用价值和应用范围。而且，细胞毒性实验表明本专利技术中的纳米粒可以显著抑制肿瘤细胞(HT-29)和人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的增殖，且有剂量依赖关系；划痕损伤和管腔形成实验也证实本专利技术中制备的纳米粒能抑制HUVEC的迁移和血管形成。对比单独用药体系，本专利技术中提供的联合用药纳米粒在体内显示了较好的抑瘤效果，具有良好的临床应用价值和应用前景。附图说明图1为实施例9中纳米粒电镜和粒径图；图2为实施例10中纳米粒电镜和粒径图；图3为实施例11中纳米粒电镜和粒径图；图4为实施例8、9、10、11中不同浓度纳米粒对肿瘤细胞HT-29生存率的影响曲线；图5为实施例8、9、10、11中不同浓度纳米粒对人脐带血管内皮细胞HUVEC生存率的影响曲线；图6为实施例9、10、11中纳米粒对人脐带血管内皮细胞HUVEC迁移率的影响；图7为实施例9、10、11中纳米粒对人脐带血管内皮细胞HUVEC侵袭能力的影响；图中，SN38表示7-乙基-10-羟基喜树碱，CA4或1表示康普瑞汀A4，丁酸-CA4或2表示丁酸与CA4的偶联物，庚酸-CA4或3表示庚酸与CA4的偶联物，1/4-NP、2/4-NP、3/4-NP分别表示CA4、丁酸-CA4、庚酸-CA4与LNA-SN38与两亲性高分子共组装形成的纳米粒。具体实施方式下面结本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种联合用药抗肿瘤药物，其特征在于，包括抗血管生成药物、抗肿瘤细胞增殖药物和两亲性高分子材料；所述抗血管生成药物为康普瑞汀A4的药物前体，所述抗肿瘤细胞增殖药物为喜树碱类抗肿瘤药物。

【技术特征摘要】
1.一种联合用药抗肿瘤药物，其特征在于，包括抗血管生成药物、抗肿瘤细胞增殖药物和两亲性高分子材料；所述抗血管生成药物为康普瑞汀A4的药物前体，所述抗肿瘤细胞增殖药物为喜树碱类抗肿瘤药物。2.根据权利要求1所述的联合用药抗肿瘤药物，其特征在于，所述康普瑞汀A4的药物前体结构如下：所述R为C1～C10的烷酰基。3.根据权利要求1所述的联合用药抗肿瘤药物，其特征在于，所述康普瑞汀A4的药物前体为康普瑞汀A4与丁酸或庚酸或其对应的酰氯、酸酐酯化得到的药物前体。4.根据权利要求1所述的联合用药抗肿瘤药物，其特征在于，所述康普瑞汀A4的药物前体结构如下：5.根据权利要求1所述的联合用药抗肿瘤药物，其特征在于，所述的抗肿瘤细胞增殖药物为7-乙基-10-羟基喜树碱与不饱和脂肪...

【专利技术属性】
技术研发人员：王杭祥，吴佳萍，陈建美，谢海洋，周琳，郑树森，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33