The invention relates to an acetylcholinesterase biosensor and an application thereof, belonging to the technical field of electrochemical detection. The biosensor by the following steps: first, to get KMnO4, CTAB, PdCl2, PEG400, H2PtCl6, sodium citrate and sodium borohydride as the starting material, by using water bath preparation method of MnO2 nanoflakes nanocomposites and Pd Pt@MnO2 nanoflakes nano composite materials; second, the use of Chitosan Immobilized acetylcholinesterase (CS) the physical adsorption of acetylcholinesterase (AChE) immobilized on glassy carbon electrode on the surface of Pd Pt@MnO2 modified constructed electrochemical biosensor. The invention adopts electrochemical enzyme sensor and combining technology, the realization of parathion methyl and carbofuran pesticide and high detection sensitivity, little sample, short detection time, high sensitivity, low cost, suitable for analysis and detection of pesticide residues.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种乙酰胆碱酯酶生物传感器及其应用,具体涉及基于铂钯合金负载二氧化锰纳米复合材料的电化学生物传感器及其应用,属于电化学检测
技术介绍
农药作为农业生产过程中一种特殊的生产资料,它可以消灭虫害、增加产量、保证收成,还能预防和控制人类传染病。但农药大量使用引发的食品安全问题也日益突出。农药通过被污染的农产品进入人体,人将产生中毒现象,一些有害元素可能引起人体细胞癌变,甚至还会影响到后代健康。因此,为了提高和保障食品质量和生命安全,对农药残留的高灵敏检测成为了近几年国内外关注的焦点。目前,农药残留检测气相色谱、高效液相色谱、色谱-质谱联用技术、毛细管电泳、表面增强拉曼光谱法、免疫分析、生物传感器等技术已被应用到农药残留检测的实际工作中。但由于气相色谱、高效液相色谱和色谱-质谱联用技术,仪器昂贵且不易实现微型化,样品的前处理过程相对比较复杂;毛细管电泳则毛细管直径小,光路短,重现性差;表面增强拉曼光谱法重现性和稳定性差。因此构建简便、快速、准确和高效的农药残留检测方法,有效的解决由农药残留超标导致的卫生安全和环境污染已经成为目前的焦点。电化学生物传感器在目前的传感器中占有重要的地位,其具有灵敏度高、仪器自动化程度高、样品消耗少、响应时间短、操作简便、成本低廉,以此同时其检测信号转换为直观易读的浓度值,便于非专业人士使用,目前已被广泛应用于生物医学、环境科学、药物学以及食品科学等领域。酶方法在农药残留的检测中也引起了人们的广泛关注,主要是由于具备操作简单、选择性好、灵敏度高、响应时间快和检测仪器的微型化等以上优点。钯负载二氧化锰纳米材料目前 ...
【技术保护点】
一种乙酰胆碱酯酶生物传感器,其特征在于该乙酰胆碱酯酶生物传感器经由如下步骤得到:(1)Pd‑Pt@MnO2‑nanoflakes纳米复合材料的制备①MnO2‑nanoflakes材料的制备911mg十六烷基三甲基溴化铵溶于25ml的超纯水中,加热回流至温度保持在140℃时,接着加入KMnO4其质量为79.02mg溶于25mL的超纯水中,待温度恒定保持在140℃时回流8至10分钟,颜色由紫色变为深棕色,冷却至室温,用乙醇洗三次,用水定容至10mL,即得到MnO2‑nanoflakes纳米复合材料;②Pd‑Pt@MnO2‑nanoflakes复合材料的制备取5mL①制得的MnO2nanoflakes材料,加入0.5mL 10mM PdCl2,0.5mL10mM H2PtCl6,0.1mL PEG400和1.0mL 10mM柠檬酸钠搅拌混匀,最后加入3mL15mM硼氢化钠反应4h,之后用水洗三次离心,定容至5mL,即得到Pd‑Pt@MnO2复合材料;(2)玻碳电极表面预处理将直径为3mm的玻碳电极Glassy carbon electrode用Al2O3糊抛光处理成镜面,依次用乙醇和二次蒸馏 ...
【技术特征摘要】
1.一种乙酰胆碱酯酶生物传感器,其特征在于该乙酰胆碱酯酶生物传感器经由如下步骤得到:(1)Pd-Pt@MnO2-nanoflakes纳米复合材料的制备①MnO2-nanoflakes材料的制备911mg十六烷基三甲基溴化铵溶于25ml的超纯水中,加热回流至温度保持在140℃时,接着加入KMnO4其质量为79.02mg溶于25mL的超纯水中,待温度恒定保持在140℃时回流8至10分钟,颜色由紫色变为深棕色,冷却至室温,用乙醇洗三次,用水定容至10mL,即得到MnO2-nanoflakes纳米复合材料;②Pd-Pt@MnO2-nanoflakes复合材料的制备取5mL①制得的MnO2nanoflakes材料,加入0.5mL 10mM PdCl2,0.5mL10mM H2PtCl6,0.1mL PEG400和1.0mL 10mM柠檬酸钠搅拌混匀,最后加入3mL15mM硼氢化钠反应4h,之后用水洗三次离心,定容至5mL,即得到Pd-Pt@MnO2复合材料;(2)玻碳电极表面预处理将直径为3mm的玻碳电极Glassy carbon electrode用Al2O3糊抛光处理成镜面,依次用乙醇和二次蒸馏水超声清洗,放置于空气中自然干燥,然后在pH 7.4的PBS溶液中于+1.75V恒电位下扫描300s,再于+0.3V~+1.25V和+0.3V~-1.3V之间循环扫描多次,待电流稳定后,用二次水冲洗电极并在空气中自...
【专利技术属性】
技术研发人员:于毅涛,李灿鹏,杨龙,张艳琼,马雪涛,邱烨,
申请(专利权)人:云南省产品质量监督检验研究院,
类型:发明
国别省市:云南;53
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