西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位及制法和应用制造技术

西北沼委陵菜抗HIV‑1病毒有效部位及制法和应用，属于植物提取物技术领域。为西北沼委陵菜正丁醇部位或西北沼委陵菜水相萃取部位。将西北沼委陵菜粉碎，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏分散在蒸馏水中得浸膏分散液，然后依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，将所得正丁醇萃取液挥去溶剂，得西北沼委陵菜正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液浓缩、干燥，得西北沼委陵菜水相萃取部位。本发明专利技术的西北沼委陵菜抗HIV‑1病毒有效部位在制备抗HIV‑1病毒药物方面的应用，适用于开发成抗艾滋病新药。

The effective parts of anti HIV 1 northwest marsh cinquefoil virus and preparation method and Application

The effective parts of Northwest 1 marsh cinquefoil anti HIV virus and preparation method and application thereof, which belongs to the technical field of plant extracts. Northwest marsh cinquefoil n-butanol or in the marsh cinquefoil phase extraction site. The northwest marsh cinquefoil crushing, adding volume percentage concentration of 65%~95% in ethanol extraction, the extract was concentrated and dried extract; the extract was dispersed in distilled water to extract the dispersion, followed by petroleum ether, ethyl acetate and n-butanol as solvent extraction extract dispersion liquid, the n-butanol extract essential to the solvent was n-butanol fraction of Potentilla in biogas; extraction after remaining extract dispersion liquid is concentrated and dried to aqueous extract of Potentilla in biogas. The application of the effective part of the northwest 1 marsh cinquefoil anti HIV virus in the preparation of anti HIV 1 virus drugs, suitable for the development of a new anti AIDS drug.

【技术实现步骤摘要】

西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位及制法和应用，属于植物提取物

技术介绍
西北沼委陵菜（Comarum salesovianum （Stepn.） Asch. et Gr.）为蔷薇科（Rosaceae）沼委陵菜属（Comarum palustre L.）多年生亚灌木植物[参见：中国科学院中国植物志编辑委员会.中国高等植物[M].北京：科学出版社,2003（6）.]，是传统药用植物。其主要生于海拔2800-4250米的山坡林缘、林下及河谷湿草地。分布在我国西南、西北、华北至东北。北温带广布，北美洲、欧洲至日本、小亚细亚至喜马拉雅等地也有[参见：GBIF （Global Biodiversity Information Facility）. Comarum salesovianum （Stephan） Asch. & Graebn, 2015. www.gbif.org/ species/3020536.]。蒙古科学院发现其具有明显抗炎活性[参见：Odontuya G, Banzragchgarav O, Murata T, et al. Antibacterially active phenolic lipid derivatives from Comarum salesovianum （Steph.） Aschers. et Gr.[J]. Phytochemistry Letters, 2015, 13： 360-364.]；一项日本专利表明其具有葡萄球菌抑制效果，可以预防痤疮和过敏性皮肤炎[参见：Y. Nobuo, S. Hiroyuki. JPO, 2011,JP 2011001329-A .]。艾滋病即获得性免疫缺陷综合症（又译：后天性免疫缺陷症候群）。如今艾滋病己在全球范围内成为严重危害人类生存与发展的公共卫生和社会问题。我国艾滋病的流行经过传入期、扩散期，目前己进入快速增长期，处于全国低流行和局部地区及特定人群高流行并存的态势。艾滋病是一种危害性极大的传染病，由感染艾滋病病毒（HIV病毒）引起。HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒，即“人类免疫缺陷病毒”，它侵入人体后破坏人体的免疫系统，使人体发生多种难以治愈的感染和肿瘤，最终导致死亡，现已证实HIV分为两型：HIV-1型和HIV-2型。HIV-1型为逆转录病毒科慢病毒属，其病毒RNA基因组必须经先行由单链RNA逆转录为cDNA，形成RNA-DNA杂合体后，水解掉与DNA互补的RNA，再以单链的cDNA为模板合成双链DNA，从而可以整合人宿主DNA基因组当中，此过程由逆转录酶（RT酶）催化。RT酶功能多样，它由P66和P51两个蛋白单体构成异源二聚体，其中P66是酶活性的主要功能部分；除具有逆转录酶活性外，还具有DNA聚合酶活性以及RNAse酶活性。逆转录过程的分子机制亦颇为复杂：逆转录过程的起始引物并非来自病毒自身合成，而是利用宿主细胞内的tRNALye-3，与病毒RNA的引物结合位点（PBS）相结合后，再高效启动逆转录过程。其次，逆转录酶因为缺泛3'-5'核酸外切酶活性，无法完成校读功能，复制忠实性差，是HIV病毒高变异性的重要原因之一。人类免疫缺陷病毒1型（即HIV-1型）逆转录酶 （RT）一直是重要的抗 HIV感染的靶点，用于开发治疗艾滋病的药物。蛋白酶是人类免疫缺陷病毒基因编码中的一种特异天冬酰蛋白酶，其作用是将基因和基因表达所产生的蛋白裂解，成为具有活性的病毒结构蛋白和酶，是HIV病毒复制的关键物质。HIV蛋白酶抑制剂主要作用于艾滋病病毒复制的最后阶段，由于蛋白酶被抑制，使之从感染的CD4细胞核中形成DNA不能聚集和释放，导致蛋白前体不能裂解和形成成熟病毒体。申请人在研究中发现：目前抗艾滋病药物的原料较为匮乏。现有的抗HIV病毒药物像其他类型的抗艾滋病病毒药物一样，随着 HIV-1逆转录酶产生耐药性突变，已上市的治疗艾滋病的药物的疗效受到限制。目前，迫切需要开发新一代抗HIV-1型病毒药物。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位及制法和应用，该西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位能有效抑制HIV-1 病毒活性，能够用于制备抗HIV-1 病毒药物，适用于开发成抗艾滋病新药。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：该西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位，其特征在于：选自西北沼委陵菜正丁醇部位或西北沼委陵菜水相萃取部位。该西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将西北沼委陵菜粉碎，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏分散在蒸馏水中得浸膏分散液，然后依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，将所得正丁醇萃取液挥去正丁醇，得西北沼委陵菜正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液浓缩、干燥，得西北沼委陵菜水相萃取部位。所述的提取为超声波辅助回流提取，超声波辅助回流提取具体操作为：将粉碎后的西北沼委陵菜加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液超声波提取0.5~3小时，过滤，滤渣加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取2~3次，合并提取液，浓缩干燥，得浸膏。将浸膏分散在蒸馏水中得浸膏分散液，然后依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，将所得正丁醇萃取液挥去正丁醇，得西北沼委陵菜正丁醇部位；萃取后剩余的浸膏分散液浓缩、干燥，得西北沼委陵菜水相萃取部位。该西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位的应用，其特征在于：在制备抗HIV-1 病毒药物中的应用。所述抗HIV-1 病毒药物是通过：将西北沼委陵菜正丁醇部位或西北沼委陵菜水相萃取部位，与药用辅料混合后，制成的口服制剂或注射制剂。所述的注射制剂为脂质体注射剂、纳米粒注射剂或微球注射剂。所述的口服制剂为散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服溶液剂。申请人对于本专利技术的说明如下：现有技术中，西北沼委陵菜常规用途为消炎抗菌，未见其有抗HIV-1病毒功效的相关报道。申请人通过大量研究发现：西北沼委陵菜中的部分提取物还具有抗HIV-1病毒的作用，但是功效不明显，不能确定其具体的有效部位。申请人通过研究发现：采用本专利技术制备方法，筛选出的西北沼委陵菜石油醚部位、西北沼委陵菜乙酸乙酯部位均无明显的抑制效果。而西北沼委陵菜正丁醇部位、西北沼委陵菜水相萃取部位，均具有较好的抗HIV-1病毒的效果。制备方法中，采用将西北沼委陵菜全草粉碎。超声波提取为常温下进行。过滤并回流提取是指：超声波提取后，过滤获得超声波提取液和滤渣，向滤渣中加质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取，得回流提取液，合并超声波提取液和回流提取提取液。回流提取的具体操作为：向回流加热装置中加入粉碎后的药材和乙醇溶液，加热、回流提取，放冷过滤得一次提取液和滤渣；向滤渣中加入乙醇溶液，加热、进行第二次回流提取，放冷过滤得二次提取液和滤渣（以上为回流提取2次）；合并多次提取液，即得回流提取提取液。优选的，每次回流提取0.5~2小时；每次回流提取时所加乙醇溶液没过药材表面1cm~2cm。回流提取的温度为乙醇回流提取的常规温度，需高于乙醇的沸点，优选为80℃~本文档来自技高网...

【技术保护点】
西北沼委陵菜抗HIV‑1病毒有效部位，其特征在于：选自西北沼委陵菜正丁醇部位或西北沼委陵菜水相萃取部位。

【技术特征摘要】
1.西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位，其特征在于：选自西北沼委陵菜正丁醇部位或西北沼委陵菜水相萃取部位。2.权利要求1 所述的西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将西北沼委陵菜粉碎，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏分散在蒸馏水中得浸膏分散液，然后依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，将所得正丁醇萃取液挥去正丁醇，得西北沼委陵菜正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液浓缩、干燥，得西北沼委陵菜水相萃取部位。3.根据权利要求2所述的西北沼委陵菜抗HIV-1病毒有效部位的制备方法，其特征在于：所述的提取为超声波辅助回流提取，超声波辅助回流提取的具体操作为：将粉碎后的西北沼委陵菜加入体积百分比浓度65%~95%...

【专利技术属性】
技术研发人员：林鹏程，胡秦，高世宝，
申请(专利权)人：青海民族大学，
类型：发明
国别省市：青海;63