一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒制造技术

技术编号:13758538 阅读:99 留言:0更新日期:2016-09-26 19:07
本实用新型专利技术属于分析检测技术领域,涉及一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒。其包含试剂盒盖、试剂盒以及置于试剂盒内的四个试剂瓶;所述的四个试剂瓶分别盛装检测缓冲液、酶溶液、底物液和标准品;所述检测缓冲液为NADPH和磷酸钾缓冲液;所述标准品为5μg/mL的人硫氧还蛋白和0.1%wt血清白蛋白混合液。与现有技术相比,本实用新型专利技术样本需求量少,特别适合血清、血浆检测,能非常专一地检测人血清或血浆硫氧还蛋白活性,线性范围宽;简化了检测操作步骤,更好地满足自动检测设备基本流程配置的需要,降低了因检测程序复杂引入的检测结果的离散性、提高检测结果的准确性。

【技术实现步骤摘要】

本技术属于分析检测
,具体来说,涉及到一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒
技术介绍
硫氧还蛋白存在于所有活细胞中,与细胞生长与存活密切相关。硫氧还蛋白也会分泌到细胞外,存在于血液及细胞外液中。该蛋白活性变化与许多疾病的发生发展有关。目前,硫氧还蛋白ELISA试剂盒,是以免疫学反应为基础,依靠抗原、抗体的特异性反应,检测硫氧还蛋白的蛋白水平。然而,硫氧还蛋白极易被体内的代谢物、中间产物修饰改变活性,组织和细胞中硫氧还蛋白的蛋白水平,不能确切地反映硫氧还蛋白的功能状态。此外,ELISA试剂盒有独特的组织特异性,实验中可能用到不同来源的样本,需要辨别哪种ELISA试剂盒能测手中的样本。至今,实验室研究中,硫氧还蛋白的测活方法主要有两种:胰岛素测活法(Luthman,Biochemistry 21:6628-6633;1982.)、终点法(Arner,Methods Enzymol 300:226-239.;1999.)及改良后的终点法(Wu,Y.Atherosclerosis 212:351-355;2010.)。胰岛素测活法,适合酶动力学研究,不适合大批量样本的测定。终点法及改良后的终点法,各实验室所用的条件及标准不尽相同,步骤较复杂,所测得的结果难以比较。
技术实现思路
为解决上述技术问题,本技术提供了一种高灵敏度、高效且使用简便的高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒。本技术所述的一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒,所述检测试剂盒包含试剂盒盖1、试剂盒3以及置于试剂盒内的四个试剂瓶2;所述的四个试剂瓶2分别盛装检测缓冲液、酶溶液、底物液和标准品;所述检测缓冲液为NADPH缓冲液;所述标准品为5μg/mL的人硫氧还蛋白和0.1%wt血清白蛋白混合液。所述的NADPH缓冲液为NADPH和磷酸钾缓冲液。本技术所述的一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒,所述 试剂瓶2为塑料瓶或EP管。本技术所述的一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒,所述血清白蛋白为人血清白蛋白或牛血清白蛋白。本技术所述的一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒,所述试剂盒盖1扣盖在试剂盒3上构成外部大小为10cm×10cm×3cm的立方体。本技术所述的一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒,盛装检测缓冲液、酶溶液、底物液和标准品的试剂瓶(2)的容量依次为2mL、100μL、1.7mL及200μL。与现有技术相比,本技术所述的高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒的样本需求量少,仅需20μL血清、血浆,特别适合血清、血浆检测,能非常专一地检测人血清或血浆硫氧还蛋白活性,标准曲线的线性范围在0-80ng;而且进一步简化了检测操作步骤,更好地满足自动检测设备基本流程配置的需要,进一步降低了因检测程序复杂引入的检测结果的离散性、提高检测结果的准确性。其解决了硫氧还蛋白活性检测试剂盒不适用于现行常用自动检测设备基本流程配置需要的问题,而且显著提高了检测灵敏度。附图说明图1:高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒组件示意图;试剂盒盖-1、试剂瓶-2、试剂盒-3。具体实施方式下面结合具体的实施例对本技术所述的高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒做进一步说明,但是本技术的保护范围并不限于此。实施例1一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒,包含试剂盒盖1、试剂盒3以及置于试剂盒内的四个试剂瓶2;所述的四个试剂瓶2分别盛装检测缓冲液、酶溶液、底物液和标准品;所述检测缓冲液为NADPH缓冲液,所述的NADPH缓冲液为2mM NADPH和250mM磷酸钾缓冲液(pH=7.5);所述酶溶液为5μM牛硫氧还蛋白还原酶溶液;所述底物液为10mg/mL牛胰岛素溶液;所述标准品为5μg/mL的人硫氧还蛋白(hTrx1)和0.1%wt人血清白蛋白混合液。所述试剂瓶2为塑料瓶。所述试剂盒盖1扣盖在试剂盒3上构成外部大小为10cm×10cm×3cm的立 方体。所述的检测缓冲液、酶溶液、底物液和标准品对应的试剂瓶2的容量以及盛装容量依次为2mL、100μL、1.7mL及200μL。与现有技术相比,本技术所述的高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒的样本需求量少,仅需20μl血清、血浆,特别适合血清、血浆检测,能非常专一地检测人血清或血浆硫氧还蛋白活性,标准曲线的线性范围在0-80ng;而且进一步简化了检测操作步骤,更好地满足自动检测设备基本流程配置的需要,进一步降低了因检测程序复杂引入的检测结果的离散性、提高检测结果的准确性。其解决了硫氧还蛋白活性检测试剂盒不适用于现行常用自动检测设备基本流程配置需要的问题,而且显著提高了检测灵敏度。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒包含试剂盒盖(1)、试剂盒(3)以及置于试剂盒内的四个试剂瓶(2);所述的四个试剂瓶(2)分别盛装检测缓冲液、酶溶液、底物液和标准品;所述检测缓冲液为NADPH缓冲液;所述标准品为5μg/mL的人硫氧还蛋白和0.1%wt血清白蛋白混合液。

【技术特征摘要】
1.一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒包含试剂盒盖(1)、试剂盒(3)以及置于试剂盒内的四个试剂瓶(2);所述的四个试剂瓶(2)分别盛装检测缓冲液、酶溶液、底物液和标准品;所述检测缓冲液为NADPH缓冲液;所述标准品为5μg/mL的人硫氧还蛋白和0.1%wt血清白蛋白混合液。2.根据权利要求1所述的一种高灵敏度的高通量硫氧还蛋白活性检测试剂盒,其特征在于,所述试剂瓶(2)为塑料瓶或EP管。3.根据权利要求1所述的一...

【专利技术属性】
技术研发人员:梁巍刘军杜澄
申请(专利权)人:北京中科研源科技发展有限公司
类型:新型
国别省市:北京;11

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