本发明专利技术公开了一种溶解血栓的纳豆激酶组合物及其制备方法，该组合物包括纳豆激酶、当归和淫羊藿组成；每g组合物中纳豆激酶的纤溶活性为200～400IU。其制备方法包括：1)利用产纳豆激酶的枯草杆菌制备纳豆激酶发酵液，离心，取上清液浓缩，得到纳豆激酶浓缩液；2)将淫羊藿加水提取，将提取液浓缩成淫羊藿浸膏；3)将当归加水提取，将提取液浓缩成当归浸膏；4)将淫羊藿浸膏、当归浸膏与纳豆激酶浓缩液混合，即得。本发明专利技术以纳豆激酶、当归和淫羊藿为原料，这三种组分发挥协同增效的作用，具有较好的预防血栓形成以及溶栓效果。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种药物组合物，具体涉及溶解血栓的纳豆激酶组合物及其制备方法。
技术介绍
血栓性疾病作为中老年人的高发病，是死亡威胁最大的疾病之一，目前60岁以上的老人已达到1亿以上，占人口比例的8.7％，今后20年我国将进入老龄化社会，血栓性疾病的防治必须引起足够的重视。全世界现有血栓塞病人约1500万，所需的溶栓药的潜在市场价值约20亿美元。国内市场上普遍使用的溶栓类药物链激酶、尿激酶、组织型纤溶酶原激活剂等都存在明显的不足：抗再灌注、产生再栓塞和出血性副作用，且价格昂贵。纳豆激酶(Nattokinase,NK)是一种枯草杆菌蛋白激酶，是在纳豆发酵过程中由纳豆枯草杆菌产生的一种丝氨酸蛋白酶，具有溶解血栓、降低血粘度，改善血液循环，软化和增加血管弹性等作用。纳豆激酶是1987年由日本生理学教授须见洋行博士从200多种食品中首先发现并命名的一种分子量远远小于UK、SK、tPA的蛋白质，等电点是8.7，分子量为27724，具有很强的纤维蛋白溶解能力，并具有活化弹性酶和尿酸酶的活性，在此之后的相关研究表明，纳豆激酶能够有效清除人体血液内的血栓，是目前溶栓活力最高的蛋白酶，而且对高血压、衰老、中风、肌肉痉挛和心脑血管疾病也有很好的疗效，已被用作溶栓药物。并且，纳豆激酶来源于日本传统的食物纳豆，安全性好，同时可由肠道吸收，在体内作用持续时间长，最重要的一点是它还能激活人体内重组型纤溶酶激活剂，使之温和、持续地提高血液的纤溶活性，因此，近年来，以纳豆激酶为主要成分的药品、功能性食品、食品添加剂的研发工作进展十分迅速。对于纳豆激酶产品的应用，营养专家建议每日服用的预防量为1500～2000IU，然而这一用量也将带来较高的成本，使得血栓患者的经济负担较重。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种溶解血栓的纳豆激酶组合物及其制备方法。本专利技术提供的技术方案是溶解血栓的纳豆激酶组合物，该组合物包括纳豆激酶、当归、淫羊藿组成；每g组合物中纳豆激酶的纤溶活性为200～400IU。上述纳豆激酶可以是由产纳豆激酶的枯草杆菌的发酵液，也可以是纳豆激酶冻干粉。淫羊藿苷为淫羊藿的主要成分，在该组合物中淫羊藿苷的含量为0.03～0.04mg/g。阿魏酸为当归的主要成分，在该组合物中阿魏酸的含量为0.02～0.03mg/g。本专利技术还提供了上述溶解血栓的纳豆激酶组合物的制备方法，包括以下步骤：1)利用产纳豆激酶的枯草杆菌制备纳豆激酶发酵液，离心，取上清液浓缩，得到纳豆激酶浓缩液；2)将淫羊藿加水提取，将提取液浓缩成淫羊藿浸膏；3)将当归加水提取，将提取液浓缩成当归浸膏；4)将淫羊藿浸膏、当归浸膏与纳豆激酶浓缩液混合，即得。本专利技术的纳豆激酶来自能够产纳豆激酶的枯草杆菌的发酵产物，枯草杆菌作为一种益生菌，市场上可以直接购买，例如Bacillus Subtilis AK(PN 2003-210136，FERM P-182391JP),Bacillus Subtilis MR141(PN 08-154616，FERM P-14692JP)，Bacillus Subtilis IAM1026(PN 5486467，FERM BP-6713US)等，这些菌种在发酵过程中除能产生纳豆激酶外，各级代谢产物均含有对人体有益的成分，因此都可以作为本专利技术的菌种。本专利技术优选纳豆杆菌，其能够通过固体或液体基质发酵产生高效纤溶活性的纳豆激酶。根据选定的菌种，选择其适当的培养条件进行发酵培养，其中，可以选用固体发酵法，把菌种制成菌悬液，接种到固体培养基中，在适宜的条件下进行培养，发酵结束后将发酵产生的的纳豆激酶溶解提取出来得到发酵液，将发酵液离心，上清液浓缩，得到浓缩液。由于固体发酵法为常规方法，本专利技术在此处就不做详细说明。也可以采用液体发酵法，其具体工艺如下：1)选用纳豆激酶高产菌株，直接在平板上进行分离筛选，分离平板优选LB-琼脂糖-纤维蛋白平板：LB培养基配制时用0.01M磷酸钾缓冲液(PB pH7.4)溶解，制作平板时，将人血纤维蛋白原和凝血酶溶解于其中，其制作方法同琼脂糖-纤维蛋白平板。2)根据所选用的不同菌种的最佳培养条件，所用到的发酵培养基中的氮源、碳源和无机盐可以进行选择，氮源可以选择大豆蛋白胨、胰蛋白胨、酵母粉、酪蛋白酸水解物以及干大豆粉末等中的一种或多种，使用的质量浓度为0.5～4％左右；碳源可以是葡萄糖、木糖、可溶性淀粉、麦芽糖、乳糖和蔗糖中的一种或多种，其质量浓度优选在1.0～10.0％左右；无机盐可以选择KH2PO4约0.2％、K2HPO4约0.4％、MgSO4约0.05％、CaCl2约0.02％等。根据本专利技术优选的方法，使用纳豆杆菌进行发酵制备种子液，发酵至OD＝0.3～1.0，以1.0～2.0％左右的接种量进行液体深层发酵，发酵温度25～40℃，发酵周期12～35小时，pH为6～8。作为优选，纳豆激酶组合物的制备方法为：1)利用产纳豆激酶的枯草杆菌制备纳豆激酶发酵液，以3000～6000rpm离心，取上清液浓缩，得到纳豆激酶浓缩液；2)将淫羊藿加水提取，将提取液浓缩成60℃下相对密度为1.10～1.20的淫羊藿浸膏；3)将当归加水提取，将提取液浓缩成60℃下相对密度为1.20～1.45的当归浸膏；4)将淫羊藿浸膏、当归浸膏与纳豆激酶浓缩液混合，即得。纳豆激酶发酵液要进行离心，转速以3000～6000rpm为优，可除去发酵液中的大部分菌体和杂质。由于纳豆激酶为热敏性物质，浓缩一般选用常温超滤浓缩，超滤膜的截留分子量为50000～200000，超滤压力为0.1～0.3MPa，截留率≥90％，浓缩倍数视发酵液中纳豆激酶的纤溶活性而定。纳豆激酶组合物的制备方法还可以是：1)利用产纳豆激酶的枯草杆菌制备纳豆激酶发酵液，以3000～6000rpm离心，取上清液浓缩，真空冷冻干燥，得到纳豆激酶冻干粉；2)将淫羊藿加水提取，将提取液浓缩成60℃下相对密度为1～1.20的浸膏，干燥，得到淫羊藿干粉；3)将当归加水提取，将提取液浓缩成60℃下相对密度为1.20～1.45的浸膏，干燥，得到当归干粉；4)将淫羊藿干粉、当归干粉与纳豆激酶冻干粉混合，即得。本专利技术的组合物可以包括药学可接受的辅料，按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任何常规剂型，包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂等。药学可接受的辅料包括填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000，PEG4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料(范碧亭《中药本文档来自技高网...
【技术保护点】
溶解血栓的纳豆激酶组合物，其特征在于：该组合物包括纳豆激酶、当归和淫羊藿组成；每g组合物中纳豆激酶的纤溶活性为200～400IU。
【技术特征摘要】
1.溶解血栓的纳豆激酶组合物，其特征在于：该组合物包括纳豆激酶、当归和淫羊藿组成；每g组合物中纳豆激酶的纤溶活性为200～400IU。2.根据权利要求1所述的溶解血栓的纳豆激酶组合物，其特征在于：该组合物中淫羊藿苷的含量为0.03～0.04mg/g。3.根据权利要求1所述的溶解血栓的纳豆激酶组合物，其特征在于：该组合物中阿魏酸的含量为0.02～0.03mg/g。4.权利要求1～3中任一项所述的溶解血栓的纳豆激酶组合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)利用产纳豆激酶的枯草杆菌制备纳豆激酶发酵液，离心，取上清液浓缩，得到纳豆激酶浓缩液；2)将淫羊藿加水提取，将提取液浓缩成淫羊藿浸膏；3)将当归加水提取，将提取液浓缩成当归浸膏；4)将淫羊藿浸膏、当归浸膏与纳豆激酶浓缩液混合，即得。5.根据权利要求4所述的溶解血栓的纳豆激酶组合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)利用产纳豆激酶的枯草杆菌制备纳豆激酶发酵液，以3000...
【专利技术属性】
技术研发人员：方捷，方鹏程，康萍，
申请(专利权)人：方捷，方鹏程，康萍，
类型：发明
国别省市：广西;45
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