一种新的吲哚生物碱类化合物及其制备方法和医药用途技术

本发明专利技术公开了一种新的吲哚生物碱类化合物及其制备方法和医药用途。该化合物为首次报道，是一种结构新颖的吲哚生物碱类化合物，可以从延胡索的干燥块根中提取、分离纯化得到。体外试验证明该化合物能够抑制肾癌细胞株RC‑2增殖，这种抑制呈浓度及时间依赖性，可以用来开发成治疗肾癌的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物
，具体涉及从延胡索的干燥块根中分离得到的一种具有治疗肾癌作用的吲哚生物碱类化合物及其制备方法。
技术介绍
延胡索为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W. T. Wang的干燥块茎，是一味古老的止痛良药，又称玄胡、元胡，为著名的浙八味之一，主产浙江省东阳、磐安一带。延胡索具有显著的镇痛、镇静和催眠作用，对冠心病、心律失常、胃溃疡等多种疾病有较好的临床效果。正因为延胡索效果显著，临床应用广泛，在《中国药典》2010年版中，接近30%的复方制剂中使用了延胡索。延胡索主要成分为生物碱，主要为叔胺、季胺类生物碱。叔胺类生物碱在原药材中的量约为0.65%，季铵类生物碱（如延胡索甲素、乙素）约为0.3%。到目前为止，从延胡索中分离得到的生物碱类成分约有30种。从延胡索的块茎中共提出生物碱10余种，其中经鉴定的有紫堇碱（Corydaline）、dl-四氢掌叶防己碱（dl-Tetrahydropalmatine）、原阿片碱（Protopine）、L-四氢黄连碱、dl-四氢黄连碱、L-四氢非洲防己碱、紫堇鳞茎碱（Corybulbine）、β-高白屈菜碱（β-Homoche-lidonine）、黄连碱（Coptisine）、去氢紫堇碱（De-hydrocorydaline），还有紫堇达明碱（Corydalmine即紫堇鳞茎碱）、去氢紫堇达明碱等。除生物碱外，延胡索中尚含有大量淀粉，少量黏液质、树脂、挥发油，另含无机微量元素。还含有多糖、羟链霉素（reticulin）、豆甾醇、谷甾醇、油酸、亚油酸、亚麻酸、延胡索酸、10-二十九碳醇等。延胡索中的生物碱具有很强的镇痛、镇静、降压和抗心律失常作用。目前，很多新的研究表明，延胡索还具有其他广泛的生理活性，如抗心肌缺血、抗实验性胃溃疡、抗肿瘤、抗氧化、保肝等。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从延胡索的干燥块根中分离得到的一种具有治疗肾癌作用的吲哚生物碱类化合物及其制备方法。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：具有下述结构式的化合物（Ⅰ），。所述的化合物（Ⅰ）的制备方法，包含以下操作步骤：（a）延胡索的干燥块根粉碎，用80~90%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b）步骤（a）中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱12个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c）步骤（b）中75%乙醇洗脱物浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、55:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d）步骤（c）中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、15:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e）步骤（d）中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为80%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（Ⅰ）。进一步地，步骤（a）中，用85%乙醇热回流提取，合并提取液。进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。一种药物组合物，该药物组合物含有治疗有效量的权利要求1所述的化合物（Ⅰ）和药学上可接受的载体。所述的化合物（Ⅰ）在制备治疗肾癌的药物中的应用。所述的药物组合物在制备治疗肾癌的药物中的应用。本专利技术化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有治疗有效量的本专利技术化合物（Ⅰ），其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本专利技术药物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限定本专利技术保护范围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。实施例1：化合物（Ⅰ）分离制备及结构确证试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。制备方法：（a）将延胡索的干燥块根（5kg）粉碎，用85%乙醇热回流提取（25L×3次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L），依次用石油醚（3L×3次）、乙酸乙酯（3L×3次）和水饱和的正丁醇（3L×3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（347g）和正丁醇萃取物；（b）步骤（a）中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱12个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏（131g）；（c）步骤（b）中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1（8个柱体积）、55:1（8个柱体积）、35:1（6个柱体积）、15:1（8个柱体积）和1:1（5个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d）步骤（c）中组分4（29g）用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1（8个柱体积）、15:1（10个柱体积）和10:1（6个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e）步骤（d）中组分2（11g）用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为80%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（Ⅰ）（278mg）。结构确证：黄色油状物，HR-ESIMS显示[M+H]+为m/z 337.1863，结合核磁特征可得分子式为C21H24N2O2，不饱和度为11。核磁共振氢谱数据δH（ppm，CDCl3，500MHz）：H-3（4.03，m），H-5（3.47，d，J=6.9Hz），H-6a（3.38，dd，J=16.1，6.9Hz），H-6b（2.63，d，J=16.1Hz），H-9（7.49，d，J=8.2Hz），H-10（7.13，td，J=8.2，1.3Hz），H-11（7.23，td，J=8.2，1.3Hz），H-12（7.31，d，J=8.2Hz），H-14a（2.73，d，J=13.2Hz），H-14b（1.82，d，J=13.2Hz），H-17a（4.34，d，J=12.8Hz），H-17b（4.21，d，J=12.8Hz），H-18（2.14，s），H-20（2.86，d，J=3.1Hz），H-21a（3.74，dd，J=12.4，3.1Hz），H-21b（4.06，d，J=12.4Hz），N1-Me（3.66，s），N4-Me（2.28，s）；核磁共振碳谱数据δC（ppm，CDCl3，125MHz）：134.8（C，2-C），53.7（CH，3-C），63.4（CH，5-C），23.9（CH2，6-本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下述结构式的化合物（Ⅰ），。

【技术特征摘要】
1.具有下述结构式的化合物（Ⅰ），。2.权利要求1所述的化合物（Ⅰ）的制备方法，其特征在于包含以下操作步骤：（a）将延胡索的干燥块根粉碎，用80~90%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b）步骤（a）中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱12个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c）步骤（b）中75%乙醇洗脱物浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、55:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d）步骤（c）中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为2...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐珍，
申请(专利权)人：苏州毕诺佳医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32