【技术实现步骤摘要】
201610355291
【技术保护点】
一种基于超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体联合普鲁士蓝染色的免疫层析试纸条，所述试纸条组成包括底板、吸水纸、硝酸纤维膜、结合垫、样品垫，所述底板上粘贴硝酸纤维膜，硝酸纤维膜的一端连接吸水纸、另一端粘贴结合垫，所述结合垫上搭接样品垫，硝酸纤维膜上设有一条包被有羊抗鼠IgG抗体的质控线C线，其特征在于，所述硝酸纤维膜上还设有一条与所述质控线C线平行的包被有单克隆检测抗体的检测线T线，所述结合垫为固定有超顺磁性氧化铁纳米颗粒聚集体偶联单克隆捕获抗体免疫探针的玻璃纤维膜。
【技术特征摘要】
1.一种基于超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体联合普鲁士蓝染色的免疫层析试纸条，所述试纸条组成包括底板、吸水纸、硝酸纤维膜、结合垫、样品垫，所述底板上粘贴硝酸纤维膜，硝酸纤维膜的一端连接吸水纸、另一端粘贴结合垫，所述结合垫上搭接样品垫，硝酸纤维膜上设有一条包被有羊抗鼠IgG抗体的质控线C线，其特征在于，所述硝酸纤维膜上还设有一条与所述质控线C线平行的包被有单克隆检测抗体的检测线T线，所述结合垫为固定有超顺磁性氧化铁纳米颗粒聚集体偶联单克隆捕获抗体免疫探针的玻璃纤维膜。2.根据权利要求1所述的一种基于超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体联合普鲁士蓝染色的免疫层析试纸条，其特征在于，所述试纸条还可以与普鲁士蓝染液联合使用，样品加入后，将普鲁士蓝染液加入到质控线C线、检测线T线上；所述的普鲁士蓝染液是质量浓度为1-10％的亚铁氰化钾水溶液和5-20％的盐酸的等体积混合物。3.根据权利要求1所述的一种基于超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体联合普鲁士蓝染色的免疫层析试纸条，其特征在于，所述超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体为表面带羧基的氧化铁纳米颗粒聚集体，所述纳米颗粒聚集体表面有柠檬酸三钠。4.根据权利要求1所述的一种基于超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体联合普鲁士蓝染色的免疫层析试纸条，其特征在于，所述单克隆捕获抗体为抗hCG单克隆捕获抗体或心肌肌钙蛋白I捕获抗体；所述单克隆检测抗体为抗hCG单克隆检测抗体或心肌肌钙蛋白I检测抗体。5.一种基于超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体联合普鲁士蓝染色的免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)以氯化高铁、柠檬酸三钠、乙酸钠为原料，乙二醇为溶剂，通过溶剂热法制备表面带有羧基的超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体；(2)将步骤(1)中制备的超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体表面羧基用碳化二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺活化，再与单克隆捕获抗体进行偶联，最后加入BSA封闭，磁分离后重悬备用，制得免疫探针；(3)用喷膜划线设备将步骤(2)中制备的免疫探针固定在结合垫上，并预处理样品垫；(4)采用喷膜划线设备将单克隆检测抗体、羊抗鼠IgG抗体包被在硝酸纤维膜上；(5)在试纸条底板上粘贴硝酸纤维膜，硝酸纤维膜的一端连接吸水纸、另一端连接结合垫，样品垫搭在结合垫上，两端交错。6.根据权利要求6所述的一种基于超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体联合普鲁士蓝染色的免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)称取氯化高铁、柠檬酸三钠、乙酸钠溶于乙二醇中，其中氯化高铁、柠檬酸三钠、乙酸钠的质量比为0.6～3.0∶1～4∶3～9，氯化高铁与乙二醇的质量体积比为0.6g～3.0g∶
\t50mL～100mL，将上述溶液倒入聚四氟乙烯内衬的反应釜中，100～250℃条件下，反应8～24h，然后分别用乙醇、纯水清洗，并保存在超纯水中，按照铁含量，定容到5mg/mL，4℃放置，制得表面带有羧基的超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体；(2)取步骤(1)制备的超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体加入超纯水中，其浓度按铁含量记为0.1～10mg/mL；再加入EDC/NHS，其中Fe∶EDC∶NHS质量比为1∶0.1～10∶0.1～10，混合溶液放入空气浴恒温摇床中控制温度为0～50℃、转速为50～220rpm，反应10min～1h，磁分离，得到活化后的超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体；按照单克隆捕获抗体与活化后的超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体质量比0.01～0.500∶1，将单克隆捕获抗体与活化后的超顺磁氧化铁纳米颗粒聚集体混合加入偶联缓冲液中，并将其置于空气浴恒温摇床中控制温度为0～50℃、转速为50～...
【专利技术属性】
技术研发人员：张宇，陈艳华，娄豆豆，蔡奕康，韩国志，王建国，
申请(专利权)人：南京东纳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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