一种茯苓三萜类化合物的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种茯苓三萜类化合物的检测方法，该方法包括以下步骤：(1)超声提取；(2)用有机溶剂对步骤(1)得到的蒸干物质进行萃取数次，合并有机层，蒸干后，再用醇溶解，使用0.22μm有机膜滤过，取续滤液注入高效液相色谱仪进行检测。本发明专利技术所述方法具有较高的灵敏度、精密度和准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及药物化合物检测领域。具体设及一种药物的检测方法，尤其设及一种 食品或药品中巧等Ξ祗类化合物的检测方法。
技术介绍
巧等为多孔菌科真菌化ria cocos(Schw. )Wolf的干燥菌核，性平，味甘、淡，归屯、、 肺、脾、肾经，是一味常用的利水渗湿、健脾和胃、宁屯、安神的中药。常用于水肿尿少、疲饮眩 惇、脾虚食少、便漉泄泻、屯、神不安、惊惇失眠等病症的治疗。现代药理学研究表明，巧等具 有抑制肿瘤、抗炎、抗衰老、调节免疫功能、保肝等多方面的药理作用，在临床上应用广泛， 且效果显著。自70年代W来，中外学者从巧等中分离出了多种Ξ祗化合物，并对其药理作 用、生物活性等方面进行了研究。运些药理研究表明，巧等中所含的Ξ祗类化合物具有明显 的抗肿瘤、抗炎和免疫调节作用，是巧等的重要有效成分 此外，CN105085598A公开了，巧等Ξ祗中的巧等酸(pachymic acid)及去氨巧等酸 (dehydropachymic acid)、上莫酉《（tumulosic acid)、去氨上莫酉《（dehydrotumulosic acid)、猪等酸C(polyporenic acid C)、W及3-表-去氨±莫酸（3-邱i-dehy化otumulosic acid)为巧等Ξ祗中的主要成分，也是主要活性物质，具有利尿、抗氧化、抗癌症、抗发炎、抗 高血糖、调节免疫等功效;CN103665679A公开了 一种巧等酸单体的分离纯化方法，其虽然W 巧等为原料，并通过提取、萃取、结晶得到巧等酸单体，但其仅仅得到一种巧等Ξ祗化合物， 对其它巧等Ξ祗化合物如何检测或分离，并未提及。随着巧等Ξ祗的功效被人们广泛认可， 越来越多的食品或药品中添加了巧等Ξ祗类物质，探索建立有效检测食品或药品中巧等Ξ 祗类化合物含量的新方法对于食品或者药品原料的监测具有更加重要的意义。 巧等S祗中的巧等酸（pachymic acid)及去氨巧等酸（dehy化opachymic acid)、 上莫酉《（tumulosic acid)、去氨上莫酉《（dehydrotumulosic acid)、猪等酉《C(polyporenic acid C)、W及3-表-去氨±莫酸(3-epi-dehy化otumulosic acid)如下所示：
技术实现思路
本专利技术的目的是针对目前无法全面、有效、准确地对食品或药品中巧等Ξ祗类主 要活性物质含量检测方法的不足，提供了一种检测方法，该方法简单，易于操作，能够全面、 有效、准确地对食品或者药品中巧等Ξ祗类主要活性物质的含量进行检测，从而为巧等Ξ 祗类化合物在食品中或者药品中的规模化使用提供了技术支持。 本专利技术的目的在于提供了一种巧等Ξ祗类化合物的检测方法。 为解决上述技术问题，本专利技术采用下述技术方案： -种食品或药品中巧等Ξ祗类化合物的检测方法，该方法包括W下步骤： (1)超声提取； (2)利用有机溶剂对步骤(1)的产物进行萃取，并用醇溶解； (3)对步骤(2)醇溶液进行高效液相色谱检测。 优选地，步骤(1)包括下述步骤:称取待测样品，粉碎后配制成样品醇溶液，密塞超 声提取，过滤，再将滤液蒸干;其中，所述粉碎后过的筛网为60目W上;所述超声提取次数为 2~3次，每次20~40min;所述每次使用醇提取的量为样品质量的25~35倍。 优选地，步骤(2)包括下述步骤：用有机溶剂对步骤（1)得到的蒸干物质进行萃取 数次，合并有机层，蒸干后，再使用醇溶解;其中，所述使用有机溶剂萃取次数为3次W上，每 次有机溶剂的用量为样品质量的15~25倍;所述蒸干后溶解所需醇的量为4~6mL。 优选地，步骤(3)包括下述步骤:取步骤(2)醇溶液进行高效液相色谱检测；其中， 高效液相色谱的检测条件为:采用C18液相色谱柱，流动相由A相和B相组成，进行梯度洗脱， 使用PDA二极管阵列检测器进行检测，其中所述A相为色谱乙腊，B相为含有体积分数0.05 % ~0.5 %的憐酸水溶液，检测波长为210nm和24化m，柱溫为20~40°C，流速为1.7mL/min，所 述梯度洗脱的条件为:〇~33min，流动相A相的体积分数保持为51%，B相的体积分数保持为 49% ; 33~45min，流动相A相的体积分数由51 %升为54%，流动相B相的体积分数由49%降 至46% ;45~51min，流动相A相的体积分数由54%继续升为100%，流动相B相的体积分数由 4 6 %降至0 % ; 51~5 5 m i η，流动相A相的体积分数保持10 0 %，流动相B相的体积分数保持 0% ; 55~55.5min，流动相A相的体积分数由100%降至51 %，流动相B相的体积分数由0%升 至54% ;55.5~60min，流动相A相的体积分数保持51%，流动相財目的体积分数保持54%。 更优选地，所述检测方法包括下述步骤： (1)称取待测样品，粉碎后配制成样品醇溶液，密塞超声提取，过滤，再将滤液蒸 干;其中，所述粉碎后过的筛网为60目W上;所述超声提取次数为2~3次，每次20~40min; 所述每次使用醇提取的量为样品质量的25~35倍； (2)用有机溶剂对步骤(1)得到的蒸干物质进行萃取数次，合并有机层，蒸干后，再 使用醇溶解;其中，所述使用有机溶剂萃取次数为3次W上，每次有机溶剂的用量为样品质 量的15~25倍;所述蒸干后溶解所需醇的量为4~6n止； (3)取步骤(2)醇溶液进行高效液相色谱检测;其中，高效液相色谱的检测条件为： 采用C18液相色谱柱，流动相由A相和財目组成，进行梯度洗脱，使用PDA二极管阵列检测器进 行检测，其中所述A相为色谱乙腊，B相为含有体积分数0.05%~0.5%的憐酸水溶液，检测 波长为210nm和24化m，柱溫为20~40°C，流速为1.7mL/min，所述梯度洗脱的条件为：0~ 33min，流动相A相的体积分数保持为51 %，B相的体积分数保持为49% ; 33~45min，流动相A 相的体积分数由51 %升为54%，流动相B相的体积分数由49%降至46% ;45~51min，流动相 A相的体积分数由54%继续升为100%，流动相B相的体积分数由46%降至0% ; 51~55min， 流动相A相的体积分数保持100%，流动相B相的体积分数保持0% ; 55~55.5min，流动相A相 的体积分数由100%降至51 %，流动相B相的体积分数由0%升至54% ; 55.5~60min，流动相 A相的体积分数保持51 %，流动相B相的体积分数保持54%。 所述的巧等Ξ祗类化合物主要是起主要药理作用的巧等Ξ祗类物质，分别为：巧 等酸（pachymic acid，PA)及去氨巧等酸（dehy化opachymic acid，DPA)、±莫酸（tumulosic 曰。1(1，了4)、去氨±莫酸（(16117(11'〇1:加1111〇3；1；[03。1(1〔， PAC)、W及3-表-去氨±莫酸（3-epi-dehy化otumulosic acid，EDA)。 所述的巧等Ξ祗类化合物的保留时间为：PA为52.17min、DPA为52.57min、TA为 25.47min、DTA为29.07min、PAC为41.98m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种茯苓三萜类化合物的检测方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)超声提取；(2)利用有机溶剂对步骤(1)的产物进行萃取，并用醇溶解；(3)对步骤(2)醇溶液进行高效液相色谱检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王昭日，杨胜杰，刘明川，张小琴，刘敏，凌赟，林汉钦，
申请(专利权)人：杏辉天力杭州药业有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33