本发明专利技术公开了一种具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物的指纹图谱检测方法及其原料药材检测方法，该方法包括供试品溶液的制备、对照指纹图谱的建立和供试液指纹图谱的测定。本发明专利技术通过大量实验筛选出最佳的流动相组成，梯度洗脱程序，检测波长、色谱柱，柱温等分析条件，经多次实验验证，本发明专利技术提供的指纹图谱检测方法，可以全面、客观、准确的检测和评价该中药组合物的质量，可以从源头上保证该中药组合物的安全性和有效性，保证临床疗效。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种中药制剂的质检方法，具体涉及一种具有防治感冒及急、慢性气 管炎功效的中药组合物及其原料药材的指纹图谱检测方法。
技术介绍
中国专利ZL02129192. 6公开了一种具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药 组合物及其制备方法，由羚羊角、平贝母、大黄、黄芩、生石膏、人工牛黄、青礞石和甘草制 成。该中药组合物由江苏康缘药业股份有限公司生产，临床具有清热解毒，祛痰止咳的功 效，用于小儿急性支气管炎符合痰热咳嗽者，表现为发热、咳嗽、咳吐黄痰、咳吐不爽、舌质 红、苔黄腻等。 目前，上述中药组合物的质量标准规定了个别化合物的鉴别和检测，检测工作繁 琐，检测效率低，且检测的活性成分数量有限，不能很好的反应制剂的整体质量。 因此，为了更全面、有效的控制该中药组合物的质量，让临床用药安全及疗效更加 有所保证，很有必要研究设计出一种能客观、准确，全面检测该中药组合物质量的指纹图谱 测定方法。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术的目的是解决现有技术的不足，提供一种具有防治感冒及急、慢 性气管炎功效的中药组合物的指纹图谱检测方法及其原料药材的质量检测方法，该检测方 法可以客观、全面、准确的评价中药组合物的质量，对控制中药组合物及原料药材的质量、 保证临床疗效具有重要意义。 技术方案：为了实现以上技术目的，本专利技术采取的技术方案为： 具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物的指纹图谱检测方法，其包括 以下步骤： (1)供试品溶液制备：取中药组合物，加乙醇超声提取，提取液在1500~3000转/ 分钟，离心，取离心液用微孔滤膜滤过，得到供试品溶液；优选用50%体积浓度的乙醇超声 提取2次，每次30~60分钟； (2)高效液相色谱法测定对照指纹图谱：取10批以上中药组合物供试品在适当的 色谱条件下进样，测得各批次中药组合物的指纹图谱，以这些指纹图谱为基础，用中药色谱 指纹图谱相似度评价系统，计算获得共有模式作为对照指纹图谱； (3)高效液相色谱法测定供试品溶液指纹图谱：取步骤（1)中供试品溶液按步骤 (2)相同的色谱条件进样，测得供试品溶液的指纹图谱； (4)将步骤（3)得到的供试品溶液指纹图谱和步骤⑵得到的对照指纹图谱用中 药色谱指纹图谱相似度评价系统进行评价，相似度大于〇. 9。 作为优选方案，以上所述的具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物的 指纹图谱检测方法，步骤（4)中用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A)评价17个共 有指纹峰，其中10号峰为黄芩苷，设为参照峰。 作为优选方案，骤（2)和步骤（3)中色谱条件为：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅 胶为填充剂；流动相：A相为1~2%。磷酸水溶液或1~2%。醋酸水溶性，B相为乙腈或甲醇， 梯度洗脱，流动相流速为〇. 8~lml/min ;检测波长为280~300nm ;柱温为25~45°C。 作为更加优选方案，以上所述的具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合 物的指纹图谱检测方法，步骤（2)和步骤（3)中色谱条件为：色谱柱：以十八烷基硅烷键合 硅胶为填充剂；流动相：A相为1%。磷酸水溶液，B相为乙腈，梯度洗脱，流动相流速为lml/ min ;检测波长为280nm ;柱温为30°C。 作为更优选方案，色谱柱选用phenomenex Luna C1S4. 6X 250mm，5 μ m的色谱柱。 作为优选方案，以上所述的具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物的 指纹图谱检测方法，所述的梯度洗脱方式如下表所示： 本专利技术精密称定黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含200μ g的溶液，按以上优选 的色谱条件进行高效液相色谱分析，和以上指纹图谱的10号峰具有相同的保留时间。本发 明选用10号峰即黄芩苷为参照峰。 作为优选方案，所述的具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物由下列 重量份数原料制成： 羚羊角8~12份、人工牛黄8~12份、平贝母12~20份、大黄20~35份、黄芩 10~18份、生石霄15~25份、青朦石10~18份和甘草20~35份。 上述原料按照中国专利ZL02129192. 6中所公开的制备方法制成口服制剂。 本专利技术提供的具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物的原料药材的检 测方法，其包括以下步骤： (1)供试品溶液制备：分别取处方中羚羊角、人工牛黄、平贝母、大黄、黄芩、生石 膏和青礞石原料药材各0. 5g，分别精密加50 %乙醇25ml，超声提取30min，然后1500~ 2000转/分钟，离心，取离心液作为供试品溶液； (2)分别取处方中的羚羊角、人工牛黄、平贝母、大黄、黄苳、生石膏和青礞石原料 药材的供试品溶液，按以下色谱条件进行高效液相色谱法测定； 步骤（2)和步骤（3)中色谱条件为：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 (优选用口1^11〇111611611^11^(]184.6\25〇111111，5以1]1的色谱柱）；流动相 ：4相为1~2%。磷酸水 溶液或1~2%。醋酸水溶性，B相为乙腈或甲醇，梯度洗脱，流动相流速为0. 8~lml/min ; 检测波长为280~300nm ;柱温为25~45°C。 梯度洗脱方式如下表所示： (3)取原料药材成分色谱图和上述中药组合物的对照指纹图谱相比，大黄供试品 溶液中含有1、2、4、9、14、16、17号峰成分；人工牛黄供试品溶液中含有5号峰，甘草供试品 溶液中含有7、8、11号峰；黄芩供试品溶液中含有6、9、10、12、13号峰。3号峰来源于羚羊 角。15号峰为共煎煮产生的化合物峰。 作为优选方案，以上色谱条件为：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（优 选用口11611〇111611611^11^(] 184.6\25〇111111，5以1]1的色谱柱）；流动相：4相为1%。磷酸水溶液，13 相为乙腈，梯度洗脱，流动相流速为lml/min ;检测波长为280nm ;柱温为30°C ; 本专利技术所述的具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物的指纹图谱检测 方法在评价该中药组合物成品质量中的应用。 本专利技术所述的具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物原料药材检测方 法在评价该中药组合物的原料药材质量中的应用。 本专利技术将供试品指纹图谱与对照指纹图谱经计算机相似度评价软件（选用中国 药典委推荐的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"）计算，获得指纹图谱相似度 数值，依据相似度数值，应用于具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物的质量控 制，以指纹图谱相似度应大于〇. 90为检验质控标准；本专利技术提供的具有防治感冒及急、慢 性气管炎功效的中药组合物指纹图谱检测方法及其原料药材检测方法，用于生产检验，质 量控制，所得产品具有较高的质量稳定性，可确保产品安全有效。 本专利技术提供的一种中药组合物的指纹图谱检测方法的最佳条件筛选过程： 1、仪器与试剂 AgilentllOO液相色谱仪；MWD多波长紫外一可见检测器，G1313A全自动进样器， Agilent LC色谱工作站。 试剂：乙腈，色谱纯；其他试剂均为分析纯。 2、流动相种类的筛选 由于本专利技术所述中药组合物活性成分复杂，本专利技术通过大量实验筛选了甲醇一 水，乙腈一水，甲醇一磷酸水溶液，乙腈一本文档来自技高网...
【技术保护点】
具有防治感冒及急、慢性气管炎功效的中药组合物的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)供试品溶液制备：取中药组合物，加乙醇超声提取，取提取液在1500～3000转/分钟，离心，取离心液用微孔滤膜滤过，得到供试品溶液；(2)高效液相色谱法测定对照指纹图谱：取10批以上中药组合物按步骤(1)方法制备得到供试品，在适当的色谱条件下进样，测得各批次中药组合物的指纹图谱，以这些指纹图谱为基础，用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，计算获得共有模式作为对照指纹图谱；(3)高效液相色谱法测定供试品溶液指纹图谱：取步骤(1)制备的供试品溶液按步骤(2)相同的色谱条件进样，测得供试品溶液的指纹图谱；(4)将步骤(3)得到的供试品溶液指纹图谱和步骤(2)得到的对照指纹图谱用中药色谱指纹图谱相似度评价系统评价，相似度大于0.9。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：萧伟，胡军华，林夏，章晨峰，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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