一种新的单萜类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种单萜类化合物，其结构式为该化合物的分子式为C12H18O4，其不饱和度为4，紫外光谱显示该化合物紫外最大吸收在203nm。发明专利技术还涉及该化合物的提取分离方法，利用乙酸乙酯进行萃取，并将萃取液分离、纯化，得到本发明专利技术单体化合物。该化合物对抗真菌的活性作用，为开发抗真菌的药物提供了先导化合物，对开发天然产物和植物药的新用途具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于有机化合物
，具体涉及一种新的单萜类化合物及其制备方法和应用。
技术介绍
西藏大花黄牡丹(Paeonialudlowii)为毛茛科(Ranunculacea)，芍药属(Paeonia)，牡丹组(Sect.MoutanDC.)植物。仅生长在我国西藏的米林、林芝、波密、察隅、隆子等县的海拔2500～3500m的雅鲁藏布江开阔河谷及山坡林缘灌丛中，数量极少，且呈逐年减少趋势，属于西藏特有的濒临灭绝的保护植物。据当地地方志记载，藏民早在几百年前就已经使用西藏大花黄牡丹根皮治疗妇科疾病、心脑血管疾病、皮肤癣菌病等。目前，对大花黄牡丹根皮的药用效果已经有相关研究，但由于大花黄牡丹根皮中化学成分多种多样，对于其活性成分的研究还未见有相关报道，申请人利用正相硅胶柱色谱、反相(MCI-Gel)柱色谱、凝胶(SephadexLH-20)柱色谱、高效液相色谱等技术对大花黄牡丹根皮的乙酸乙酯提取组分进行分离、纯化，得到单体化合物23个，通过紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振谱并结合文献报道确定其结构，其中包括单萜类化合物7个、单萜苷类化合物3个、酚类化合物8个、酚苷类化合物3个、生物碱类化合物1个、三萜类化合物1个，其中新化合物4个，已知化合物19个，均首次从西藏大花黄牡丹中分离得到。
技术实现思路
本专利技术通过对大花黄牡丹根皮的深入研究，提供了一种单萜类的新化合物和其制备方法。本专利技术具体通过以下技术方案实现：一种单萜类化合物，其结构式如式I所示：式I所述化合物为无色油状，通过ESI-MS谱([M+Na]+m/z249)和HR-ESI-MS谱([M+Na]+m/z249.1101,calcdforC12H18O4Na,249.1097)，确定该化合物的分子式C12H18O4，其不饱和度为4。红外光谱(KBr压片)给出了羟基(3435cm-1)和羰基(1720cm-1)信号。紫外光谱显示该化合物紫外最大吸收在203nm。所述的式I化合物的制备方法，具体包括以下步骤：1)取干燥的西藏大花黄牡丹根皮粉碎后，加入95％乙醇，室温浸提24h，重复抽滤，50℃减压浓缩，利用乙酸乙酯进萃取，将萃取液在50℃条件下减压浓缩，得到干粉A；2)将干粉A与聚酰胺按质量比1:4～5的比例混合，利用体积浓度为40％的甲醇水溶液洗脱得到组分B；3)将组分B用120mL甲醇溶解，硅胶拌样，待溶剂完全挥发，进行硅胶柱色谱，用石油醚/异丙醇体积比为10︰1的混合液洗脱，得到组分C；4)将组分C重复进行硅胶柱色谱，用石油醚和异丙醇体积比为9︰1的混合液洗脱，得到组分D；5)将组分D继续经过凝胶柱色谱，甲醇作为洗脱液，得到式I单体化合物。本专利技术制备方法步骤(1)中根皮与95％乙醇的质量体积比为1:10。本专利技术制备方法步骤(2)中干粉A与聚酰胺优选按质量比1:4.2的比例混合。本专利技术还提供了式I化合物作为抗真菌药物的应用。所述的药物可以按需要加工成任何医药上可接受的剂型，其中较优选的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、糖浆剂、冻干粉针剂或注射液。其配制可由通常的本领域技术人员所公知的加工方法制备，即将活性物质式I化合物与液体溶剂或固体载体混合后，再加入填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、溶剂、表明活性剂、香味剂、防腐剂、润滑剂、甜味剂或色素中的一种或几种。本专利技术所述的药物可以由使用者在使用前经稀释或直接使用。本专利技术的有益效果为：本专利技术从西藏大花黄牡丹根皮中提取分离出一种新化合物，该提取与分离方法简便、快速，效率高。同时该化合物具有抗真菌的活性作用，相比西藏大花黄牡丹根皮药理作用更确切，解决了西藏大花黄牡丹根皮中化学成分复杂，质量难以控制的问题。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的说明，以下所述，仅是对本专利技术的较佳实施例而已，并非对本专利技术做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的
技术实现思路
加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本专利技术方案内容，依据本专利技术的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本专利技术的保护范围内。实施例1取干燥的西藏大花黄牡丹根皮，粉碎后准确称取10kg，按照根皮与溶剂1:10(W/V)的比例加入95％乙醇，室温浸提24h，抽滤，重复三次，50℃减压浓缩，随后将总的提取物用乙酸乙酯萃取，萃取液在50℃条件下减压浓缩，得到356g的组分干粉A。将干粉A称取356g与1.5kg聚酰胺拌样，进行中压液相色谱，反相柱填充材料为MCI-Gel，利用体积浓度为40％的甲醇水溶液洗脱洗脱得到57g组分B，用120mL甲醇溶解，硅胶拌样，待溶剂完全挥发，进行硅胶柱色谱，用石油醚/异丙醇体积比为10︰1的混合液洗脱，得到组分C，将组分C重复进行硅胶柱色谱，用石油醚和异丙醇体积比为9︰1的混合液洗脱，得到组分D，将组分D继续经过凝胶柱色谱，甲醇作为洗脱液，得到式I单体化合物7mg。实施例2单体化合物结构鉴定1)波谱试验分离得到的化合物，经过分析液相色谱进行纯度检测，若无紫外吸收，分析液相色谱无法检测，进行TLC检测。并根据单体化合物极性选取相应的氘代溶剂溶解，利用NMR检测，四甲基硅烷(TMS)作为内标。新化合物需KBr压片进行IR鉴定化合物结构中所含的官能团种类；同时，取适量化合物，用相应极性溶剂溶解进行UV检测，确定化合物结构中具有紫外吸收的官能团种类。根据ESI-MS推测化合物分子量，再进一步根据HR-ESI-MS确定化合物的分子量、分子式和不饱和度。2)糖构型的确定参照酸水解薄层层析法，称取适量的化合物，甲醇溶解，配制成1mg/mL的溶液，用毛细管在硅胶板上点样，并投放于装有浓硫酸的密闭展开槽中，60℃水浴30min，结束后取出用吹风机吹至溶剂挥尽，在硅胶板空白处点上D-葡萄糖、D-芹糖、D-木糖标准品，将氯仿/甲醇(7:3,v/v)的混合溶液用水饱和，取9mL用水饱和后的氯仿/甲醇溶液，再加入1mL的冰醋酸混合均匀后作为展开剂展开，用邻苯二甲酸苯胺的正丁醇溶液喷雾，于105℃加热10min显色。苯胺-邻苯二甲酸显色剂的配置：准确称取苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于100mL水饱和的正丁醇。3)结果与分析无色油状。通过ESI-MS谱([M+Na]+m\本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新的单萜类化合物，其特征在于：所述的化合物结构式如式I所示：

【技术特征摘要】
2015.07.21 CN 20151042817191.一种新的单萜类化合物，其特征在于：所述的化合物结构式
如式I所示：
2.根据权利要求1所述的单萜类化合物，其特征在于：所述化
合物为无色油状，分子式为C12H18O4，不饱和度为4。
3.权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于包括以下
步骤：
1)取干燥的西藏大花黄牡丹根皮粉碎后，加入95％乙醇，室温
浸提24h，重复抽滤，50℃减压浓缩，利用乙酸乙酯进萃取，将萃取
液在50℃条件下减压浓缩，得到干粉A；
2)将干粉A与聚酰胺按质量比1:4～5的比例混合，利用体积浓
度为40％的甲醇水溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵丹丹，蒋丽丽，曲宏悦，李建平，张彦龙，王春杰，江伟，
申请(专利权)人：黑龙江大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23