本发明专利技术公开了一种检测靶物质的信号放大方法，包括：将生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N分别与不同靶物质特异性结合；生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N均能与偶联在颗粒上的分子A1、分子A2、分子A3…分子An中的任意一个结合，形成树枝状结构；通过能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’分别捕获树枝状结构上的不同靶物质；其中，N≥2、N’≥2和n≥1。本发明专利技术还公开了使用该方法的免疫层析试纸和装置。该同时检测多种靶物质的信号放大方法不但能够高灵敏检测靶物质，而且实现了多种靶物质的同时检测。
【技术实现步骤摘要】
一种检测靶物质的信号放大方法及使用该方法的免疫层析试纸和装置
本专利技术涉及生物检测领域，涉及一种检测靶物质的信号放大方法及使用该方法的免疫层析试纸和装置。
技术介绍
简单、灵敏、有效的检测技术在疾病诊断、新药开发、生化防御等领域意义重大。中国专利CN01822390.7公开了一种检测分析物的测试条测试法，该方法是首先对检测抗体（靶向试剂）进行生物素（配体）化修饰，示踪颗粒标记了抗生物素抗体（标记物），这样在检测过程中会形成“树枝状”结构，使检测信号得以放大。基于这一原理制备的乙肝表面抗原免疫层析试纸条的灵敏性得到大幅度提高，且基于这一原理制备的乙肝表面抗原检测试纸条较Abbott公司的乙肝表面抗原检测试纸条更为灵敏。中国专利CN200880132189公开了一种免疫层析测试中信号放大的方法以及使用该方法的免疫层析试剂盒，该方法采用两种不同粒径的偶联物超灵敏检测靶物质的信号方法，也是采用了树枝状信号放大技术。现有的检测靶物质（或分析物）的信号放大方法只能针对一种靶物质进行分析，但在检测领域，往往需要对样品中的多种靶物质进行检测，方可做出准确可靠的判断，现有的检测方法往往是每个项目单独检测，然后综合各个检测结果，得出检测结论，且需要准备多种试纸条并采用多份样品进行测试。现有的联检方法都是在各个单检体系中寻找一个折衷的体系建立起来的，这个折衷的体系往往是以牺牲检测灵敏性为代价的，所以目前已有的联合同时检测方法的灵敏性往往不够理想，无法满足现实需要。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种检测靶物质的信号放大方法及使用该方法的免疫层析试纸和装置，该方法不但能够高灵敏检测靶物质，而且实现了多种靶物质的同时检测。本专利技术所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：一种检测靶物质的信号放大方法，包括：生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N分别与不同靶物质特异性结合；生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N均能与偶联在颗粒上的分子A1、分子A2、分子A3…分子An中的任意一个结合，形成树枝状结构；通过能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’分别捕获树枝状结构上的不同靶物质；其中，N≥2、N’≥2和n≥1。优选地，所述靶物质为蛋白质分子、蛋白质分子复合物、核酸、核酸复合物中的任意一种。优选地，所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N均为生物分子与半抗原分子的偶联物；所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N上具有至少两个与分子A1、分子A2、分子A3…分子An相结合的位点。优选地，所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N中的任意每一个生物分子上偶联有5~15个半抗原分子。一种检测靶物质的免疫层析试纸，包括依次搭接粘贴在底板上的样品垫、第一结合垫、层析膜、吸水垫；所述第一结合垫包被有偶联有分子A1、分子A2、分子A3…分子An的颗粒、及能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N；所述层析膜上不同区域的检测线分别固定有能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’；其中，N≥2、N’≥2和n≥1。一种检测靶物质的免疫层析试纸，包括依次搭接粘贴在底板上的样品垫、第二结合垫、第三结合垫、层析膜、吸水垫；所述第二结合垫包被有能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N，所述第三结合垫包被有偶联有分子A1、分子A2、分子A3…分子An的颗粒；所述层析膜上不同区域的检测线分别固定有能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’；其中，N≥2、N’≥2和n≥1。优选地，所述第二结合垫和第三结合垫调换位置顺序。一种检测靶物质的免疫层析装置，包括反应微孔和免疫层析试纸，该免疫层析试纸包括依次搭接粘贴在底板上的样品垫、层析膜、吸水垫；所述反应微孔含有偶联有分子A1、分子A2、分子A3…分子An的颗粒、及能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N；所述层析膜上不同区域的检测线固定有能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’；其中，N≥2、N’≥2和n≥1。一种检测靶物质的免疫层析装置，包括反应微孔和免疫层析试纸；反应微孔中含有生物分子Ⅰ、生物分子Ⅱ、生物分子Ⅲ…生物分子N；免疫层析试纸条由依次搭接粘贴到底板上的样品垫、第三结合垫、层析膜、吸水垫组成；所述第三结合垫包被有偶联有分子A1、分子A2、分子A3…分子An的颗粒；所述层析膜上不同区域的检测线固定有能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’；其中，N≥2、N’≥2和n≥1。一种检测靶物质的免疫层析装置，包括渗滤卡、封闭液、含有偶联有分子A1、分子A2、分子A3……分子An的颗粒的溶液、含有生物分子Ⅰ、生物分子Ⅱ、生物分子Ⅲ…生物分子N的溶液、洗涤液；其中渗滤卡由卡底、吸水垫料、渗滤膜、卡盖组成；所述渗滤膜上不同检测区域分别固定有能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’；其中，N≥2、N’≥2和n≥1。本专利技术具有如下有益效果：本专利技术的信号放大方法不但能够高灵敏检测靶物质，而且实现了多种靶物质的同时检测。同样，也使用该信号放大方法制造出了高灵敏度且同时检测多种靶物质的免疫层析试纸条或免疫层析装置，其层析膜上不同区域上设有多个检测线，各个检测线上的夹心反应不会相互影响，达到了一份液体样品同时检测多种靶物质，且在同样条件下进行，既节约了检测时间，也减小了检测误差，同时降低了检测成本。附图说明图1为本专利技术同时检测两种靶物质I、II的信号放大的原理示意图；图2为本专利技术一种使用该信号放大方法同时检测多种靶物质的免疫层析试纸的结构示意图；图3为本专利技术另一种使用该信号放大方法同时检测多种靶物质的免疫层析试纸的结构示意图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术进行详细的说明，实施例仅是本专利技术的优选实施方式，不是对本专利技术的限定。本专利技术的信号放大方法中，包括偶联有分子A1、分子A2、分子A3…分子An（n≥1）的颗粒、能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N（N≥2）、以及位于固相上不同区域的且能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’（N’≥2），其中，生物分子I与生物分子I’能够夹心检测特定的靶物质I，生物分子II与生物分子II’能够夹心检测特定的靶物质II，以此类推；生物分子I、生物分子II、生物分子III…生物分子N能够与分子A1、分子A2、分子A3…分子An中的任意一个结合。同时检测不同靶物质时，将生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N分别与不同靶物质特异性结合；同时生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N与偶联在颗粒上的分子A1、分子A2、分子A3…分子An中的任意一个结合，形成结合有不同靶物质的树枝状结构；通过能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种检测靶物质的信号放大方法，包括：生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N分别与不同靶物质特异性结合；生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N均能与偶联在颗粒上的分子A1、分子A2、分子A3…分子An中的任意一个结合，形成树枝状结构；通过能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’分别捕获树枝状结构上的不同靶物质；其中，N≥2、N’≥2和n≥1。
【技术特征摘要】
1.一种检测靶物质的信号放大方法，包括：生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N分别与不同靶物质特异性结合；生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N均能与偶联在颗粒上的分子A1、分子A2、分子A3…分子An中的任意一个结合，形成树枝状结构；通过能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’分别捕获树枝状结构上的不同靶物质；其中，N≥2、N’≥2和n≥1；所述靶物质为蛋白质分子、蛋白质分子复合物、核酸复合物中的任意一种；所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N均为生物分子与半抗原分子的偶联物；所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N上具有至少两个与分子A1、分子A2、分子A3…分子An相结合的位点。2.根据权利要求1所述的检测靶物质的信号放大方法，其特征在于，所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N中的任意每一个生物分子上偶联有5~15个半抗原分子。3.一种检测靶物质的免疫层析试纸，包括依次搭接粘贴在底板上的样品垫、第一结合垫、层析膜、吸水垫；所述第一结合垫包被有偶联有分子A1、分子A2、分子A3…分子An的颗粒、及能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N；所述层析膜上不同区域的检测线分别固定有能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’；其中，N≥2、N’≥2和n≥1；所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N均为生物分子与半抗原分子的偶联物；所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N上具有至少两个与分子A1、分子A2、分子A3…分子An相结合的位点。4.一种检测靶物质的免疫层析试纸，包括依次搭接粘贴在底板上的样品垫、第二结合垫、第三结合垫、层析膜、吸水垫；所述第二结合垫包被有能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N，所述第三结合垫包被有偶联有分子A1、分子A2、分子A3…分子An的颗粒；所述层析膜上不同区域的检测线分别固定有能特异性结合不同靶物质的生物分子Ι’、生物分子ΙΙ’、生物分子ΙΙΙ’…生物分子N’；其中，N≥2、N’≥2和n≥1；所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子ΙΙΙ…生物分子N均为生物分子与半抗原分子的偶联物；所述生物分子Ι、生物分子ΙΙ、生物分子Ι...
【专利技术属性】
技术研发人员：李金峰，黎诚耀，张玲，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44
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