生产二十碳五烯酸的微生物、脂肪酸组成物及其制作方法与用途技术

本发明专利技术涉及生产二十碳五烯酸的微生物、脂肪酸组成物及其制作方法与用途，具体地，本发明专利技术有关于分离的微生物以及其菌株与突变株、生物质、微生物油、组成物及培养物；生产微生物油、生物质及突变株的方法；及使用分离的微生物、生物质及微生物油的方法。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】生产二十碳五烯酸的微生物、脂肪酸组成物及其制作方法 与用途 本专利技术申请是基于申请日为2010年3月22日、申请号为201080062727.2(国际 申请号为PCT/US2010/028175)、名称为"生产二十碳五烯酸的微生物、脂肪酸组成物及其制 作方法与用途"的专利技术专利申请的分案申请。 专利
本专利技术有关于分离的微生物以及其菌株与突变株、生物质、微生物油、组成物及培 养物；生产微生物油、生物质及突变株的方法；及使用分离的微生物、生物质及微生物油的 方法。 专利技术背景 脂肪酸的分类是基于碳链的长度与饱和度特性。脂肪酸是基于链中所存在的碳数 而称作短链、中链或长链脂肪酸，当碳原子之间并无双键存在时称作饱和脂肪酸，当双键存 在时称作不饱和脂肪酸。当仅存在一个双键时，不饱和的长链脂肪酸为单元不饱和；当存在 一个以上的双键时，则为多元不饱和。 多元不饱和脂肪酸（PUFA)的分类是基于自脂肪酸甲基端开始的第一个双键的位 置：ω-3(η_3)脂肪酸在第三个碳具有第一个双键，而ω-6(η_6)脂肪酸则在第六个碳具有 第一个双键。例如，二十二碳六烯酸（"DHA"）是一种链长为22个碳及具有6个双键的ω-3 长链多元不饱和脂肪酸（LC-PUFA)，通常命名为"22: 6η-3"。其它ω-3LC-PUFA包括经命名 为"20:5η-3"的二十碳五烯酸（"ΕΡΑ"），及经命名为"22:5η-3"的ω-3二十二碳五烯酸 ("DPAη-3")。DHA及ΕΡΑ已被称作"必需"脂肪酸。ω-6LC-PUFA包括经命名为"20:4η-6" 的二十碳四烯酸（"ARA"）及经命名为"22:5η-6"的ω-6二十二碳五烯酸（"DPAn-6"）。ω-3脂肪酸是生物学上的重要分子，其等因位于细胞膜中而影响细胞生理、调节 生物活性化合物的生产与基因表现及作为生物合成受质。R〇che，H.M.于期刊"Proc.Nutr. Soc."第58期第397-401页乙文（1999年）。例如，DHA构成人类大脑皮层中的约15%至 20%的脂质，构成视网膜中的30%至60%的脂质，以高浓度存在于睪丸与精子中，及为母 乳中的一重要组分。Berg6,J.P.与Barnathan,G.于期刊"Adv.Biochem.Eng.Biotechnol." 第96期第49-125页乙文（2005年）。DHA构成脑中的高达97%的ω-3脂肪酸，及视网膜 中的高达93%的ω-3脂肪酸。此外，DHA是胎儿与婴儿发育以及成人认知功能的维护所必 需。同上。因为在人体中无法重新合成ω-3脂肪酸，而必需自营养来源获得所述脂肪酸。 亚麻仁油与鱼油被认为是良好的ω-3脂肪酸膳食来源。亚麻仁油不含有ΕΡΑ、 DHA、DPA或ARA，但却含有十八碳三烯酸（C18: 3η-3)，其是使身体能够制造ΕΡΑ的一种结构 单元。然而有证据显示代谢转换作用的速率可能缓慢与不定，特别在健康不佳的个体中。鱼 油则依特定的物种与其等的饮食，而在脂肪酸组成的类型与水平方面有显著的差异。例如， 相较于野生鱼类，水产养殖所饲养的鱼的ω-3脂肪酸水平较低。而且，鱼油具有含环境污 染物的风险，及可能伴随着安定性问题与鱼的腥臭或味道。 破囊壶菌是破囊壶菌目（Thraustochytriales)的微生物。破囊壶菌包括裂殖壶 菌属（Schizochytrium)与破囊壶菌属（Thraustochytrium)的成员，及经确认包括DHA与EPA在内的ω-3脂肪酸的一种替代来源。见第5, 130, 242号美国专利。相较于对应的鱼 油或微型藻油，自所述海生异营性微生物所生产的油通常具有较单纯的多元不饱和脂肪酸 廊型。Lewis,Τ.Ε.于期刊"Mar.Biotechnol. "第 1 期第 580-587 页乙文（1999 年）。已报 导破囊壶菌物种的菌株所生产的ω-3脂肪酸，在该生物体所生产的总脂肪酸中占了高百 分比。第5, 130, 242号美国专利；Huang,J.等人于期刊"J.Am.Oil.Chem.Soc. "第78期第 605-610 页乙文（2001 年）；Huang,J.等人于期刊"Mar.Biotechnol. "第 5 期第 450-457 页 乙文（2003年）。然而，分离出的破囊壶菌在其身分与所生产的LC-PUFA量方面有所不同， 藉此一些先前所述的菌株在培养中所具有的ω-6脂肪酸水平可能不佳及/或可能展现低 的生产力。有鉴于此，对于展现高生产力与适合需要的LC-PUFA廓型的微生物分离作用的 需求，仍持续存在。
技术实现思路
本专利技术有关于在ATCC登录号ΡΤΑ-10212所保藏物种的一种分离的微生物。 本专利技术有关于具有在ATCC登录号ΡΤΑ-10212所保藏物种的特性的一种分离的微 生物。 本专利技术有关于一种分离的微生物，其所包含的一种18srRNA含有SEQIDNO: 1的 一种多核苷酸序列或与SEQIDNO: 1的相同度至少94%的一种多核苷酸序列。 本专利技术有关于一种分离的微生物，其包含的一种18srRNA多核苷酸序列与在 ATCC登录号ΡΤΑ-10212所保藏微生物的一种18srRNA多核苷酸序列的相同度至少94%。 本专利技术有关于在ATCC登录号PTA-10208所保藏物种的一种分离的微生物，其中该 微生物所生产的总脂肪酸包含超过约10重量％的二十碳五烯酸。 本专利技术有关于具有在ATCC登录号PTA-10208所保藏物种的特性的一种分离的微 生物，其中该微生物所生产的总脂肪酸包含超过约10重量％的二十碳五烯酸。 本专利技术有关于生产一个甘油三酯部分的一种分离的微生物，其中该甘油三酯部分 中的二十碳五烯酸含量至少约12重量％。 在一些实施例中，本专利技术的分离的微生物是一种突变型菌株。 本专利技术有关于在ATCC登录号ΡΤΑ-10212、PTA-10213、PTA-10214、PTA-10215、 PTA-10208、ΡΤΑ-10209、ΡΤΑ-10210 或ΡΤΑ-10211 所保藏的一种分离的微生物。 本专利技术有关于包含本专利技术的任一微生物或其混合物的一种生物质。 本专利技术有关于一种分离的生物质，其中该生物质的细胞干重中的至少约20重 量％为脂肪酸，其中超过约10重量％的脂肪酸为二十碳五烯酸，及其中该脂肪酸包含各低 于约5重量％的二十碳四烯酸与二十二碳五烯酸n-6。在一些实施例中，至少约25重量％ 的脂肪酸为二十二碳六烯酸。 在一些实施例中，本专利技术有关于包含甘油三酯（triacylglycerol)的一种分离的 生物质，其中至少约12重量％的甘油三酯为二十碳五烯酸。 在一些实施例中，本专利技术有关于本专利技术的任一分离的生物质，其中该脂肪酸进一 步包含各低于约5重量％的油酸、亚麻油酸、十八碳三烯酸、二十烯酸及芥子酸。 本专利技术有关于包含本专利技术的任一微生物或其混合物的一种分离的培养物。 本专利技术有关于供非人类动物或人类用的一种食用产品、化妆品或药学组成物，其 包含本专利技术的任一微生物或生物质或其混合物。 本专利技术有关于一种微生物油，其包含至少约20重量％的二十碳五烯酸与各低于 约5重量％的二十碳四烯酸、二十二碳五烯酸n-6、油酸、亚麻油酸、十八碳三烯酸、二十烯 酸、芥子酸及十八碳四烯酸。在一些实施例中，该微本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微生物油，其包含以重量计至少约20％的二十碳五烯酸和以重量计各低于约5％的二十碳四烯酸，二十二碳五烯酸n‑6，油酸，亚麻油酸，十八碳三烯酸，二十烯酸，芥子酸及十八碳四烯酸。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：K·E·阿普特，P·W·伯赫恩斯，J·M·汉森，J·W·普菲弗三世，T·L·斯托尔，R·泽克尔，
申请(专利权)人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL