一种胶原蛋白组合物及其制备方法技术

技术编号:12483400 阅读:117 留言:0更新日期:2015-12-10 20:40
本发明专利技术提供了一种胶原蛋白组合物,包括表皮细胞生长因子、胶原蛋白、血小板提取物和水,所述血小板提取物在所述胶原蛋白组合物中的质量浓度为0.5~1.5mg/mL。本发明专利技术通过提取血小板内部成分,结合胶原蛋白和表皮细胞生长因子(EGF),能快速止血和粘合伤口,因为是提取得到的血小板内部成分,能直接作用于止血,速度快,效果好,强化炎症和免疫反应,结合EGF促进表皮细胞生长,加快伤口愈合。并且,上述各成分均可在人体内降解,无任何毒副作用,无刺激作用,降解后无任何残留。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药
,尤其涉及。
技术介绍
胶原蛋白为生物高分子,是动物结缔组织中的主要成分,也是哺乳动物体内含量 最多、分布最广的功能性蛋白,占蛋白质总量的25%~30%。与组织的形成、成熟、细胞间 信息的传递,以及关节润滑、伤口愈合、钙化作用、血液凝固和衰老等有着密切的关系。胶原 蛋白也是生物科技产业最具关键性的原材料之一,在医学材料、化妆品、食品工业等均有着 广泛应用。 现有技术中,存在着将胶原蛋白与一些生物材料结合起来发挥止血作用的止血 剂,如申请号为200710115108. 5的中国专利公开了一种止血材料,其主要原材料为壳聚 糖、胶原蛋白和羧甲基纤维素钠,但是,该止血材料只具有止血的作用,对于出血的伤口不 仅没有促进愈合的作用,还可能会刺激破损出血的伤口,并且,该止血剂选用的壳聚糖和羧 甲基纤维素钠均为外来物质,存在一定的毒副作用。
技术实现思路
本专利技术提供了,本专利技术提供的胶原蛋白组合物 同时具有止血和粘合伤口的功能,并且无毒副作用。 本专利技术提供一种胶原蛋白组合物,包括:表皮细胞生长因子、胶原蛋白、血小板提 取物和水; 所述血小板提取物在所述胶原蛋白组合物中的质量浓度为0. 5~I. 5mg/mL。 优选的,所述表皮细胞生长因子在所述胶原蛋白组合物中的质量浓度为80~ 120ng/mL〇 优选的,所述胶原蛋白组合物中胶原蛋白的质量分数为40~50 %。 优选的,所述血小板提取物按照以下步骤制得: A)将脐血离心,提取血小板; B)采用缓冲液将所述血小板重悬,得到血小板混悬液,将所述血小板混悬液反复 冻融3~8次,得到血小板冻融液; C)所述血小板冻融液采用6000~1000 Og的转速进行离心,得到血小板提取物。 优选的,所述步骤A)具体包括: 将脐血以200~500g的转速离心5~20min,取上层血浆; 将上层血衆以200~500g的转速离心1~lOmin,取上清液; 将上清液以1000~1500g的转速离心1~lOmin,得到血小板。 优选的,所述步骤B)中冻融包括冷冻和融化;所述冷冻的温度为-85~-75°C ; 所述融化的温度为30~40 °C。 优选的,所述步骤C)中离心的温度为1~KTC ; 所述步骤C)中离心的时间为20~40min。 优选的,所述胶原蛋白组合物的pH值为6. 5~7. 0。 本专利技术提供一种胶原蛋白组合物的制备方法,包括以下步骤: 1)将脐血离心,提取血小板; 2)采用缓冲液将所述血小板重悬,得到血小板混悬液,将所述血小板混悬液反复 冻融3~8次,得到血小板冻融液; 3)所述血小板冻融液采用6000~1000 Og的转速进行离心,得到血小板提取物; 4)将表皮细胞生长因子、胶原蛋白溶液和血小板提取物混合,得到胶原蛋白组合 物,所述胶原蛋白组合物中血小板提取物的质量浓度为〇. 5~I. 5mg/mL。 优选的,所述步骤4)之前还包括: 将胶原蛋白与冰醋酸混合后,依次进行除菌和灭活,得到胶原蛋白溶液,然后再将 表皮细胞生长因子、胶原蛋白溶液和血小板提取物混合,得到胶原蛋白组合物。 本专利技术提供了一种胶原蛋白组合物,包括表皮细胞生长因子、胶原蛋白、血小板提 取物和水,所述血小板提取物在所述胶原蛋白组合物中的质量浓度为0. 5~I. 5mg/mL。本 专利技术通过提取血小板内部成分,结合胶原蛋白和表皮细胞生长因子(EGF),能快速止血和粘 合伤口,因为是提取得到的血小板内部成分,能直接作用于止血,速度快,效果好,强化炎症 和免疫反应,结合EGF促进表皮细胞生长,加快伤口愈合。并且,上述各成分均可在人体内 降解,无任何毒副作用,无刺激作用,降解后无任何残留。【附图说明】 为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本 专利技术的实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据 提供的附图获得其他的附图。 图1为本专利技术实施例中的B型伤口示意图; 图2为使用本专利技术实施例4得到的胶原膜贴的B型伤口愈合图。【具体实施方式】 本专利技术提供了一种胶原蛋白组合物,包括:表皮细胞生长因子、胶原蛋白、血小板 提取物和水, 所述血小板提取物在所述胶原蛋白组合物中的质量浓度为0. 5~I. 5mg/mL。 本专利技术提供的胶原蛋白组合物包括表皮细胞生长因子(EGF),所述表皮细胞生长 因子又名寡肽-1,是人体内的一种活性物质,所述表皮细胞生长因子在所述胶原蛋白组合 物中的质量浓度优选为80~120ng/mL,更优选为85~115ng/mL,最优选为90~IlOng/ mL。本专利技术对所述表皮细胞生长因子的来源没有特殊的限制,购买市售商品即可。如,可采 用ExCell (CB)公司提供的01. ExCell (CB). CB031-0041型号的重组人表皮细胞生长因子冻 干粉。 本专利技术提供的胶原蛋白组合物包括胶原蛋白,所述胶原蛋白优选采用动物胶原蛋 白,所述胶原蛋白在所述胶原蛋白组合物中的质量分数优选为40~50%,更优选为43~ 48%,最优选为45~46%。本专利技术对所述胶原蛋白的来源没有特殊的限制,采用市售商品 即可,如,可采用石家庄旭尔美生物科技有限公司提供的QB2732-2005型号的动物胶原蛋 白。 本专利技术提供的胶原蛋白组合物包括血小板提取物,所述血小板提取物在所述胶原 蛋白组合物中的质量浓度为0. 5~I. 5mg/mL,优选为0. 8~I. 3mg/mL,更优选为1~I. Img/ mL〇 血小板内部含有α颗粒和致敏颗粒,α颗粒中含纤维蛋白原、血小板第4因子、组 织蛋白酶Α、组织蛋白酶D、酸性水解酶等;致敏颗粒含有5 -羟色胺、ADP、ATP、钙离子、肾上 腺素、抗血纤维蛋白酶、焦磷酸等。这些因子成分通过复杂的变化产生凝血酶,是血液中的 纤维蛋白原变为纤维蛋白,互相交织的纤维蛋白使血小板凝块与血细胞缠结成血凝块,即 血栓。伴随着血栓的形成,血小板释放血栓烷A2;致密颗粒和α颗粒通过与表面相连管道 系统释放ADP、5-羟色胺、血小板第4因子、β血栓球蛋白、凝血酶敏感蛋白、细胞生长因子、 血液凝固因子V、νπ、χπ和血管通透因子等多种活性物质,这些活性物质通过激活血液中其 他血小板,促进血管收缩,促纤维蛋白形成等多种方式加强止血。在本专利技术中,所述血小板 提取物主要是各类因子的蛋白成分。 在本专利技术中,所述血小板提取物优选按照以下步骤制得: Α)将脐血离心,提取血小板; Β)采用缓冲液将所述血小板重悬,得到血小板混悬液,将所述血小板混悬液反复 冻融3~8次,得到血小板冻融液; C)所述血小板冻融液采用6000~1000 Og的转速进行离心,得到血小板提取物。 本专利技术将脐血离心,提取得到血小板,本专利技术优选将脐血以200~500g的转速离 心5~20min,取上层血浆;将上层血浆以200~500g的转速离心1~lOmin,取上清液;将 上清液以1000~1500g的转速离心1~lOmin,得到血小板;本专利技术更优选以300~400g 的转速离心10~15min,取上层血浆;将上层血浆以300~400g的当前第1页1 2 3&nbs本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胶原蛋白组合物,包括:表皮细胞生长因子、胶原蛋白、血小板提取物和水;所述血小板提取物在所述胶原蛋白组合物中的质量浓度为0.5~1.5mg/mL。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈海佳王一飞葛啸虎应杰舒辉萍
申请(专利权)人:广州赛莱拉生物基因工程有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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