一种以曼地亚红豆杉枝叶为原料制备高纯度10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法，工艺步骤为：(1)粗提，(2)沉降，(3)吸附，(4)溶解，(5)结晶，(6)重结晶；该方法通过大孔树脂吸附、采用不同单一溶剂对粗品进行溶解，除掉了大量的不溶杂质，再经多次结晶最终得到高纯度的10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ，不仅工艺简单，成本低，操作易于掌握，而且有利于环境保护。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种以曼地亚红豆杉枝叶为原料制备高纯度10-脱乙酰基巴卡亭III 的方法。
技术介绍
10-脱乙酰基巴卡亭III是从红豆杉中分离出的一种天然化合物，用于人工半合成 紫杉醇、多西紫杉醇及卡巴他赛等抗癌药物的前体产品。该化合物主要存在于欧洲等国外 红豆杉品种中，其枝叶中10-脱乙酰基巴卡亭III的含量高达0. 1~0. 18%，而国内原产红豆 杉品种中10-脱乙酰基巴卡亭III的含量均低于国外红豆杉中的含量，造成我国需大量依赖 进口国外红豆杉枝叶用于制备高纯度的10-脱乙酰基巴卡亭III的不利现状。 1996年我国引进了曼地亚红豆杉（Taxus media)，该红豆杉为一种天然杂交品种， 其父本为欧洲红豆杉（Taxus baccata)、母本为东北红豆杉（Taxus cuspidata)。经十余年 的试种测定、驯化、选择和培育，现已经筛选出了 10-脱乙酰基巴卡亭III等有效成分与国外 红豆杉含量相当的曼地亚红豆杉品系，填补了国内制备高纯度10-脱乙酰基巴卡亭III需要 进口国外红豆杉作为原材料的空白。 CN102827106A公开了一种10-脱乙酰基巴卡亭III的提取纯化方法，该方法以红豆 杉枝叶为原料，使用有机溶剂提取，并经二氯甲烷或乙酸乙脂萃取，活性炭脱色、减压浓缩 得到粗品，该粗品经两次结晶与硅胶色谱层析，再经重结晶获得10-脱乙酰基巴卡亭III纯 品。该方法工艺步骤虽然能有效提取制备高纯度的10-脱乙酰基巴卡亭III，但活性炭脱色 会吸附一定的10-脱乙酰基巴卡亭III，造成产品的丢失，硅胶层析时需要大量的有机溶剂 进行洗涤与洗脱，在洗涤与洗脱过程中不仅会使部分产品流失或未彻底洗脱，同时会造成 有机溶剂蒸发损耗。此外，工艺繁锁，工人不易准确掌握，工艺时间长，生产成本较高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种改进的以曼地亚红豆杉枝叶为 原材料制备高纯度10-脱乙酰基巴卡亭III的方法，以降低生产成本、简化工艺、易于操控， 并减少环境污染。 本专利技术所述10-脱乙酰基巴卡亭III的结构式如下： 本专利技术所述以曼地亚红豆杉枝叶为原料制备高纯度10-脱乙酰基巴卡亭III的方 法，工艺步骤如下： (1)粗提 将曼地亚红豆杉枝叶粉碎物装入提取罐中，用质量浓度40~60%的醇溶液浸泡 8~12小时得浸泡混合料，然后将该浸泡混合料渗漉提取10~20小时并收集浸出液，渗 漉提取过程中，应向提取罐中添加质量浓度40~60%的醇溶液，保证提取罐中的曼地亚红 豆杉枝叶粉碎物被醇溶液淹没；浸泡时，所述曼地亚红豆杉枝叶粉碎物的重量与醇溶液的 体积之比为1: (3~4)，曼地亚红豆杉枝叶粉碎物的重量单位为公斤，醇溶液的体积单位为 升； 渗漉提取完成后，用自来水对浸泡混合料再次渗漉置换出残存在渣中的醇溶液， 该醇溶液可用于配制浸泡和渗漉提取所用的乙醇溶液，再次渗漉时，自来水的体积与曼地 亚红豆杉枝叶粉碎物的重量之比为（3~4) : 1 ; (2)沉降 将步骤（1)收集到的浸出液在真空度为-0? 06Mpa~-0? 08Mpa、温度为60°C~ 70°C下减压浓缩回收尽醇后静置12~20小时，然后取出上清液并将沉淀用温度为70°C~ 80°C的自来水搅拌洗涤2~3次，将每次洗涤所得洗液与所述上清液合并得药液； ⑶吸附 将步骤（2)得到的药液上样到大孔树脂柱上，上样过程中，包括10-脱乙酰基 巴卡亭III在内的物质被大孔树脂吸附，不被吸附的物质随水从大孔树脂柱流出，当所述 药液上样完毕后，用自来水洗涤大孔树脂柱上的杂质，洗涤至大孔树脂柱的流出液呈 清亮透明态即可，然后用质量浓度40~70 %的醇溶液进行洗脱并收集洗脱液，再将洗 脱液在真空度为-〇. 〇6Mpa~-0. 08Mpa、温度为60 °C~70 °C下减压浓缩回收尽醇后， 于-0. 06Mpa~-0.0 SMpa真空度、温度为60°C~70°C下浓缩至干得粗品I ;该步骤中的废 水用于曼地亚红豆杉基地的施水与施肥； ⑷溶解 将步骤⑶得到的粗品I加入到丙酮中搅拌溶解，然后过滤得丙酮液和滤渣，将 滤渣再用丙酮搅拌溶解1~3次并过滤，合并所有丙酮液，并将丙酮液在70°C~80°C下浓 缩回收丙酮后得干品； 将所述干品加入到二氯甲烷中搅拌溶解，然后过滤得二氯甲烷液和滤渣，将滤渣 再用二氯甲烷搅拌溶解1~3次并过滤，合并所有二氯甲烷液，并将二氯甲烷液在70°C~ 80°C下浓缩回收二氯甲烷后得粗品II ; (5)结晶 将步骤（4)得到的粗品II加入乙腈中，在搅拌下加热至50°C~60°C并保持该温 度，当粗品II基本溶解后停止加热和搅拌，自然冷却12~24小时，再通过离心、真空干燥得 初次结晶品； (6)重结晶 将步骤（5)所得初次结晶品用乙醇结晶一次、再用丙酮结晶一次，或用丙酮结晶 一次、再用乙醇结晶一次，然后用液相色谱法对经上述两次结晶后所得晶体进行检测，根据 检测结果用乙醇或丙酮再重复结晶2~3次，即得纯度高于98%的10-脱乙酰基巴卡亭III。 用乙醇重结晶的作用主要是去除液相色谱图中10-脱乙酰基巴卡亭III峰左侧的 杂质，用丙酮重结晶的作用主要是去除液相色谱图中10-脱乙酰基巴卡亭III峰右侧的杂 质。 上述方法，步骤（1)和步骤（3)中所述醇溶液为甲醇溶液或乙醇溶液。 上述方法，步骤（1)中渗漉提取时浸出液的流速控制在60~1000L/h。 上述方法，步骤（3)中所述大孔树脂为非极性树脂或弱极性树脂，非极性树脂为 HP-20型树脂、HPD-100型树脂、HPD-300型树脂或D-101型树脂，弱极性树脂为AB-8型树 月旨、DA-201型树脂或HPD-400型树脂，它们均为市售商品；大孔树脂用量为曼地亚红豆杉枝 叶粉碎物重量的〇. 5~1倍，醇溶液用量为大孔树脂柱体积的5~10倍，药液通过大孔树 脂柱的流速为lBV/h~2BV/h。上述方法，步骤（4)中粗品I的重量与丙酮的体积之比为1: (6~10)，各次滤渣的 重量与丙酮的体积之比为1: (6~10)，粗品I的重量单位为公斤，滤渣的重量单位为公斤， 丙酮的体积单位为升；干品的重量与二氯甲烷的体积之比为1: (6~10)，各次滤渣的重量 与二氯甲烷的体积之比为1: (6~10)，干品的重量单位为公斤，滤渣的重量单位为公斤，二 氯甲烷的体积单位为升。 上述方法，步骤（5)中粗品II的重量与乙腈的体积之比为1: (2~3)，粗品II的重 量单位为公斤，乙腈的体积单位为升。 上述方法，步骤（6)中重结晶的操作是：将晶体加入丙酮或乙醇中，在搅拌下加热 到40°C~70°C并保持该温度，当丙酮或乙醇中的晶体完全溶解后停止加热和搅拌，静置到 室温后过滤，将滤液在真空度-0. 〇6Mpa~-0. 08Mpa、温度60°C~70°C下减压或常压浓缩回 收丙酮或乙醇至有晶体析出为止，然后在室温、常压下自然结晶6~12小时，继后过滤并将 所得晶体真空干燥。 与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果： 1、由于本专利技术所述方法中采用了中药提取方法中的醇溶液渗漉提取，提取时溶剂 由于重力作用而向下流动，上层流下的浸出液置换下层的溶剂，不断造成浓度差，渗漉法相 当于无数次浸渍，是一个动态本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种以曼地亚红豆杉枝叶为原材料制备高纯度10‑脱乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法，其特征在于步骤如下：(1)粗提将曼地亚红豆杉枝叶粉碎物装入提取罐中，用质量浓度40～60％的醇溶液浸泡8～12小时得浸泡混合料，然后将该浸泡混合料渗漉提取10～20小时并收集浸出液；浸泡时，所述曼地亚红豆杉枝叶粉碎物的重量与醇溶液的体积之比为1:(3～4)，曼地亚红豆杉枝叶粉碎物的重量单位为公斤，醇溶液的体积单位为升；(2)沉降将步骤(1)收集到的浸出液在真空度为‑0.06Mpa～‑0.08Mpa、温度为60℃～70℃下减压浓缩回收尽醇后静置12～20小时，然后取出上清液并将沉淀用温度为70℃～80℃的自来水搅拌洗涤2～3次，将每次洗涤所得洗液与所述上清液合并得药液；(3)吸附将步骤(2)得到的药液上样到大孔树脂柱上，上样过程中，包括10‑脱乙酰基巴卡亭Ⅲ在内的物质被大孔树脂吸附，不被吸附的物质随水从大孔树脂柱流出，当所述药液上样完毕后，用自来水洗涤大孔树脂柱上的杂质，洗涤至大孔树脂柱的流出液呈清亮透明态即可，然后用质量浓度40～70％的醇溶液进行洗脱并收集洗脱液，再将洗脱液在真空度为‑0.06Mpa～‑0.08Mpa、温度为60℃～70℃下减压浓缩回收尽醇后，于‑0.06Mpa～‑0.08Mpa真空度、温度为60℃～70℃下浓缩至干得粗品Ⅰ；(4)溶解将步骤(3)得到的粗品Ⅰ加入到丙酮中搅拌溶解，然后过滤得丙酮液和滤渣，将滤渣再用丙酮搅拌溶解1～3次并过滤，合并所有丙酮液，并将丙酮液在70℃～80℃下浓缩回收丙酮后得干品；将所述干品加入到二氯甲烷中搅拌溶解，然后过滤得二氯甲烷液和滤渣，将滤渣再用二氯甲烷搅拌溶解1～3次并过滤，合并所有二氯甲烷液，并将二氯甲烷液在70℃～80℃下浓缩回收二氯甲烷后得粗品Ⅱ；(5)结晶将步骤(4)得到的粗品Ⅱ加入乙腈中，在搅拌下加热至50℃～60℃并保持该温度，当粗品Ⅱ完全溶解后停止加热和搅拌，自然冷却12～24小时，再通过离心、真空干燥得初次结晶品；(6)重结晶将步骤(5)所得初次结晶品用乙醇结晶一次、再用丙酮结晶一次，或用丙酮结晶一次、再用乙醇结晶一次，然后用液相色谱法对经上述两次结晶后所得晶体进行检测，根据检测结果用乙醇或丙酮再重复结晶2～3次，即得纯度高于98％的10‑脱乙酰基巴卡亭Ⅲ。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王刚，蒲擎宇，冯永林，蒲尚饶，沈金亮，李伟，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：四川;51
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