吡咯并苯并二氮杂卓-抗CD22抗体结合物制造技术

分离的人源化的抗CD22抗体与PBD二聚体的结合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及具有以与抗体的接头形式的不稳定的C2或N10保护基团的吡咯并苯并二氮杂(吡咯并苯并二氮杂卓，pyrrolobenzodiazepines)(PBD)。
技术介绍
吡咯并苯并二氮杂一些吡咯并苯并二氮杂(PBD)能够识别和结合于DNA的特定序列；优选的序列是PuGPu。于1965年发现第一PBD抗肿瘤抗生素，安曲霉素(anthramycin)(Leimgruber,etal.,J.Am.Chem.Soc.,87,5793-5795(1965)；Leimgruber,etal.,J.Am.Chem.Soc.,87,5791-5793(1965))。其后，已报道许多自然存在的PBD，并且针对各种类似物已开发超过10种合成途径(Thurston,etal.,Chem.Rev.1994,433-465(1994)；Antonow,D.andThurston,D.E.,Chem.Rev.2011111(4),2815-2864)。家族成员包括abbeymycin(Hochlowski,etal.,J.Antibiotics,40,145-148(1987))、奇卡霉素(chicamycin)(Konishi,etal.,J.Antibiotics,37,200-206(1984))、DC-81(日本专利58-180487；Thurston,etal.,Chem.Brit.,26,767-772(1990)；Bose,etal.,Tetrahedron,48,751-758(1992))、甲基氨茴霉素(mazethramycin)(Kuminoto,etal.,J.Antibiotics,33,665-667(1980))、新丝拉霉素(neothramycin)A和B(Takeuchi,etal.,J.Antibiotics,29,93-96(1976))、porothramycin(Tsunakawa,etal.,J.Antibiotics,41,1366-1373(1988))、prothracarcin(Shimizu,etal,J.Antibiotics,29,2492-2503(1982)；LangleyandThurston,J.Org.Chem.,52,91-97(1987))、西班米星(sibanomicin)(DC-102)(Hara,etal.,J.Antibiotics,41,702-704(1988)；Itoh,etal.,J.Antibiotics,41,1281-1284(1988))、西伯里亚霉素(sibiromycin)(Leber,etal.,J.Am.Chem.Soc.,110,2992-2993(1988))和托马霉素(tomamycin)(Arima,etal.,J.Antibiotics,25,437-444(1972))。PBD为以下一般结构：它们的区别在于取代基的数量、类型和位置，在于它们的芳族A环和吡咯并C环两者，以及在于C环的饱和度。在B环中，在N10-C11位置(其是负责使DNA烷基化的亲电中心)处存在亚胺(N＝C)、甲醇胺(carbinolamine)(NH-CH(OH))或甲醇胺甲醚(NH-CH(OMe))。所有已知的天然产物在手性C11a位置处具有(S)-构型，当从C环到A环观察时，该构型向它们提供右手扭转(right-handedtwist)。这给予它们用于与B型DNA的小沟的等螺旋性(isohelicity)的适当的三维形状，获得在结合位点处的滑动配合(Kohn,InAntibioticsIII.Springer-Verlag,NewYork,pp.3-11(1975)；HurleyandNeedham-VanDevanter,Acc.Chem.Res.,19,230-237(1986))。它们在小沟中形成加合物的能力使得它们可以干扰DNA加工，因此它们可用作抗肿瘤剂。由Gregsonetal.作为化合物1(Chem.Commun.1999,797-798)以及由Gregsonetal.作为化合物4a(J.Med.Chem.2001,44,1161-1174)描述了特别有利的吡咯并苯并二氮杂化合物。该化合物，也称为SG2000，在以下示出：WO2007/085930描述了具有用于连接至细胞结合剂(如抗体)的接头基团的二聚体PBD化合物的制备。接头存在于连接二聚体的单体PBD单元的桥中。本专利技术人在WO2011/130613和WO2011/130616中已经描述了具有用于连接至细胞结合剂(如抗体)的接头基团的二聚体PBD化合物。这些化合物中的接头通过C2位连接至PBD核心，并且通常被接头基团上酶的作用切割。在WO2011/130598中，这些化合物中的接头连接至PBD核上可获得的N10位中的一个，并且通常被接头基团上酶的作用切割。抗体-药物结合物已经建立用于患有癌症、免疫疾病和血管疾病患者的靶向治疗的抗体疗法(Carter,P.(2006)NatureReviewsImmunology6:343-357)。癌症治疗中用于局部递送细胞毒性剂或细胞抑制剂(即，药物)以杀死或抑制肿瘤细胞的抗体-药物结合物(ADC)(即，免疫结合物)的使用靶向将药物部分递送至肿瘤，并且在其中细胞内积聚，而这些非结合药物试剂的全身给予可以导致对正常细胞不可接受的毒性水平(Xieetal(2006)Expert.Opin.Biol.Ther.6(3):281-291；Kovtunetal(2006)CancerRes.66(6):3214-3121；Lawetal(2006)CancerRes.66(4):2328-2337；Wuetal(2005)NatureBiotech.23(9):1137-1145；LambertJ.(2005)CurrentOpin.inPharmacol.5:543-549；HamannP.(2005)ExpertOpin.Ther.Patents15(9):1087-1103；Payne,G.(2003)CancerCell3:207-212；Trailetal(2003)CancerImmunol.Immunother.52:328-337；SyrigosandEpenetos(1999)AnticancerResearch19:605-614)。由此观察到具有最小毒性的最大疗效。设计和改善ADC的努力集中在单克隆抗体(mAb)的选择性以及药物作用机制、药物连接、药物/抗体比值(负载)和药物释放性质上(Junut本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种式L‑(DL)p的结合物，其中，DL是式I或式II：其中：L是抗体(Ab)，其是结合至CD22的抗体，所述抗体包含具有根据SEQ ID NO.1的序列的VH结构域；当C2’和C3’之间存在双键时，R12选自由以下组成的组：(ia)C5‑10芳基基团，可选地被选自包含以下的组中的一个或多个取代基取代：卤素、硝基、氰基、醚、羧基、酯、C1‑7烷基、C3‑7杂环基和双‑氧基‑C1‑3亚烷基；(ib)C1‑5饱和脂肪族烷基；(ic)C3‑6饱和环烷基；(id)其中，R21、R22和R23中的每个独立地选自H、C1‑3饱和烷基、C2‑3烯基、C2‑3炔基和环丙基，其中，R12基团中碳原子的总数为不大于5；(ie)其中，R25a和R25b中的一个是H，并且另一个选自：苯基，该苯基可选地被选自卤素、甲基、甲氧基的基团取代；吡啶基；和苯硫基；和(if)其中，R24选自：H；C1‑3饱和烷基；C2‑3烯基；C2‑3炔基；环丙基；苯基，该苯基可选地被选自卤素、甲基、甲氧基的基团取代；吡啶基；和苯硫基；当C2’和C3’之间存在单键时，R12是其中，R26a和R26b独立地选自H、F、C1‑4饱和烷基、C2‑3烯基，该烷基和烯基基团可选地被选自C1‑4烷基氨基和C1‑4烷基酯的基团取代；或当R26a和R26b中的一个是H时，另一个选自腈和C1‑4烷基酯；R6和R9独立地选自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR′、硝基、Me3Sn和卤素；其中，R和R’独立地选自可选取代的C1‑12烷基、C3‑20杂环基和C5‑20芳基基团；R7选自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NHRR’、硝基、Me3Sn和卤素；R″是C3‑12亚烷基基团，该链可以由一个或多个以下项所中断：杂原子，例如O、S，NRN2(其中RN2是H或C1‑4烷基)，和/或芳环，例如苯或吡啶；Y和Y′选自O、S或NH；R6’、R7’、R9’分别选自与R6、R7和R9相同的基团；[式I]RL1’是用于连接至抗体(Ab)的接头；R11a选自OH、ORA，其中，RA是C1‑4烷基和SOzM，其中，z是2或3并且M是单价的药学上可接受的阳离子；R20和R21或者一起形成它们连接的氮和碳原子之间的双键；或者R20选自H和RC，其中，RC是封端基团；R21选自OH、ORA和SOzM；当C2和C3之间存在双键时，R2选自由以下组成的组：(ia)C5‑10芳基基团，可选地被选自包含以下的组中的一个或多个取代基取代：卤素、硝基、氰基、醚、羧基、酯、C1‑7烷基、C3‑7杂环基和双‑氧基‑C1‑3亚烷基；(ib)C1‑5饱和脂肪族烷基；(ic)C3‑6饱和环烷基；(id)其中，R11、R12和R13中的每个独立地选自H、C1‑3饱和烷基、C2‑3烯基、C2‑3炔基和环丙基，其中，R2基团中碳原子的总数不大于5；(ie)其中，R15a和R15b中的一个是H，并且另一个选自：苯基，该苯基可选地被选自卤素、甲基、甲氧基的基团取代；吡啶基；和苯硫基；和(if)其中，R14选自：H；C1‑3饱和烷基；C2‑3烯基；C2‑3炔基；环丙基；苯基，该苯基可选地被选自卤素、甲基、甲氧基的基团取代；吡啶基；和苯硫基；当C2和C3之间存在单键时，R2是其中，R16a和R16b独立地选自H、F、C1‑4饱和烷基、C2‑3烯基，该烷基和烯基基团可选地被选自C1‑4烷基氨基和C1‑4烷基酯的基团取代；或当R16a和R16b中的一个是H时，另一个选自腈和C1‑4烷基酯；[式II]R22是式IIIa、式IIIb或式IIIc：其中，A是C5‑7芳基基团，并且或者(i)Q1是单键，并且Q2选自单键和‑Z‑(CH2)n‑，其中Z选自单键、O、S和NH，并且n是1至3；或者(ii)Q1是‑CH＝CH‑，并且Q2是单键；(b)其中，RC1、RC2和RC3独立地选自H和未取代的C1‑2烷基；(c)其中，Q选自O‑RL2’、S‑RL2’和NRN‑RL2’，并且RN选自H、甲基和乙基；X选自包括以下的组：O‑RL2’、S‑RL2’、CO2‑RL2’、CO‑RL2’、NH‑C(＝O)‑RL2’、NHNH‑RL2’、CONHNH‑RL2’、NRNRL2’，其中，RN选自包括H和C1‑4烷基的组；RL2’是用于连接至抗体(Ab)的接头；R10和R11或者一起形成它们连接的氮和碳原子之间的双键；或者R10是H并且R11选自OH、ORA和SOzM；R30和R31或者一起形成它们连接的氮和碳原子之间的双键；或者R30是H并且R31选自OH、ORA和SOzM。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.10.12 US 61/712,924;2012.10.12 US 61/712,928;1.一种式L-(DL)p的结合物，其中，DL是式I或式II：
其中：
L是抗体(Ab)，其是结合至CD22的抗体，所述抗体包含具有根
据SEQIDNO.1的序列的VH结构域；
当C2’和C3’之间存在双键时，R12选自由以下组成的组：
(ia)C5-10芳基基团，可选地被选自包含以下的组中的一个或多个
取代基取代：卤素、硝基、氰基、醚、羧基、酯、C1-7烷基、C3-7杂
环基和双-氧基-C1-3亚烷基；
(ib)C1-5饱和脂肪族烷基；
(ic)C3-6饱和环烷基；
(id)其中，R21、R22和R23中的每个独立地选自H、
C1-3饱和烷基、C2-3烯基、C2-3炔基和环丙基，其中，R12基团中碳原
子的总数为不大于5；
(ie)其中，R25a和R25b中的一个是H，并且另一个
选自：苯基，该苯基可选地被选自卤素、甲基、甲氧基的基团取代；
吡啶基；和苯硫基；和
(if)其中，R24选自：H；C1-3饱和烷基；C2-3烯基；
C2-3炔基；环丙基；苯基，该苯基可选地被选自卤素、甲基、甲氧
基的基团取代；吡啶基；和苯硫基；
当C2’和C3’之间存在单键时，
R12是其中，R26a和R26b独立地选自H、F、C1-4饱和
烷基、C2-3烯基，该烷基和烯基基团可选地被选自C1-4烷基氨基和
C1-4烷基酯的基团取代；或当R26a和R26b中的一个是H时，另一个
选自腈和C1-4烷基酯；
R6和R9独立地选自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、
NRR′、硝基、Me3Sn和卤素；
其中，R和R’独立地选自可选取代的C1-12烷基、C3-20杂环基和
C5-20芳基基团；
R7选自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NHRR’、硝
基、Me3Sn和卤素；
R″是C3-12亚烷基基团，该链可以由一个或多个以下项所中断：
杂原子，例如O、S，NRN2(其中RN2是H或C1-4烷基)，和/或芳环，
例如苯或吡啶；
Y和Y′选自O、S或NH；
R6’、R7’、R9’分别选自与R6、R7和R9相同的基团；
[式I]
RL1’是用于连接至抗体(Ab)的接头；
R11a选自OH、ORA，其中，RA是C1-4烷基和SOzM，其中，z
是2或3并且M是单价的药学上可接受的阳离子；
R20和R21或者一起形成它们连接的氮和碳原子之间的双键；或
者
R20选自H和RC，其中，RC是封端基团；
R21选自OH、ORA和SOzM；
当C2和C3之间存在双键时，R2选自由以下组成的组：
(ia)C5-10芳基基团，可选地被选自包含以下的组中的一个或多个
取代基取代：卤素、硝基、氰基、醚、羧基、酯、C1-7烷基、C3-7杂
环基和双-氧基-C1-3亚烷基；
(ib)C1-5饱和脂肪族烷基；
(ic)C3-6饱和环烷基；
(id)其中，R11、R12和R13中的每个独立地选自H、
C1-3饱和烷基、C2-3烯基、C2-3炔基和环丙基，其中，R2基团中碳原
子的总数不大于5；
(ie)其中，R15a和R15b中的一个是H，并且另一
个选自：苯基，该苯基可选地被选自卤素、甲基、甲氧基的基团取
代；吡啶基；和苯硫基；和
(if)其中，R14选自：H；C1-3饱和烷基；C2-3烯基；
C2-3炔基；环丙基；苯基，该苯基可选地被选自卤素、甲基、甲氧
基的基团取代；吡啶基；和苯硫基；
当C2和C3之间存在单键时，
R2是其中，R16a和R16b独立地选自H、F、C1-4饱
和烷基、C2-3烯基，该烷基和烯基基团可选地被选自C1-4烷基氨基和
C1-4烷基酯的基团取代；或当R16a和R16b中的一个是H时，另一个
选自腈和C1-4烷基酯；
[式II]
R22是式IIIa、式IIIb或式IIIc：
其中，A是C5-7芳基基团，并且或者
(i)Q1是单键，并且Q2选自单键和-Z-(CH2)n-，其中Z选自单键、
O、S和NH，并且n是1至3；或者
(ii)Q1是-CH＝CH-，并且Q2是单键；
(b)其中，
RC1、RC2和RC3独立地选自H和未取代的C1-2烷基；
(c)其中，Q选自O-RL2’、S-RL2’和NRN-RL2’，并且RN选自H、甲
基和乙基；
X选自包括以下的组：O-RL2’、S-RL2’、CO2-RL2’、CO-RL2’、
NH-C(＝O)-RL2’、NHNH-RL2’、CONHNH-RL2’、NRNRL2’，其中，RN选自包括H和C1-4烷基的组；
RL2’是用于连接至抗体(Ab)的接头；
R10和R11或者一起形成它们连接的氮和碳原子之间的双键；或
者
R10是H并且R11选自OH、ORA和SOzM；
R30和R31或者一起形成它们连接的氮和碳原子之间的双键；或
者
R30是H并且R31选自OH、ORA和SOzM。
2.根据权利要求1所述的结合物，其中，所述结合物不是：
3.根据权利要求1或权利要求2所述的结合物，其中，R7选自H、OH
和OR。
4.根据权利要求3所述的结合物，其中，R7是C1-4烷氧基基团。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的结合物，其中，Y是O。
6.根据前述权利要求中任一项所述的结合物，其中，R”是C3-7亚烷基。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的结合物，其中，R9是H。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的结合物，其中，R6选自H和卤
素。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在双键，并且R12是C5-7芳基基团。
10.根据权利要求9所述的结合物，其中，R12是苯基。
11.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在双键，并且R12是C8-10芳基基团。
12.根据权利要求9至11中任一项所述的结合物，其中，R12带有1至
3个取代基基团。
13.根据权利要求9至12中任一项所述的结合物，其中，所述取代基选
自甲氧基、乙氧基、氟、氯、氰基、双-氧基-亚甲基、甲基-哌嗪基、
吗啉代和甲基-苯硫基。
14.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在双键，并且R12是C1-5饱和脂肪族烷基基团。
15.根据权利要求16所述的化合物，其中，R12是甲基、乙基或丙基。
16.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在双键，并且R12是C3-6饱和环烷基基团。
17.根据权利要求16所述的结合物，其中，R12是环丙基。
18.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在双键，并且R12是下式的基团：
19.根据权利要求18所述的结合物，其中，所述R12基团中碳原子的总
数不大于4。
20.根据权利要求19所述的结合物，其中，所述R12基团中碳原子的总
数不大于3。
21.根据权利要求18至20中任一项所述的结合物，其中，R21、R22和
R23中的一个是H，另外两个基团选自H、C1-3饱和烷基、C2-3烯基、
C2-3炔基和环丙基。
22.根据权利要求18至20中任一项所述的结合物，其中，R21、R22和
R23中的两个是H，另外一个基团选自H、C1-3饱和烷基、C2-3烯基、
C2-3炔基和环丙基。
23.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在双键，并且R12是下式的基团：
24.根据权利要求23所述的结合物，其中，R12是以下基团：
25.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在双键，并且R12是下式的基团：
26.根据权利要求25所述的结合物，其中，R24选自H、甲基、乙基、
乙烯基和乙炔基。
27.根据权利要求26所述的结合物，其中，R24选自H和甲基。
28.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在单键，R12是并且R26a和R26b都是H。
29.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在单键，R12是并且R26a和R26b都是甲基。
30.根据权利要求1至8中任一项所述的结合物，其中，C2’和C3’之间
存在单键，R12是R26a和R26b中的一个是H，并且另一个
选自C1-4饱和烷基、C2-3烯基，该烷基和烯基基团是可选取代的。
[式I]
31.根据权利要求1至30中任一项所述的结合物，其中，C2和C3之间
存在双键，并且R2是C5-7芳基基团。
32.根据权利要求31所述的结合物，其中，R2是苯基。
33.根据权利要求1至30中任一项所述的结合物，其中，C2和C3之间
存在双键，并且R1是C8-10芳基基团。
34.根据权利要求31至33中任一项所述的化合物，其中，R2带有1至
3个取代基基团。
35.根据权利要求31至34中任一项所述的结合物，其中，所述取代基
选自甲氧基、乙氧基、氟、氯、氰基、双-氧基-亚甲基、甲基-哌嗪
基、吗啉代和甲基-苯硫基。
36.根据权利要求1至30中任一项所述的结合物，其中，C2和C3之间
存在双键，并且R2是C1-5饱和脂肪族烷基基团。
37.根据权利要求36所述的结合物，其中，R2是甲基、乙基或丙基。
38.根据权利要求1至30中任一项所述的结合物，其中，C2和C3之间
存在双键，并且R2是C3-6饱和环烷基基团。
39.根据权利要求38所述的结合物，其中，R2是环丙基。
40.根据权利要求1至30中任一项所述的结合物，其中，C2和C3之间
存在双键，并且R2是下式的基团：
41.根据权利要求40所述的结合物，其中，所述R2基团中碳原子的总
数不大于4。
42.根据权利要求41所述的结合物，其中，所述R2基团中碳原子的总
数不大于3。
43.根据权利要求40至42中任一项所述的结合物，其中，R11、R12和
R13中的一个是H，另外两...

【专利技术属性】
技术研发人员：帕特里修斯·亨德里克斯·科内利斯·范贝克尔，菲利普·威尔逊·霍华德，
申请(专利权)人：ADC疗法责任有限公司，麦迪穆有限责任公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH