马鲛鱼超低温冷冻精液的复苏方法技术

技术编号:12352385 阅读:180 留言:0更新日期:2015-11-19 02:49
本发明专利技术公开了马鲛鱼超低温冷冻精液的复苏方法,该复苏方法先将马鲛鱼超低温冷冻精液在恒温水浴中解冻,再用精子复苏液温养解冻后的马鲛鱼精子,使复苏后的精子活率可以达到新鲜精子的水平,解冻复苏过程中精子损伤较少,精子复苏率可以达到85%以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及超低温冷冻精液的解冻复活方法,具体涉及。
技术介绍
马鲛鱼属鲈形目,鲅科,是一种重要的海洋经济鱼类。虽然马鲛鱼人工繁殖和养殖难度较大,但目前已获得初步成果。马鲛鱼批量人工繁殖中,对马鲛鱼精液的保存和复活也是关健点。鱼类精液的保存方法多种多样,如4°C常温保存,低温保存,超低温冷冻保存等,超低温冷冻保存不但精子保存时间长,且精子质量变化很少,但超低温冷冻保存时精子复苏难度较大,目前只有家畜的冷冻精液解冻复苏的报道,如公开号为CN104322484的专利技术专利申请,就公开了先以50°C /min的速率,将冻存精液升至_5°C,再以3°C /min的速率将冻存精液升至5°C,得到复苏的猪精子。但鱼类精子生命力较弱,常规的解冻对鱼类精子损伤较大,因此需要进一步研究后才能应用,还没有鱼类及方面的研究报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种,该复苏方法使冷冻精液中精子损伤较少,精子复苏率可以达到85%以上。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为:,步骤如下:a、将装有马鲛鱼超低温冷冻精液的冻存管从液氮中取出,放入40?50°C恒温水浴中,摇动冻存管,至冻存管中马鲛鱼超低温冷冻精液完全溶解,取出冻存管,得到解冻后的马鲛鱼精液; b、将解冻后的马鲛鱼精液与精子复苏液按体积比1:100的比例混合,静置温养2?3min,得到复苏的马鲛鱼精子,所述精子复苏液为温度18?20°C,pH7.6?8.4,盐度20?30%。的纯净海水。与现有技术相比,本专利技术的优点在于,该复苏方法先将马鲛鱼超低温冷冻精液在恒温水浴中解冻,再用精子复苏液温养解冻后的马鲛鱼精子,使复苏后的精子活率可以达到新鲜精子的水平,解冻复苏过程中精子损伤较少,精子复苏率可以达到85%以上。【具体实施方式】以下结合实施例对本专利技术作进一步详细描述。实施例1 ,将装有马鲛鱼超低温冷冻精液的冻存管从液氮中取出,放入45°C恒温水浴中,摇动冻存管,至冻存管中马鲛鱼超低温冷冻精液完全溶解(一般2 min左右),取出冻存管,得到解冻后的马鲛鱼精液,将解冻后的马鲛鱼精液与精子复苏液(温度19°C,pH8.0,盐度25%。的纯净海水)按体积比1:100的比例混合,静置温养2.5min,得到复苏的马鲛鱼精子,检测后精子活率可以达到新鲜精子相当,统计后精子复苏率达到88%以上。实施例2 ,将装有马鲛鱼超低温冷冻精液的冻存管从液氮中取出,放入40°C恒温水浴中,摇动冻存管,至冻存管中马鲛鱼超低温冷冻精液完全溶解(一般2 min左右),取出冻存管,得到解冻后的马鲛鱼精液,将解冻后的马鲛鱼精液与精子复苏液(温度18°C,pH8.4,盐度30%。的纯净海水)按体积比1:100的比例混合,静置温养3 min,得到复苏的马鲛鱼精子,检测后精子活率可以达到新鲜精子相当,统计后精子复苏率达到86%以上。实施例3 ,将装有马鲛鱼超低温冷冻精液的冻存管从液氮中取出,放入50°C恒温水浴中,摇动冻存管,至冻存管中马鲛鱼超低温冷冻精液完全溶解(一般2 min左右),取出冻存管,得到解冻后的马鲛鱼精液,将解冻后的马鲛鱼精液与精子复苏液(温度20°C,pH7.6,盐度20%。的纯净海水)按体积比1:100的比例混合,静置温养2 min,得到复苏的马鲛鱼精子,检测后精子活率可以达到新鲜精子相当,统计后精子复苏率达到85%以上。【主权项】1.,其特征在于步骤如下: a、将装有马鲛鱼超低温冷冻精液的冻存管从液氮中取出,放入40?50°C恒温水浴中,摇动 冻存管,至冻存管中马鲛鱼超低温冷冻精液完全溶解,取出冻存管,得到解冻后的马鲛鱼精液; b、将解冻后的马鲛鱼精液与精子复苏液按体积比1:100的比例混合,静置温养2?3min,得到复苏的马鲛鱼精子,所述精子复苏液为温度18?20°C,pH7.6?8.4,盐度20?30%。的纯净海水。2.如权利要求1所述的,其特征在于步骤a中,恒温水浴的温度为45°C。3.如权利要求1所述的,其特征在于步骤b中,精子复苏液为温度19°C,pH98.0,盐度25%。的纯净海水。【专利摘要】本专利技术公开了,该复苏方法先将马鲛鱼超低温冷冻精液在恒温水浴中解冻,再用精子复苏液温养解冻后的马鲛鱼精子,使复苏后的精子活率可以达到新鲜精子的水平,解冻复苏过程中精子损伤较少,精子复苏率可以达到85%以上。【IPC分类】C12N5/071【公开号】CN105062954【申请号】CN201510502997【专利技术人】郑春静, 刘军 【申请人】宁波市海洋与渔业研究院【公开日】2015年11月18日【申请日】2015年8月17日本文档来自技高网...

【技术保护点】
马鲛鱼超低温冷冻精液的复苏方法,其特征在于步骤如下:a、将装有马鲛鱼超低温冷冻精液的冻存管从液氮中取出,放入40~50℃恒温水浴中,摇动冻存管,至冻存管中马鲛鱼超低温冷冻精液完全溶解,取出冻存管,得到解冻后的马鲛鱼精液;b、将解冻后的马鲛鱼精液与精子复苏液按体积比1:100的比例混合,静置温养2~3 min,得到复苏的马鲛鱼精子,所述精子复苏液为温度18~20℃,pH7.6~8.4,盐度20~30‰的纯净海水。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:郑春静刘军
申请(专利权)人:宁波市海洋与渔业研究院
类型:发明
国别省市:浙江;33

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