用于治疗MPS1的组合物和方法技术

技术编号:12279977 阅读:106 留言:0更新日期:2015-11-05 15:36
提供了一种载体,该载体具有表达盒,该表达盒含有hIDUA基因,该基因具有SEQ ID NO:1序列或编码功能性人α-L-艾杜糖苷酸酶的、与SEQ ID NO:1序列具有至少约95%一致性的序列。该载体可以是生产载体或rAAV8。还提供了包含这些载体的组合物和治疗MPSI以及与贺勒氏(Hurler)、贺勒-施艾氏(Hurler-Scheie)和施艾氏(Scheie)综合征相关的症状的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】用于治疗MPS1的组合物和方法[000。 专利技术背景 粘多糖胆积症是由缺乏糖胺聚糖(GAG)(也被成为粘多糖)降解中设及的特异 性溶酶体酶引起的一组遗传性障碍。部分降解的GAG的累积引起对细胞、组织、和器官功 能的干扰。随着时间,GAG在细胞、血液和结缔组织内累积,造成越来越多的细胞和器官 损伤。最严重的粘多糖胆积症(MP巧障碍MPSI是由酶aA-艾杜糖巧酸酶(IDUA)的 缺乏引起的。运导致S种临床综合征,按严重性的顺序为贺勒氏化urler)、贺勒-施艾氏 化urler-Scheie)和施艾氏(Scheie)综合征。每一种都是常染色体隐性遗传,酶缺陷的程 度与临床表型的严重性直接相关。 已经报道IDUA基因为生产称为a 艾杜糖巧酸酶的酶提供指示,运种酶对于分 解称为糖胺聚糖(GAG)的大的糖分子是必要的。具体地,报道了a艾杜糖巧酸酶从被 称为硫酸化a 艾杜糖醒酸的分子中去除硫酸素(sul化te),硫酸素存在于被称为硫酸 乙酷肝素和硫酸皮肤素两种GAG中。a 艾杜糖巧酸酶位于溶酶体中,溶酶体是细胞内消 化和再循环不同种类的分子的隔室。已经发现IDUA基因中的多于100种突变引起I型粘 多糖胆积症(MPSI)。改变一个DNA结构单元(核巧酸)的突变是最常见的。引起MPSI 的突变减少或完全消除a艾杜糖巧酸酶的功能。关于临床综合征,目前对贺勒氏综合征的医疗标准是造血干细胞移植化SCT),如 骨髓移植度MT)或厮带血移植扣CBT)。要尽早并且在两岁前进行运一手术,从而影响疾病 的躯体和CNS两个方面。然而,对于MPSI的HSCT仍然与大量发病和20%的死亡率相关。 如果移植不是选项,则可W开始酶替代疗法巧RT),该疗法需要为了患者的生命而每周输注 酶。邸T不影响CNS疾病的进展,但部分改善躯体表现。器官巨大症得到显著改善,尽管疾 病在骨骼系统、眼和屯、脏方面仅得到部分改善。患者可能需要手术来稳固臀部和膝盖并且 来治疗腕管综合征和手指收缩。屯、脏疾病用药物治疗,尽管最终可能需要手术。 对于MPSI的ERT提供外源性酶来摄取到溶酶体中并且增加GAG的分解代谢。尽 管溶酶体酶在内部起作用,细胞表面甘露糖-6-憐酸受体能够结合、内化、和递送运些酶到 溶酶体。重组IDUA(阿杜拉酶(Aldura巧me货),拜马林制药度ioMarin))被抑A批准用 于患有贺勒氏和贺勒-施艾氏形式的MPSI的患者和用于患有施艾氏形式的患者,运些患 者具有中等到严重的症状并且被示为改善了肺功能和行走能力。还观察到了ERT减少MPS I患者的肝脏肿大W及尿液中GAG的水平。然而,因为静脉内的酶不容易穿过进入脑部,所 W目前ERT没有解决某些MPSI患者经历的神经症状。ERT的并发症围绕对重组酶的免疫应答,其范围可W从溫和到全面过敏反应W及 终生外周通路并发症如局部和全身感染。高达91%的接受阿杜拉酶的患者发展出了对酶 的抗体,尽管并不清楚它对疗效有多大影响。进一步地,ERT需要在医院环境下每周静脉内 (i.V.)输注,经3-8小时的时期给药,运严重影响了患者的生活质量,并且高昂的费用是卫 生保健报销系统的主要压力。 鉴于运些限制,可W更有效地矫正与MPSI相关的发病的治疗仍然是未满足的医 疗需求。[000引专利技术概述 在一个方面,本专利技术提供了表达盒,该表达盒包括人a 艾杜糖巧酸酶化IDUA) 基因,该基因具有SEQIDNO: 1核巧酸序列或在人细胞中编码功能性人a艾杜糖巧酸 酶的、与SEQIDNO: 1具有至少约95%-致性的序列,其中所述表达盒进一步包括在人细胞 中指导人a 艾杜糖巧酸酶表达的调控序列,所述调控序列包括肝脏特异性启动子。 在另一个方面,本专利技术提供了包含该表达盒的载体。在一个实施例中,该表达盒位 于cis质粒上。在另一个实施例中,该表达盒位于祀順.TBG.hIDUA.nRBG上。 在还另一个方面,本专利技术提供了重组腺相关病毒(rAAV)颗粒,该颗粒具有AAV衣 壳并且具有包装在其中的左反向末端重复序列(口时、在控制其表达的调节序列的控制下 的人aA-艾杜糖巧酸酶化IDUA)基因、和AAV右口R,其中所述hIDUA基因具有在SEQID NO: 1 (图1)中示出的序列或编码功能性人aA-艾杜糖巧酸酶的、与SEQIDNO: 1示出的 序列具有至少约95%-致性的序列。在一个实施例中,该功能性hIDUA基因在肝脏特异性 启动子的控制下进行表达。运种启动子可W是甲状腺素结合球蛋白(TBG)启动子。 在进一步的方面,本专利技术提供了重组腺相关病毒颗粒AAV2/8.TBG.hIDUA.CO。 在还另一个方面,本专利技术提供了对于治疗I型粘多糖胆积症(MPSI)有用的组合 物,该组合物包括rAAV和药学上可接受的载体,该rAAV包括在此所述的表达盒。 在仍另一个方面,本专利技术提供了用于治疗I型粘多糖胆积症的方法,该方法包括 递送有效量的组合物,该组合物包括药学上可接受的载体和如在此所述的rAAV。 在还另一个方面,本专利技术提供了用于治疗或改善贺勒氏、贺勒-施艾氏和/或施艾 氏综合征的症状的方法。 本专利技术的还有其他方面和优点将从本专利技术的详细描述中显而易见。 附图简要说明 的序列,该序列包括功能性人IDUA基因的核酸序列。功能性IDUA的基因位于图1的位置 1251-3213处,并且还在SEQIDN0:1和2中提供了其编码的酶序列。进一步对序列进行注 释W标识W下序列:amic/b化增强子、内含子1、兔球蛋白polyA、口R、复制起点。[001引 图2提供了祀順.AAV.TBG.PI.hIDUA.RGB的环状图。 专利技术详细说明 在此所述的组合物提供了携带人IDUA基因的表达盒,该表达盒在人类受试者中 表达治疗有效量的功能性人aA-艾杜糖巧酸酶。 如在此所使用,"治疗有效量"指在祀细胞中递送和表达足W改善或治疗贺勒氏、 贺勒-施艾氏和/或施艾氏综合征、和或MPSI症状的酶的量的组合物的量。"治疗"可W 包括预防运些综合征(或MPSI)中的一种的症状的恶化并可能逆转其症状中的一种或多 种。 如在此所使用的"功能性人a 艾杜糖巧酸酶"指人a 艾杜糖巧酸酶 的酶,该酶通常在未患有MPS1或相关综合征(如贺勒氏、贺勒-施艾氏和/或施艾氏 综合征)的人中起作用。相反地,引起MPS1或运些综合征中的一种的人aA-艾杜糖 巧酸酶的酶的变体被认为是非功能性的。在一个实施例中,功能性人a-^艾杜糖巧 酸酶具有布雷默度remer)等人在W下文献中所描述的野生型人a 艾杜糖巧酸酶 的氨基酸序列:分子遗传学与新陈代谢(Mol.Genet.Met油.)104 (3) : 289-294 (2011),NCBI参考序列NP_000194. 2,重现在SEQIDN0:2化53个氨基酸)中。然而,此序列的 若干天然发生的功能多态性(变体)已被描述并可W涵盖在本专利技术的范围内。参考 SEQIDN0:2,运些变体包括在位置110处的N-键联糖基化,在氨基酸位置33处的从H到Q的 改变, 在氨基酸位置82处的H到Q的还原,在位置105处的从R到Q的改变,在位置116处的从G到R的改变, 在位置279处的从V到A的改变,在位置346处的从L到R 的改变,在位置 361 处的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种携带表达盒的重组载体,该表达盒包括人α‑L‑艾杜糖苷酸酶(hIDUA)基因,该基因具有SEQ ID NO:1核苷酸序列或编码功能性人α‑L‑艾杜糖苷酸酶的、与SEQ ID NO:1具有至少约80%一致性的序列,其中所述表达盒进一步包括指导人α‑L‑艾杜糖苷酸酶表达的调控序列,所述调控序列包括肝脏特异性启动子。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:J·M·威尔森B·L·哥达
申请(专利权)人:宾夕法尼亚大学托管会
类型:发明
国别省市:美国;US

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