本发明专利技术属于生物工程中退行性心脏瓣膜病相关基因相关技术领域，涉及一种退行性心脏瓣膜病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用，该基因的核苷酸序列具有SEQ ID NO: 1所示的序列。本发明专利技术对退行性心脏瓣膜病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒和应用做了详细介绍，该体外检测退行性心脏瓣膜病相关基因的试剂盒除了可以用于体外检测退行性心脏瓣膜病相关基因的多态性外，还可以用于检测、预防、诊断或治疗退行性心脏瓣膜病，从而降低退行性心脏瓣膜病的发生率，对预防和治疗退行性心脏瓣膜病具有重大的意义。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物工程中退行性必脏瓣膜病相关基因相关
，是一种退行性 必脏瓣膜病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用。
技术介绍
流行病学与临床研究表明，随着人类寿命的延长，生活环境和饮食习惯的改变，退 行性必脏瓣膜病值egenerative valvular heart disease)的发病率不断增加，现已成为 老年人必力衰竭、必律失常、晕厥及粹死的主要原因之一。退行性必脏瓣膜病的主要病理 变化是瓣膜结缔组织退行性变、纤维化、增厚及巧化，从而引起瓣膜及其支架功能的改变。 病变类型主要有主动脉瓣巧化、二尖瓣环巧化、二尖瓣巧化，W及两个瓣膜同时存在的联合 瓣膜巧化等。本病在所有的老年必脏瓣膜病中约占25%，在老年非风湿性必脏瓣膜病中占 80%。国外报道该病老年人尸检检出率为60%至80%，超声检出率为74%;国内资料显示，该 病老年人尸检检出率为46. 1%，超声检出率为38. 8%至60. 2%。60岁W后瓣膜巧化检出率呈 明显的随年龄增高趋势，其中W主动脉瓣巧化为主，其次为二尖瓣环巧化和二尖瓣巧化。可 见，退行性必脏瓣膜病已成为临床必脏病学中广泛存在的一个重要问题，应引起大家的关 注。随着研究的深入，人们对退行性必脏瓣膜病的认识也有了很大的提高，已经认识到退行 性必脏瓣膜病不只是一种单因素疾病，而是由多种内源性及外源性因素共同决定的复杂性 疾病，除了高血压，高血脂，糖尿病，吸烟等环境因素外，遗传因素在退行性必脏瓣膜病发生 发展过程中也起到了重要作用。 目前研究证明，慢性炎症参与退行性必脏瓣膜病的发生、发展，其早期损害主要包 括：（1)慢性炎症细胞的浸润，主要是巨瞻细胞和T淋己细胞；（2)损伤区及她邻纤维层脂 质聚集；（3)纤维层增厚，包括胶原纤维及弹力纤维的聚集；(4)巧盐沉积。其终末期损害主 要表现为主动脉侧瓣叶的非结合部位不规则纤维巧化斑积聚。镜下可见瓣叶增厚、脂质聚 集、胶原纤维排列奈乱，巧盐沉积，炎性细胞趋向定位于损害的表面。肺炎衣原体是呼吸道 感染的常见原因，化voven等的研究发现，在狭窄及早期病变的主动脉瓣膜上找到了肺炎衣 原体，在早期损害瓣膜的检出率是83%，而在正常瓣膜的检出率为44%。送些研究结果进一步 说明炎症在退行性必脏瓣膜病的发生、发展过程中起到关键作用，宿主对感染的反应可能 是疾病发生及发展的重要原因。 白细胞介素（Interleukin)是由淋己细胞、单核细胞或其他非单核细胞产生 的细胞因子，在细胞间相互作用、免疫、炎症和造血过程中起重要调节作用。白细胞介 素-10 (比-10)为一家族性细胞因子，主要包括比-19、比-20、比-24/ MDA-7、比-22/ IL-TIF及IL-26/ AK-155,它们是一类多功能的负性调节因子，主要由化2细胞、活化的 B细胞、单核细胞、巨瞻细胞产生，可W通过抑制IL-1, TNF-a，IL-6,比-8，GM-CSF及MHC n等多种炎症因子的产生来减弱TH1型反应应答的活性及单核细胞的功能，从而起到抑制 炎症过程的作用；同时，比-10也是一种B细胞刺激因子，可W通过增强B细胞的增殖和分 化，在细胞和体液免疫的调控中发挥重要作用。因此，部分学者认为，比-10可通过参与慢 性炎症过程，从而影响退行性必脏瓣膜病的发生和发展。 基因为单拷贝基因，位于lq31-32区域，共有5个外显子和4个内含子。基因扫 描分析发现该位置是退行性必脏瓣膜病的易感性区域。双生子和家系研究都已表明，至少 75%的IL-10产物变异都是由IL-10基因启动子区决定的，而且IL-10产物受转录水平的控 巧[J。比-10基因5'端区域包含许多多态性位点，直接影响比-10蛋白的表达。化tk卵等 对德国187例重度主动脉瓣巧化狭窄病人的主动脉瓣膜组织进行了 IL-10基因启动子区基 因多态性的测定，并首次发现，比-10基因多态性与瓣膜巧化程度具有显著相关性。近年来 关于IL-10基因多态性及编码蛋白质在必血管系统发生发展过程中的作用逐渐引起了人 们关注。
技术实现思路
本专利技术提供了一种退行性必脏瓣膜病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂 盒、应用。 本专利技术的技术方案之一是通过W下措施来实现的：一种退行性必脏瓣膜病相关基 因即比-10基因，该基因的核巧酸序列具有SEQ ID NO: 1所不的序列。 本专利技术的技术方案之二是通过W下措施来实现的：一种体外检测退行性必脏瓣膜 病相关基因的试剂，该试剂用于检测IL-10基因rsl800871位点的多态性，该试剂包括如下 引物： 上游引物；5'AAACTTTAGACTCCAGCCACA 3' 下游引物；5'TGCCCATTCCAGAATACAA 3'。 下面是对上述专利技术技术方案之二的进一步优化或/和改进： 上述试剂为用于聚合酶链式反应与限制性片段长度多态性分析相结合的试剂或用于 聚合酶链式反应与直接测序法相结合的试剂。 本专利技术的技术方案之H是通过W下措施来实现的：一种有体外检测退行性必脏瓣 膜病相关基因的试剂的制剂或试剂盒，该试剂盒包含PCR扩增酶及相应缓冲液。 本专利技术的技术方案之四是通过W下措施来实现的：一种体外检测退行性必脏瓣膜 病相关基因的试剂在制备用于体外检测退行性必脏瓣膜病相关基因的制剂或试剂盒中的 应用。 下面是对上述专利技术技术方案之四的进一步优化或/和改进： 上述试剂盒中包含PCR扩增酶及相应缓冲液。 本专利技术对退行性必脏瓣膜病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒和应用 做了详细介绍，该体外检测退行性必脏瓣膜病相关基因的试剂盒除了可W用于体外检测退 行性必脏瓣膜病相关基因的多态性外，还可W用于检测、预防、诊断或治疗退行性必脏瓣膜 病，从而降低退行性必脏瓣膜病的发生率，对预防和治疗退行性必脏瓣膜病具有重大的意 义。【附图说明】 图巧本专利技术的rsl800871多态性位点的酶切图谱。其中如泳道巧日3显示待测 个体rsl800871位点的基因型为T/T纯合子；泳道2, 4和6显示待测个体的rsl800871位 点为C/T杂合子；泳道5和7显示待测个体的rsl800871位点为C/C纯合子。【具体实施方式】 为了更清楚地理解本专利技术，现参照下列实施例及附图进一步描述本专利技术，实施例 仅用于解释而不W任何方式限制本专利技术。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照 常规条件进行：如Sambrook等人所著的《分子克隆；实验手册》（New fork: Cold Spring Harbor L油oratory Press, 1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。 实施例1，一种退行性必脏瓣膜病相关基因即比-10基因，该基因的核巧酸序列具 有SEQ ID NO: 1所示的序列。含有IL-10的基因的待测样品可W从来自试验者的细胞获 得，如来自血液、尿、唾液、胃液、头发、活组织检查和尸体解剖材料的细胞，优选来自血液。 实施例2, 一种体外检测退行性必脏瓣膜病相关基因的试剂，该试剂用于检测 比-10基因rsl800871位点的多态性，该试剂包括如下引物： 上游引物；5'AAACTTTAGACTCCAGCCACA 3' 下游引物；5'TGCCCATTCCAGAATACAA 3'。[001引本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种退行性心脏瓣膜病相关基因即IL‑10基因，其特征在于该基因的核苷酸序列具有SEQ ID NO: 1所示的序列。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：马依彤，安勇，王永涛，迪拉热·阿迪，杨毅宁，
申请(专利权)人：新疆医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：新疆;65
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