一种直投式凝乳酶制剂的制备方法及其产物和应用技术

技术编号:11857903 阅读:75 留言:0更新日期:2015-08-12 01:49
本发明专利技术公开了一种直投式凝乳酶制剂的制备方法及其产物和应用,所述制备方法包括以下步骤:利用脱脂乳培养基培养类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)25℃~35℃,震荡培养24~120小时得到发酵液,将所得发酵液离心后取上清液即得。该制备方法创造性地使用脱脂乳作为基料来发酵,由于同样为乳源制品,因此所获得的凝乳酶可以直接应用于干酪的制备工艺,相比传统的凝乳酶制备方法,此法大幅简化了凝乳酶制剂的应用步骤,最大限度地保留了凝乳酶活力,从根本上避免了提取过程中的凝乳酶的酶活力损失,从而有效降低了凝乳酶制剂的生产与应用成本。

【技术实现步骤摘要】
一种直投式凝乳酶制剂的制备方法及其产物和应用
本专利技术属于生物
,具体涉及一种直投式凝乳酶制剂的制备方法及其产物和应用。
技术介绍
凝乳酶是干酪生产中的关键性酶,它对干酪的质构形成及特有风味的形成有非常重要的作用。国际市场上凝乳酶中动物来源的约占70%,微生物的占30%,随着干酪工业的不断发展,动物来源的凝乳酶已远不能满足生产需要,各国研究者不断地寻找新的来源。目前发现微生物可产生一定活力的凝乳酶主要是放线菌、细菌和霉菌等,包括放线菌中链霉菌属、小单孢菌属、马杜拉放线菌属、根霉、总状毛霉、微小毛霉、米黑毛霉、粟疫菌、寄生内座壳菌、易脆毛霉以及其他通过基因工程或辐照获得的高产凝乳酶的菌株等。将筛选出的高产凝乳酶菌株通过优化培养条件后,确定较佳的凝乳酶提取的方法和条件,成为当今国内外凝乳酶研究的一个重要的方向。然而,目前国内微生物源凝乳酶需从发酵液提取获得后才能投入商业化应用,其提取方法主要涉及了硫酸铵分步法盐析、氯化钠盐析法以及乙醇分步提取法等,且提取的凝乳酶多集中于对毛霉相关研究,其纯化过程还需要通过层析柱处理,过程较为复杂且增大了凝乳酶的损失率。目前我国对凝乳酶的研究较浅,生产干酪的凝乳酶主要依靠国外进口。只有少数科研单位对产凝乳酶的菌种及制备工艺进行了较系统的研究。中国专利申请(CN103740618A)公开了类芽孢杆菌属的一个新菌种(Paenibacillusdamxungensissp.nov.),并将其中的模式菌株BD3526于2013年10月14日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),该菌株的保藏编号为:CGMCCNo.8333。中国专利申请(CN103865842A)公开了类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)CGMCCNo.8333菌株的麸皮培养物上清液具有凝乳酶活力,然而,麸皮原料作为一种小麦加工的副产品,目前尚无明确的产品标准,从而导致不同来源的麸皮发酵上清液中的凝乳酶活力高低不一,波动性极大,这给该类芽孢杆菌及其发酵产物的工业化应用带来了很大障碍。
技术实现思路
因此,本专利技术要解决的技术问题就是针对目前凝乳酶的天然来源和产量严重不足,而利用不同来源的麸皮培养基培养类芽孢杆菌所得上清液中的凝乳酶活力高低不一,波动性极大的技术问题,提供了一种直投式凝乳酶制剂的制备方法及其产物和应用。本专利技术所述制备方法创造性地使用脱脂乳作为培养介质,将所得具有凝乳酶活力的发酵上清或其冻干制剂直接应用于干酪的制备工艺。相比传统制备方法,本专利技术公开的制备方法大幅简化了凝乳酶制剂的应用步骤,最大限度地保留了凝乳酶活力,从而有效降低了凝乳酶制剂的生产与应用成本。此外,与现有制备方法相比本专利技术方法使用的脱脂乳培养基成分性质明确,成分含量稳定,解决了由于发酵基料成分不稳定造成的所得凝乳酶的活性波动幅度极大的问题,为类芽孢杆菌及其发酵产物的工业化大规模生产以及在干酪制备中的应用提供了极大的保障。尽管类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)CGMCCNo.8333菌株的麸皮培养物上清液具有凝乳酶活力已有披露,但其凝乳酶活力因麸皮的不同产地或批次等因素会产生较大的波动。本专利技术人发现,该菌株的脱脂乳发酵液同样具有优良的凝乳酶活力,更重要的是,本专利技术所述的制备方法所用的发酵基料为脱脂乳时,该培养基的成分明确而且含量稳定,与麸皮培养基相比具有更稳定的凝乳酶产出效率,因此利用脱脂乳培养基发酵培养类芽孢杆菌所得发酵液上清或者冻干粉可直接应用于标准化程度较高的大规模工业化干酪生产制备工艺。为解决上述技术问题,本专利技术采取的技术方案之一是:一种直投式凝乳酶制剂的制备方法,所述制备方法包括以下步骤:利用脱脂乳培养类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)25℃~35℃,震荡培养20~120小时得到发酵液,将所得发酵液离心后取上清液即得。其中所述类芽孢杆菌为产凝乳酶的类芽孢杆菌,较佳地为CGMCCNo.8333菌株。该类芽孢杆菌的模式菌株BD3526已于2013年10月14日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),它的分类命名是类芽孢杆菌(Paenibacillussp.),其保藏编号为:CGMCCNo.8333(具体内容请参见中国专利申请CN103740618A)。其中所述脱脂乳为本领域常规所述的脱脂乳,所述脱脂乳的制备方法为本领域常规的制备方法。其中所述脱脂乳更佳地是将鲜乳经过脱脂和除菌后制得的,所述脱脂的方法较佳地是将生鲜乳通过脂肪分离机处理,如离心等加工方式处理所得;更佳地是由脱脂乳粉加水还原制备得到。较佳地,所述脱脂乳由5%-15%的脱脂乳粉和补足至100%的水还原制得,更佳地,所述脱脂乳由6%-12%的脱脂乳粉和补足至100%的水还原制得,最佳地,所述脱脂乳由10%的脱脂乳粉和90%的水还原制得,所述百分比为质量百分比。其中所述的培养的温度较佳地为28℃~35℃,更佳地为30℃;所述震荡培养的震荡速度较佳地为200rpm;震荡培养的时间较佳为24h~96h,更佳地为4288h~72h,最佳地为48h。其中所述离心的温度较佳地为2℃~4℃,离心的速度较佳地为6000g~15,000g,离心的时间较佳地为5min~15min更佳地为10min。当离心速度过高,或者离心时间过长时,会显著降低所得凝乳酶制剂的活力,最终影响酶制剂的凝乳效果。较佳地,所述制备方法还包括将所得上清液冷冻干燥的步骤,所述冷冻干燥较佳地为真空冷冻干燥,所述真空冷冻干燥的温度较佳地为-44℃~-40℃。为解决上述技术问题,本专利技术采取的技术方案之二是:本专利技术所述制备方法所得的直投式凝乳酶制剂。本专利技术制备所得直投式凝乳酶制剂的凝乳酶活力更稳定,而且该直投式凝乳酶制剂的应用方法更为简单方便。为解决上述技术问题,本专利技术采取的技术方案之三是:本专利技术所述直投式凝乳酶制剂在制备凝乳酶中的应用。本专利技术所述凝乳酶的制备方法为本领域常规的凝乳酶制备方法。为解决上述技术问题,本专利技术采取的技术方案之四是:本专利技术所述直投式凝乳酶制剂在制备发酵乳制品中的应用。本专利技术所述发酵乳制品为本领域常规发酵乳制品,较佳地包括发酵乳,乳酸菌饮料,干酪,酸乳粉,发酵乳酪等,更佳地为发酵乳酪,优选地为干酪。在符合本领域常识的基础上,上述各优选条件,可任意组合,即得本专利技术各较佳实例。本专利技术所用试剂和原料均市售可得。本专利技术的积极进步效果在于:1、该制备方法创造性地使用脱脂乳作为培养来发酵类芽孢杆菌,由于同样为乳源制品,因此所获得的凝乳酶可以直接应用于干酪的制备工艺,相比传统的凝乳酶制备方法,此法大幅简化了凝乳酶制剂的应用步骤,最大限度地保留了凝乳酶活力,从根本上避免了提取过程中凝乳酶的酶活力损失,从而有效降低了凝乳酶制剂的生产与应用成本。2、本专利技术的制备方法打破了传统凝乳酶制剂提取方法需要涉及硫酸铵、乙醇等化学试剂和有机溶剂的现状,所制备的酶制剂无任何试剂残留的风险,具有更可靠的食品安全性。3、本专利技术的制备方法所使用培养基为成分明确,含量稳定的脱脂乳培养基,与常规的麸皮培养基制备方法相比,具有更稳定的凝乳酶活力,因而更适合标准化程度较高的大规模工业化干酪生产制备工艺。具体实施方式下面通过实施例的方式进一步说明本专利技术,但并不因此将本本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种直投式凝乳酶制剂的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:利用脱脂乳培养类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)25℃~35℃,震荡培养20~120小时得到发酵液,将所得发酵液离心后取上清液即得。

【技术特征摘要】
1.一种直投式凝乳酶制剂的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:利用脱脂乳培养保藏编号为CGMCCNo.8333的类芽孢杆菌(Paenibacillussp.),28℃~35℃,震荡培养24小时~96小时,得到发酵液,将所得发酵液离心后取上清液即得;所述脱脂乳由5%~15%的脱脂乳粉和补足至100%的水还原制得,所述百分比为质量百分比;所述震荡培养的震荡速度为100r/min~300r/min。2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述脱脂乳由6%-12%的脱脂乳粉和补足至100%的水还原制得,所述百分比为质量百分比。3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述脱脂乳由10%的脱脂乳粉和90%的水还原制得,所述百分比为质量百分比。4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述震荡培养的温度为30℃...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴正均韩瑨刘振民郭本恒杭锋
申请(专利权)人:光明乳业股份有限公司
类型:发明
国别省市:上海;31

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