核转运调节剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及式I的化合物，及其药学上可接受的盐，包含式I化合物的药物组合物，以及利用所述化合物、盐和组合物治疗与CRM1活性有关的各种病症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】核转运调节剂及其应用 相关申请 本申请要求2012年5月9日提交的美国临时申请No. 61/644,802和2013年3月 15日提交的美国临时申请No. 61/798, 188的权益。上述申请的全部教导通过引用并入本文 中。 专利技术背景 大多数主要的人类实体和血液恶性肿瘤的细胞表现出各种致瘤蛋白、肿瘤抑制蛋 白和细胞周期调节蛋白的异常细胞定位（Cronshaw等，2004, Falini等2006)。例如，某些 P53突变导致定位在细胞质中而不是细胞核中。这导致正常生长调节丧失，即使肿瘤抑制蛋 白功能完整。在其他肿瘤中，野生型P53隔离在细胞质中或迅速降解，再次导致它的抑制功 能丧失。恢复功能性P53蛋白的适当核定位可正常化肿瘤性细胞的一些性质（Cai等，2008 ; Hoshino 等 2008 ;Lain 等 1999a ;Lain 等 1999b ;Smart 等 1999)，可修复癌细胞对DNA损伤剂 的敏感性（Cai等，2008)，并可导致已长成的肿瘤消退（Sharpless&DePinho 2007, Xue等， 2007)。对于其他肿瘤抑制蛋白例如叉头蛋白（Turner和Sullivan2008)和c-Abl (Vignari 和Wang 2001)，已经获得类似数据。另外，在自身免疫性疾病的发病机理中可能涉及若干肿 瘤抑制蛋白和生长调节蛋白的异常定位（Davis 2007, Nakahara 2009)。CRMl抑制在家族 性癌症综合征（例如，由于失去一个P53等位基因的Li-Fraumeni综合征、BRCAl或2癌症 综合征）中可以提供特别引人瞩目的效用，在所述综合征中特定的肿瘤抑制蛋白（TSP)缺 失或功能障碍并且其中通过全身（或局部）施用CRMl抑制剂来增加 TSP水平可以帮助恢 复正常的肿瘤抑制蛋白功能。 特定的蛋白质和RNA被专门的转运分子转运入和转运出细胞核，所述转运分子如 果将分子转运到细胞核中的话，它们被分类为输入蛋白，如果它们将分子转运出细胞核的 话，就被分类为输出蛋白（Terry等，2007;Sorokin等2007)。被转运进出细胞核的蛋白质 含有核输入/定位（NLS)或输出（NES)序列，使它们与相关的转运蛋白相互作用。染色体 区域维持蛋白I(Crml)，也称为输出蛋白-1或Xpo 1，是主要的输出蛋白。 在若干肿瘤中已经报告了 Crml的过表达，包括人类卵巢癌（Noske等，2008)、子宫 颈癌（van der Watt 等，2009)、胰腺癌（Huang 等，2009)、肝细胞癌（Pascale 等，2005)和骨 肉瘤（Yao等，2009)，并且Crml的过表达独立地与这些肿瘤类型中差的临床结果相关联。 抑制Crml阻断了肿瘤抑制蛋白和/或生长调节蛋白例如p53、c-Abl、p21、p27、 pRB、BRCA1、IkB、ICp27、E2F4、KLF5、YAP1、ZAP、KLF5、HDAC4、HDAC5 或叉头蛋白（例如 F0X03a)从细胞核外流，它们与基因表达、细胞增殖、血管生成和表观遗传学有关。Crml抑 制剂已经显示出即使在存在激活性致癌信号或生长刺激信号下仍然引起癌细胞凋亡，而不 伤害正常（未转化的）细胞。大多数的Crml抑制研究利用了天然产物Crml抑制剂细霉素 B(LMB)。LMB本身对肿瘤细胞是高毒性的，但是耐受差，在动物（Roberts等，1986)和人类 (Newlands等，1996)中有显著的胃肠毒性。衍生化LMB以提高类药性质产生了保持抗肿 瘤活性并且在动物肿瘤模型中耐受更好的化合物（Yang等，2007, Yang等，2008, Mutka等， 2009)。因此，核输出抑制剂在肿瘤性和其他增殖性病症中可具有有益的效果。然而，迄今 为止，供体外和体内使用的小分子、类药Crml抑制剂是少见的。 除了肿瘤抑制蛋白之外，Crml还输出涉及许多炎性过程的若干关键蛋白。这些包 括 IkB、NF-kB、Cox-2、RXRa、Commdl、HIFl、HMGBl、F0X0、FOXP 和其它。转录激活因子的核 因子KB(NF-kB/rel)族（因发现它驱动免疫球蛋白κ基因表达而命名）调节涉及炎症、 增殖免疫和细胞存活的各种基因的mRNA表达。在基础条件下，NF-kB的蛋白抑制剂（称为 IkB)与细胞核中的NF-kB结合，并且复合物IkB-NF-kB使得NF-kB转录功能失活。响应炎 性刺激，IkB从IkB-NF-kB复合物中解离，释放NF-kB并且暴露它强有力的转录活性。许多 活化NF-kB的信号通过靶定IkB进行蛋白水解来这样做（IkB的磷酸化使得它被标记供 泛素化并然后蛋白水解）。所述核IkBa-NF-kB复合物可通过Crml被输出到细胞质，它在 细胞质中解离并可重新激活NF-kB。泛素化的IkB也可以从所述NF-kB复合物解离，恢复 NF-kB转录活性。通过LMB抑制人类中性粒细胞和巨噬细胞样细胞（U937)中Crml诱导的 输出，不仅导致转录失活的核IkBa-NF-kB复合物的累积，而且即使在细胞刺激下也阻止了 NF-kB的初始活化（Ghosh 2008，Huang 2000)。在不同的研究中，用LMB处理抑制了肺微血 管内皮细胞中IL-I β诱导的NF-kBDNA结合（NF-kB转录激活中的第一步）、IL-8表达和细 胞间粘附分子表达（Walsh 2008)。COMMDl是兼具NF-kB和缺氧诱导因子I (HIFl)转录活 性的另一种核抑制剂。通过抑制Crml阻断COMMDl的核输出导致NF-kB和HIFl转录活性 的抑制提高（Muller 2009)。 Crml还介导类视黄醇X受体a (RXR α )转运。RXR α在肝脏中高度表达并且在调 节胆汁酸、胆固醇、脂肪酸、类固醇以及异生物质代谢和体内稳态中发挥主要作用。在肝脏 发炎期间，主要由于炎症介导的通过Crml的RXRa核输出所致，核RXRa水平明显降低。 Lep B能够防止IL-I β诱导的细胞质RXRa水平在人类肝源性细胞中的增加 （Zimmerman 2006)。 Crml-介导的核输出在NF-kB、HIF-I和RXRa信号传导中的作用提示，阻断核输 出可在多个组织和器官间的许多炎性过程中可能有益，所述多个组织和器官包括脉管系统 (脉管炎，动脉炎，风湿性多肌痛，动脉粥样硬化）、皮肤病的（参见上面）、风湿病的（类风 湿和相关的关节炎，牛皮癣关节炎，脊椎关节病，结晶性关节病，系统性红斑狼疮，混合结缔 组织病，肌炎综合征，皮肌炎，包含体肌炎，未分化结缔组织病，Sjogren氏综合征，硬皮病和 重叠综合征，等等）。 CRMl抑制通过抑制/激活一系列转录因子如ICp27、E2F4、KLF5、YAPl、ZAP来影响 基因表达。 Crml抑制在许多皮肤病综合征间具有潜在的治疗效果，包括炎性皮肤病（异位性 皮炎，过敏性皮炎，化学性皮炎，牛皮癣）、晒伤（紫外线/紫外损伤）和感染。CRMl抑制， 用LMB研究得最好，显示了对正常角化细胞的效果甚微，而对受到紫外、TNFa或其他炎性 刺激的角化细胞发挥抗炎活性（Kobayashi&Shinkai 2005，Kannan&本文档来自技高网...

【技术保护点】
式I的化合物：或其药学上可接受的盐，其中：R1选自氢和C1‑C4烷基；R2选自O和S；和R3选自‑N(R4)‑(C3‑C6环烷基)、‑C1‑C6烷基、‑(C0‑C4亚烷基)‑杂环基、和‑(C0‑C4亚烷基)‑杂芳基，其中R3的任何烷基、亚烷基、杂环基和杂芳基部分任选地和独立地被取代；并且R4选自氢和C1‑C4烷基。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.05.09 US 61/644,802;2013.03.15 US 61/798,1881. 式I的化合物：或其药学上可接受的盐，其中： Ri选自氨和C1-C4焼基； R2选自0和S ;和 R3选自-N(R4) - (Cs-Ce环焼基）、-Ci-Ce焼基、-(〇rC4亚焼基）-杂环基、和-(〇rC4亚焼 基）-杂芳基，其中R3的任何焼基、亚焼基、杂环基和杂芳基部分任选地和独立地被取代；并 且 R4选自氨和C1-C4焼基。2. 权利要求1的化合物，其中Ri选自氨和甲基。3. 权利要求2的化合物，其中Ri是氨。4. 权利要求1-3任一项的化合物，其中R2是0。5. 权利要求1-4任一项的化合物，其中R4是氨。6. 权利要求1-5任一项的化合物，其中R3选自-N (的-(Cs-Ce环焼基）、-Cs-Ce焼 基、-(QrCi亚焼基）-杂环基、和-(QtC4亚焼基）-杂芳基，其中： R3的任何焼基或亚焼基部分任选地和独立地被选自氧代和-N(R5) 2的一个或多个取代 基取代，其中每个R5独立地选自氨和C1-C4焼基； R3的任何杂环基部分在环中包含至少一个氮原子，并且任选被选自C1-C4焼基和氧代 的一个或多个取代基取代；和 R3的任何杂芳基部分在环中包含至少一个氮原子，并且任选被一个或多个C1-C4焼基 取代。7. 权利要求6的化合物，其中R3是-(C。-。亚焼基）-杂环基。8. 权利要求7的化合物，其中R3是- (Cl亚焼基）-杂环基。9. 权利要求7或权利要求8的化合物，其中所述杂环基选自化嗦基、脈巧基、吗晰基和 化哇基。10. 权利要求9的化合物，其中所述杂环基是吗晰基，R3选自-C(CH3)3、-NH-环丙 基、-C&-化嗦-2-基、-化嗦-2-基、-C&-吗晰-4-基、和5-甲基-1-H-化哇-4-基。11. 权利要求1-5任一项的化合物，其中R3的任何焼基、亚焼基、杂环基和杂芳基部分 任选地和独立地被选自-0H、-甜、硝基、团素、氨基、氯基、Ci-Ci2焼基、C2-C12帰基或C2-C12快 基、Ci-C。焼氧基、Ci-C。团代焼基、Ci-C。团代焼氧基和Ci-C。焼硫基中的一个或多个取代 基取代。12. 权利要求1-5任一项的化合物，其中R3的任何焼基、亚焼基、杂环基和杂芳基部分 任选地和独立地被具有式-N(R 5) 2的氨基取代，其中每个R5独立地选自氨和C1-C4焼基。13. 权利要求1-5任一项的化合物，其中：R3的任何杂芳基部分任选地和独立地被选自-OH、-甜、硝基、团素、氨基、氯基、Ci-C。焼 基、C2-C。帰基、C2-C。快基、Ci-C。焼氧基、Ci-C。团代焼基、Ci-C。团代焼氧基和Ci-C。焼硫 基中的一个或多个取代基取代；和 R3的任何焼基、亚焼基或杂环基部分任选地和独立地被选自氧代、-0H、-SH、硝...

【专利技术属性】
技术研发人员：V·P·桑达纳亚卡，S·谢克特尔，S·沙查姆，D·麦考利，E·巴罗格鲁，
申请(专利权)人：卡尔约药物治疗公司，
类型：发明
国别省市：美国;US