包含非离子等渗剂的佐剂组合物制造技术

技术编号:11072890 阅读:108 留言:0更新日期:2015-02-25 12:05
提供了包含在脂质体制剂中的TLR-4激动剂和皂苷、以及非离子等渗剂的佐剂和免疫原性组合物,其中氯化钠的浓度或离子强度小于100mM。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及包含非离子等渗剂且具有低浓度的盐,特别是具有以100mM或低于100mM的氯化钠浓度的水性佐剂组合物。本专利技术还涉及包含抗原或抗原性制剂和所述水性佐剂组合物的免疫原性组合物。
技术介绍
佐剂有时用于改善对于任何给定抗原产生的免疫应答。然而,佐剂包括到疫苗或免疫原性组合物内增加组分制备的复杂性以及疫苗组合物的分布和配制的复杂性。佐剂组分和抗原组分各自的制备必须由配制者加以考虑。特别地,应考虑抗原组分与佐剂组分的相容性。这特别是其中冻干抗原或抗原性制剂预期用佐剂制剂重构的情况。在此类情况下,重要的是佐剂制剂的缓冲液适合于抗原或抗原性制剂,并且抗原的免疫原性或可溶性不受佐剂影响。专利技术概述本专利技术人已发现某些抗原对称为“盐析”的现象特别敏感,所述盐析可以定义为通过用盐例如氯化钠饱和从其溶液中沉淀蛋白质。本专利技术人已发现在低至150mM的氯化钠浓度时,敏感抗原可以聚集且沉淀。因此,本专利技术提供了包含在脂质体制剂中Toll样受体(TLR)4激动剂和皂苷,以及非离子等渗剂的水性等渗佐剂组合物,其中所述组合物中氯化钠的浓度小于100mM。本专利技术进一步提供了包含在脂质体制剂中的TLR-4激动剂和皂苷,以及非离子等渗剂的水性等渗佐剂组合物,其中所述组合物中的离子强度小于100mM。此外,本专利技术提供了可以用于更广泛范围的蛋白质抗原的水性等渗佐剂组合物,所述蛋白质抗原包括对“盐析”敏感的那些以及不敏感的那些。本专利技术还提供了包含抗原或抗原性制剂和水性佐剂组合物的免疫原性组合物和用于制备所述免疫原性组合物的方法,所述水性佐剂组合物包含在脂质体制剂中的TLR-4激动剂和皂苷,以及非离子等渗剂,其中所述佐剂组合物中氯化钠的浓度小于100mM。附图简述图1. QS21裂解活性曲线。图2. 在不同ASA制剂中每种3D-MPL同源物(congener)的百分率。图3. 用于PRAME/CpG冻干的冷冻干燥循环。图4. 在ASA(150mM NaCl)和ASA(山梨醇)中重构的PRAME和NYESO-1之间的图示比较。图5. 在实验1中用不同佐剂组合物配制的PRAME/CpG免疫接种的小鼠的体液应答。图6. 在实验1中用不同佐剂组合物配制的PRAME/CpG免疫接种的小鼠中的肿瘤保护。图7. 在实验2中用ASA(150mM NaCl)、ASA(山梨醇)或液体制剂ASA(70mM NaCl)配制的PRAME/CpG免疫接种的小鼠的体液应答。图8. 在实验2中用ASA(150mM NaCl)、ASA(山梨醇)或液体制剂ASA配制的PRAME/CpG免疫接种的小鼠的CD4+应答。图9. 在实验2中用ASA(150mM NaCl)、ASA(山梨醇)或液体制剂ASA配制的PRAME/CpG免疫接种的小鼠中的肿瘤保护。专利技术详述本专利技术描述了用非离子等渗剂的替换或部分替换在水性佐剂组合物中的等渗剂,所述等渗剂为盐例如氯化钠。众所周知对于肠胃外施用,溶液应是生理学等渗的(即具有药学可接受的摩尔渗透压浓度)以避免细胞畸变或裂解。“等渗剂”是生理学耐受的且对制剂(例如本专利技术的免疫原性组合物)赋予合适张力的化合物,以预防水跨越与制剂接触的细胞膜的净流动。包含100 mM氯化钠或更多的水性佐剂组合物是已知的,例如在WO 2005/112991和WO2008/142133中的佐剂系统A(ASA)或在WO2007/068907中公开的脂质体佐剂。如WO2008/142133中所示,此类佐剂组合物可以用作稀释剂,以在疫苗接种前重构包含抗原或抗原性制剂的冻干组合物。重要的是此类重构的组合物是等渗的,即含有与机体和血液的细胞中发现的基本上相同的盐浓度,从而使得在注射时不引起细胞皱缩或扩张。一般地,氯化钠用作等渗剂。本专利技术人已发现某些抗原对“盐析”特别敏感,即当在溶液中含有高浓度的盐时,在溶液中的蛋白质聚集或凝固(coagulate)的过程。蛋白质抗原聚集时的盐浓度在蛋白质之间不同。本专利技术人已鉴定了在相对低的盐浓度时,例如在约100mM或更少的氯化钠时,将聚集的一组抗原。这意味着某些已知佐剂组合物不适合于重构包含这些抗原的组合物或与包含这些抗原的组合物一起使用,因为聚集发生。本专利技术提供了可以与此类抗原一起使用的水性佐剂组合物,所述抗原即在低于100mM氯化钠的盐浓度时聚集的那些抗原。本专利技术的水性佐剂组合物包含在脂质体制剂中的TLR-4激动剂和皂苷,以及非离子等渗剂,其中佐剂组合物中氯化钠的浓度低于约100mM,例如低于90mM、80mM、70mM、60mM、50mM、40mM、30mM、20 mM或15 mM。在一个具体实施方案中,佐剂组合物中氯化钠的浓度低于10mM或在或低于5mM。在一个进一步具体实施方案中,佐剂组合物基本上不含氯化钠。基本上不含意指氯化钠的浓度在或非常接近于0 mM(即1mM、2mM或3mM)。使用已知技术和试剂盒,技术人员可以容易地测试钠(Na+)和氯(Cl-)离子的浓度。例如,钠可以使用试剂盒例如来自Biosupply的钠酶促测定试剂盒(目录号:BQ011EAEL)进行测定。氯化物可以使用试剂盒例如来自Biosupply的氯化物酶促测定试剂盒(目录号:BQ006EAEL)进行测定。本专利技术进一步提供了包含在脂质体制剂中的TLR-4激动剂和皂苷,以及非离子等渗剂的水性等渗佐剂组合物,其中离子强度小于100mM,例如低于90mM、80mM、70mM、60mM、50mM、40mM、30mM、20 mM或15 mM。在一个具体实施方案中,佐剂组合物中的离子强度低于10mM或在或低于5mM。在一个进一步具体实施方案中,佐剂组合物具有在或非常接近于0 mM的离子强度。本专利技术的佐剂或免疫原性组合物的离子强度可以使用技术人员已知的技术例如使用电导仪进行测量。用于在与抗原组合物组合的本专利技术的水性佐剂组合物中使用的合适的非离子等渗剂将需要适合于在人中使用,以及与抗原组合物内的抗原相容且与佐剂组合物的其他组分进一步相容。特别地,水性佐剂组合物必须是这样的,使得当与佐剂组合物组合时,抗原组合物内的抗原能够保留在溶液中且保留其免疫原性。在本专利技术的一个实施方案中,合适的非离子等渗剂是多元醇、糖(特别是蔗糖、果糖、右旋糖或葡萄糖)或氨基酸例如甘氨酸。在一个实施方案中,多元醇是糖醇特别是C3-6糖醇。示例性糖醇包括甘油、赤藓醇、苏糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、核糖醇、山梨醇、甘露醇、卫矛醇和艾杜糖醇。在这个实施方案的具体例子中,合适的非离子等渗剂是山梨醇。在本专利技术的一个具体实施方案中,本专利技术的组合物中的非离子等渗剂是蔗糖和/或山梨醇。在一个实施方案中,在水性佐剂组合物内多元醇的合适浓度是约3 - 约15%(w/v),特别是约3 - 约10%(w/v),例如约3 - 约7 %(w/v),例如约4 - 约6%(w/v)。在这个实施方案的具体例子中,多元醇是山梨醇。水性佐剂组合物包含在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水性佐剂组合物,其包含:(a)在脂质体制剂中的TLR‑4激动剂和皂苷;和(b)非离子等渗剂,其中所述佐剂组合物中氯化钠的浓度或离子强度小于100mM。

【技术特征摘要】
2009.06.10 GB 0910046.21.一种水性佐剂组合物,其包含:(a)在脂质体制剂中的TLR-4激动剂和皂苷;和(b)非离子等渗剂,其中所述佐剂组合物中氯化钠的浓度或离子强度小于100mM。
2.如权利要求1中要求的水性佐剂组合物,其中所述氯化钠的浓度或离子强度小于80mM。
3.如权利要求2中要求的水性佐剂组合物,其中所述氯化钠的浓度或离子强度小于30mM。
4.如权利要求3中要求的水性佐剂组合物,其中所述氯化钠的浓度或离子强度小于10mM。
5.如权利要求4中要求的水性佐剂组合物,其中所述氯化钠的浓度或离子强度小于5mM。
6.如权利要求5中要求的水性佐剂组合物,其基本上不含氯化钠。
7.根据任一前述权利要求的水性佐剂组合物,其中所述非离子等渗剂是多元醇。
8.根据权利要求7的水性佐剂组合物,其中所述多元醇是山梨醇。
9.权利要求8的水性佐剂组合物,其中所述山梨醇的浓度是约3%- 约15%(w/v)。
10.权利要求9的水性佐剂组合物,其中所述山梨醇的浓度是约4%- 约10%(w/v)。
11.任一前述权利要求的水性佐剂组合物,其中所述TLR-4激动剂是3D-MPL。
12.根据任一前述权利要求的水性佐剂组合物,其中所述皂苷是QuilA或其衍生物。
13.根据权利要求12的水性佐剂组合物,其中所述QuilA的衍生物是QS21。
14.根据任一前述权利要求的水性佐剂组合物,其包含约5mM氯化钠和5%- 6%w/v山梨醇。
...

【专利技术属性】
技术研发人员:V亨德里克斯DI勒穆瓦纳
申请(专利权)人:葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司
类型:发明
国别省市:比利时;BE

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