一种侧链修饰的长效GLP‑1类似物的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了所述GLP‑1类似物具有下列通式A：

【技术实现步骤摘要】
一种侧链修饰的长效GLP-1类似物的制备方法及其应用
本专利技术涉及糖尿病相关的药物领域，具体而言，本专利技术涉及一种具有侧链的胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类的体内半衰期的GLP-1类似物。本专利技术还涉及该GLP-1类似物的制备方法以及其在制备糖尿病药物中的应用。
技术介绍
本专利技术涉及的GLP-1(glucagon-likepeptide-1，以下简称：GLP-1)是主要由小肠L细胞分泌的一种37个氨基酸组成的多肽，其活性形式为GLP-1(7-37)OH和GLP-1(7-36)NH2(MojsovS,JClinInvest.1987Feb；79(2):616-9)。GLP-1明显减低人用餐后的血糖，能刺激胰岛素的产生，同时还能起到一定减肥效应，并且不会引起低血糖症(DruckerDJ,Diabetes.1998Feb；47(2):159-69)。近期研究还表明GLP-1有胰腺再生作用(DruckerDJ,2003Dec；144(12):5145-8)。此外，因为GLP-1为完全人源化多肽，作为临床药物在安全上具有较大优势。然而，GLP-1(7-37)的血清半衰期仅仅为3-5分钟，每天多次注射给药在临床使用中非常不方便。目前已经有不少研究采用GLP-1类似物融合蛋白技术解决GLP-1类似物在体内的存留时间(CN90101167.3、CN200710018734.2、CN200410054397.9、CN01820232.2、CN200380110152.7、CN200510039265.3、CN200610127237.1、CN200910009642.7)，然而，现有的技术与临床理想的目标还有很大距离,普遍都还没有达到临床标准,最近NovoNorisk生产的利拉鲁肽为GLP-1类似物,其对GLP-1进行了棕榈酸的修饰,并于2009年于美国上市。但是利拉鲁肽也存在半衰期短的问题，其剂型仍需每日注射。因此，目前存在对解决GLP-1体内半衰期短的方法的需求。
技术实现思路
除非另外指出，本文所述的“Fmoc策略”是指以聚合物树脂作为固相反应基质，将氨基端Fmoc保护的氨基酸在偶联试剂的存在下依次缩合，从而合成多肽的合成方法。其具体方法参见Fmocsolidphasepeptidesynthesis:apracticalapproach,2000,OxfordUniversityPress.本专利技术的一个目的是针对临床上GLP-1类似物在体内存留时间较短，需要每天注射给药的缺限，提供一种半衰期较长的GLP-1的类似物。本专利技术的另一个目的是提供一种GLP-1类似物在制备治疗糖尿病的药物中的应用，以及该GLP-1类似物在制备治疗和/或预防肥胖症的药物中的应用。本专利技术的又一个目的是提供一种以GLP-1类似物作为有效成分的药用组合物，其包含上述GLP-1类似物。其中，所述的药物组合物还包含一种或多种药学上可接受的辅料,并且所述药物组合物优选为注射剂，进一步优选为冻干粉针或溶液注射剂。用于实现上述目的的技术方案如下：一方面，本专利技术提供一种GLP-1类似物，所述GLP-1类似物具有下列通式：7HAEGTFX13SDVSSYX20EX22QAAX26EFIAWLVKGRG37其中，X13为苏氨酸或侧链修饰的赖氨酸(K-nX)，X20为亮氨酸或侧链修饰的赖氨酸(K-nX)，X22为甘氨酸或侧链修饰的赖氨酸(K-nX)，X26为赖氨酸(K-NH2)或侧链修饰的赖氨酸(K-nX)；X13、X20，X22和X26中有且只有一个为侧链修饰的赖氨酸(K-nX)，其中n＝4～10，X为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸。所述的具有通式的GLP-1类似物，具有下列通式I：7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(nX)EFIAWLVKGRG37(I)其中n＝4～10，优选为n＝5～8；X为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；优选地，所述GLP-1类似物为：SEQIDNO1:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(GGGGG)EFIAWLVKGRG37；SEQIDNO2:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(GGGGGG)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO3:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(GGGGGGG)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO4:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(GGGGGGGG)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO5:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(AAAAA)EFIAWLVKGRG37；SEQIDNO6:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(AAAAAA)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO7:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(AAAAAAA)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO8:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(AAAAAAAA)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO9:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(VVVVV)EFIAWLVKGRG37；SEQIDNO10:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(VVVVVV)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO11:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(VVVVVVV)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO12:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(VVVVVVVV)EFIAWLVKGRG37。另外所述具有通式的GLP-1类似物，也可以具有下列通式II：7HAEGTFTSDVSSYLEK(nX)QAAKEFIAWLVKGRG37(II)其中n＝4～10，优选为n＝5～8；X为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；优选地，所述GLP-1类似物为：SEQIDNO13:7HAEGTFTSDVSSYLEK(GGGGG)QAAKEFIAWLVKGRG37；SEQIDNO14:7HAEGTFTSDVSSYLEK(GGGGGG)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO15:7HAEGTFTSDVSSYLEK(GGGGGGG)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO16:7HAEGTFTSDVSSYLEK(GGGGGGGG)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO17:7HAEGTFTSDVSSYLEK(AAAAA)QAAKEFIAWLVKGRG37；SEQIDNO18:7HAEGTFTSDVSSYLEK(AAAAAA)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO19:7HAEGTFTSDVSSYLEK(AAAAAAA)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO20:7HAEGTFTSDVSSYLEK(AAAAAAAA)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO21:7HAEGTFTSDVSSYLEK(VVVVV)QAAKEFIAWLVKGRG37；SEQIDNO22:7HAEGTFTSDVSSYLEK(VVVVVV)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO23:7HAEGTFTSDVSSYLEK(VVVVVVV)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO24:7HAEGTFTSDVS本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种GLP‑1类似物，所述GLP‑1类似物具有下列通式：7HAEGT FX13SDV SSY X20E X22QAA X26EFIAW LVKGR G37其中，X13为苏氨酸或侧链修饰的赖氨酸（K‑nX），X20为亮氨酸或侧链修饰的赖氨酸（K‑nX），X22为甘氨酸或侧链修饰的赖氨酸（K‑nX），X26为无侧链修饰的赖氨酸(K‑NH2)或侧链修饰的赖氨酸（K‑nX）；X13、X20，X22和X26中有且只有一个为侧链修饰的赖氨酸（K‑nX），其中n=4～10，X为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种GLP-1类似物，所述GLP-1类似物通式如下：7HAEGTFX13SDVSSYX20EX22QAAX26EFIAWLVKGRG37其中，X13为苏氨酸或侧链修饰的赖氨酸(K-nX)，X20为亮氨酸或侧链修饰的赖氨酸(K-nX)，X22为甘氨酸或侧链修饰的赖氨酸(K-nX)，X26为无侧链修饰的赖氨酸(K-NH2)或侧链修饰的赖氨酸(K-nX)；X13、X20，X22和X26中有且只有一个为侧链修饰的赖氨酸(K-nX)，其中n＝5～8，X为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸。2.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物通式为通式I所示：7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(nX)EFIAWLVKGRG37(I)其中n＝5～8；X为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸。3.如权利要求2所述的GLP-1类似物，选自：SEQIDNO1:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(GGGGG)EFIAWLVKGRG37；SEQIDNO2:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(GGGGGG)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO3:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(GGGGGGG)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO4:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(GGGGGGGG)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO5:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(AAAAA)EFIAWLVKGRG37；SEQIDNO6:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(AAAAAA)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO7:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(AAAAAAA)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO8:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(AAAAAAAA)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO9:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(VVVVV)EFIAWLVKGRG37；SEQIDNO10:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(VVVVVV)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO11:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(VVVVVVV)EFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO12:7HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(VVVVVVVV)EFIAWLVKGRG37。4.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物通式为通式II所示：7HAEGTFTSDVSSYLEK(nX)QAAKEFIAWLVKGRG37(II)其中n＝5～8；X为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸。5.如权利要求4所述的GLP-1类似物，选自：SEQIDNO13:7HAEGTFTSDVSSYLEK(GGGGG)QAAKEFIAWLVKGRG37；SEQIDNO14:7HAEGTFTSDVSSYLEK(GGGGGG)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO15:7HAEGTFTSDVSSYLEK(GGGGGGG)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO16:7HAEGTFTSDVSSYLEK(GGGGGGGG)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO17:7HAEGTFTSDVSSYLEK(AAAAA)QAAKEFIAWLVKGRG37；SEQIDNO18:7HAEGTFTSDVSSYLEK(AAAAAA)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO19:7HAEGTFTSDVSSYLEK(AAAAAAA)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO20:7HAEGTFTSDVSSYLEK(AAAAAAAA)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO21:7HAEGTFTSDVSSYLEK(VVVVV)QAAKEFIAWLVKGRG37；SEQIDNO22:7HAEGTFTSDVSSYLEK(VVVVVV)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO23:7HAEGTFTSDVSSYLEK(VVVVVVV)QAAKEFIAWLVKGRG37；或SEQIDNO24:7HAEGTFTSDVSSYLEK(VVVVVVVV)QAAKEFIAWLVKGRG37。6.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔维苓，郑学敏，王玉丽，徐为人，汤立达，龚珉，
申请(专利权)人：天津药物研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12