本发明专利技术提供了一种与口腔口咽鳞状细胞癌颈部淋巴结转移相关的标志物及其应用。所述标志物为GPD1L和/或HIF1α，特别是二者的组合。本发明专利技术中，通过检测GPD1L和/或HIF1α的表达水平，可进行口腔口咽鳞状细胞癌辅助诊断、口腔口咽鳞状细胞癌患者预后判断、和/或口腔口咽鳞状细胞癌颈部淋巴结转移预测。
【技术实现步骤摘要】
口腔口咽鱗状细胞癌的生物标志物及其应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种与口腔鳞状细胞癌和/或口咽鳞状细胞 癌颈部淋巴结转移预测相关的蛋白标志物及其应用。
技术介绍
在我国，口腔口咽癌90%以上为鳞状细胞癌，流行病学统计近年来有逐渐上升 的趋势。因位于呼吸道与消化道的重要位置，在人体语言、进食、呼吸方面都起到重要作 用，病变严重者可造成毁容、吞咽、咀嚼、发音等功能障碍，影响患者的生活质量，甚至危及 生命。口腔口咽鳞癌患者的诊断和治疗现状如下：①手术为主的治疗是唯一治愈手段， 该肿瘤对放化疗仅中度敏感；②尽管诊断和治疗手段不断进步，长期生存率始终徘徊在 50% -60%，很难继续改善；③颈部淋巴结转移是口腔口咽鳞癌患者最重要的预后因子；④ 约30% -40%的患者在初次就诊时已伴有颈部淋巴结转移；⑤目前尚无高效的临床及分子 标志物能够准确预测口腔口咽鳞癌颈部淋巴结转移。 近年来，随着对肿瘤发病机制和生物学行为认识的提高，已经证实口腔鳞癌颈部 转移的内因是分子水平异常的结果，诊断和治疗新策略的产生有赖于对颈部转移生物学行 为相关的功能基因和蛋白进行全面、系统的研究。在后基因组时代，认识到蛋白是身体的役 马（work horse)。不同代谢途径都是通过蛋白来表现。因此，可以使用在口腔口咽鳞癌早 期表达的独特且特异的蛋白作为生物标志物，通过引入分子分型诊断方法辅助临床筛选颈 部淋巴结转移高危患者，从而为开发新的颈部转移诊断技术，为患者个体化外科治疗提供 坚实的基础。随着人类基因组计划的完成和微阵列技术的出现，国内外学者利用基因芯片 技术对多种恶性肿瘤（如前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌、甲状腺癌等） 进行基因表达谱分析，分别筛选出了多个可能与恶性肿瘤发生、发展密切相关的候选基因； 对这些肿瘤相关基因功能的深入研究和最终确定，能在一定程度上揭示肿瘤发生、发展的 分子机制，为癌症新型诊断方法、药物治疗靶点设计和预后预测提供研究基础。2007年以 来，国际上已经有多个实体肿瘤（包括前列腺癌、乳腺癌等）的分子诊断/分子分型商品化 试剂盒上市，大多已经通过FDA认证；然而到目前为止，口腔口咽鳞癌转化医学领域尚无有 效的商品化分子诊断产品问世，口腔口咽鳞癌的个体化诊断和治疗迫切需要对新的关键基 因进行深入的研究。 缺氧诱导因子la (HIF-la)作为肿瘤乏氧调控的核心成员，一些证据表明 HIF-la与肿瘤的生长、侵袭、转移密切相关，其过表达可明显促进肿瘤的转移（Tsai Y P, Wu K J. Hypoxia-regulated target genes implicated in tumor metastasis, J Biomed Sci，2012, 19:102 ;Vered M, Dayan D，Yahalom R，et al. Cancer-associated fibroblasts and epithelial-mesenchymal transition in metastatic oral tongue squamous cell carcinoma, Int J Cancer, 2010, 127(6) :1356-1362 ；Yang Μ H, Wu Μ Z,Chiou S H, et al.Direct regulation of TWIST by HIF-lalpha promotes metastasis，Nat Cell Biol，2008, 10(3) :295-305);然而，也有许多研究表明，HIF-Ια在许多肿瘤中表达与转移 无明显相关性，甚至有报道该分子可以启动凋亡，某些条件下和特定肿瘤中具有抑癌作用 (Cabanillas R, Rodrigo JP, Secades P,et al. The relation between hypoxia-inducible factor(HIF)-lalpha expression with p53expression and outcome in surgically treated supraglottic laryngeal cancer. J Surg Oncol. 2009,99(6) :373-8 ;Fillies T, Werkmeister R, van Diest PJ，et al. HIFl-alpha overexpression indicates a good prognosis in early stage squamous cell carcinomas of the oral floor BMC Cancer. 2005,21 ;5:84 ;Munipalle PC，Viswanath YK，Davis PA，et al. Prognostic value of hypoxia inducible factor lain esophageal squamous cell carcinoma.Dis Esophagus. 2011，24(3) :177-81)。这与HIF-1 α在肿瘤特定时空条件下发挥作用的特定信 号通路和其上下游调控分子密切相关。 现有技术中未发现能用于预测口腔口咽鳞癌颈部淋巴结转移且具有高敏感度和 特异度的生物标志物。
技术实现思路
本专利技术的主要目的在于提供一种能用于预测口腔口咽鳞癌颈部淋巴结转移的生 物标志物，并提供所述的生物标志物及其相关检测试剂的应用，特别是用于口腔口咽鳞状 细胞癌辅助诊断、口腔口咽鳞状细胞癌患者预后判断、和/或口腔口咽鳞状细胞癌颈部淋 巴结转移预测，具有高敏感度和特异度。 为了寻找一种能用于预测口腔口咽鳞癌颈部淋巴结转移的生物标志物，本案专利技术 人在前期课题研究中基因表达谱芯片筛选基础之上，运用生物信息学方法，经统计学分析 初步筛选出78个口腔鳞癌相关基因，并经进一步的摸索实验及分析研究，发现了 GPD1L基 因是一个新的口腔鳞癌下调基因，其在口腔口咽鳞癌组织中表达明显下调。此后在对120 例口腔鳞癌和120例正常口腔黏膜组织标本中78个口腔鳞癌相关基因的real-time PCR 检测中，发现GPD1L基因在97. 6%的口腔鳞癌组织中表达下调，且经研究发现GPD1L与 HIF-la调控密切相关，GPD1L与HIFla基因表达水平呈现明显负相关。最终确定了 GPD1L 与HIF-1 a可以作为口腔口咽鳞状细胞癌辅助诊断、口腔口咽鳞状细胞癌患者预后判断、 和/或口腔口咽鳞状细胞癌颈部淋巴结转移预测的生物标志物。 本专利技术中，除明确说明外，所述GPD1L包括GPD1L基因和/或GPD1L蛋白；所述 HIF-la包括HIF-la基因和/或HIF-la蛋白。所述口腔口咽鳞状细胞癌包括口腔鳞状 细胞癌和/或口咽鳞状细胞癌。通常情况下，所述的高表达、低表达是相对于正常人 相应组织中的表达水平而言。 GPD1L基因定位于人染色体3p22. 3区段，与甘油-3-磷酸脱氢酶基因具有84% 的同源序列，包含8个外显子。该基因最初于2002年哺乳动物基因组计划时被发现， 但当时并不了解G本文档来自技高网...
【技术保护点】
检测GPD1L和/或HIF1α的表达水平的试剂在制备用于口腔口咽鳞状细胞癌辅助诊断、口腔口咽鳞状细胞癌患者预后判断、和/或口腔口咽鳞状细胞癌颈部淋巴结转移预测的组合物中的应用。
【技术特征摘要】
1. 检测GPD1L和/或HIFla的表达水平的试剂在制备用于口腔口咽鳞状细胞癌辅助 诊断、口腔口咽鳞状细胞癌患者预后判断、和/或口腔口咽鳞状细胞癌颈部淋巴结转移预 测的组合物中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其中，检测GPD1L和/或HIF1 a的表达水平包括检测 GPD1L和/或HIFla的基因表达水平，或者检测GPD1L和/或HIFla的蛋白表达水平。3. 根据权利要求1所述的应用，其中，检测GPD1L和/或HIFla的表达水平包括采用 免疫组化方法检测来自待测个体的石蜡组织切片中GPD1L蛋白表达水平和/或HIF1 a蛋 白表达水平。4. 根据权利要求3所述的应用，其中， GPD1L蛋白表达水平按以下公式计算评分，并以GPD1L蛋白表达评分100作为阈值，评 分〈100为低表达，评分> 100为高表达： GPD1L蛋白表达评分=PXIX100， 其中：P为检测样本切片的阳性表达面积百分比， I为染色强度评分，阴性或弱阳性为1，阳性为2,强阳性为3 ; HIFla蛋白表达水平是以10%细胞核阳性作为阈值，阳性细胞核〈10%为低表达，阳 性细胞核彡10 %为高表达。5. 根据权利要求1所述的应用，其中： HIFla高表达个体的口腔口咽鳞状细胞癌颈部淋巴结转移风险高于HIFla低表达个 体；GPD1L低表达个体的口腔口咽鳞状细胞癌颈部淋巴结转移风险高于GPD1L高表达个体； GPD1L低表达且HIF1 a高表达个体的口腔口咽鳞状细胞癌颈部淋...
【专利技术属性】
技术研发人员：冯芝恩，郭传瑸，
申请(专利权)人：北京大学口腔医学院，
类型：发明
国别省市：北京;11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。