一种快速鉴别胎儿弯曲菌和性病亚种的方法和试剂盒技术

本发明专利技术公开一种快速鉴别胎儿弯曲菌和性病亚种的方法和试剂盒。该方法通过以待检样品的基因组DNA为模板，在qPCR反应体系中还加入如SEQ ID NO.1、2、4和5所示的引物和如SEQ ID NO.3和6所示的探针进行双重实时荧光定量PCR，Ct值<35为阳性；35～40为可疑，需要重复试验一次；>40为阴性。实现该方法的试剂盒主要包括上述引物和探针。本发明专利技术具有如下优点：能极大地缩短检测时间，只需要1天时间即可完成整个检测；操作更加简单，只需要提取核酸和荧光PCR，无需额外操作；一次性能对待检样品进行胎儿弯曲菌和性病亚种的定性和定量检测；灵敏度高，结果准确可靠。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速鉴别胎儿弯曲菌和性病亚种的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)设计双重实时荧光定量PCR的引物和探针：①胎儿弯曲菌的检测引物和探针：Sap‑F：5’‑GGTGGAGAATTTACTGATAG‑3’；Sap‑R：5’‑GCCTTAGCCTCAAATATAG‑3’；Sap‑P：5’‑FAM‑TTAGACTCAGCACTACCGCCATT‑BHQ1‑3’；②胎儿弯曲菌性病亚种检测引物：Par‑F：5’‑GTGGATCGGCATCTACTA‑3’；Par‑R：5’‑ATCGCAATCTGCAATGAA‑3’；Par‑P：5’‑HEX‑TATCATCGCCGACGAGTGCC‑BHQ1‑3’；(2)提取待检样品中的基因组DNA；(3)以步骤(2)得到的基因组DNA为模板，加入步骤(1)的引物和探针，进行双重实时荧光定量PCR；(4)结果判断：Ct值<35为阳性；35～40为可疑，需要重复试验一次；>40为阴性。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：侯水平，吴新伟，陈守义，杨智聪，
申请(专利权)人：广州市疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：广东;44