用高效液相色谱法测定依巴斯汀有关物质的方法技术

本申请提供了一种用高效液相色谱法测定依巴斯汀有关物质的方法，所述方法包括以下步骤：a.配制供试样品溶液：将待测样品用溶剂配制成供试样品溶液；b.检测：以十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填料，以磷酸盐缓冲溶液和有机溶剂的混合液作为流动相A、以所述有机溶剂作为流动相B，采用梯度洗脱法，检测所述供试样品溶液，检测波长为200-220nm。使用本申请提供的高效液相色谱法检测依巴斯汀原料药成分的方法，能够快速、有效、准确和可靠的分离检测出依巴斯汀原料药中有关物质。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本申请提供了一种，所述方法包括以下步骤：a.配制供试样品溶液：将待测样品用溶剂配制成供试样品溶液；b.检测：以十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填料，以磷酸盐缓冲溶液和有机溶剂的混合液作为流动相A、以所述有机溶剂作为流动相B，采用梯度洗脱法，检测所述供试样品溶液，检测波长为200-220nm。使用本申请提供的高效液相色谱法检测依巴斯汀原料药成分的方法，能够快速、有效、准确和可靠的分离检测出依巴斯汀原料药中有关物质。【专利说明】
本专利技术涉及化学领域，具体而言，涉及一种用高效液相色谱法测定依巴斯汀有关 物质的方法。
技术介绍
依巴斯汀邮&8^1^)，化学名称为：1--4--1- 丁酮，是一组胺H1受体阻断剂，被广泛用于治疗荨麻疹，过敏性 鼻炎，湿疹等治疗。 依巴斯汀原料药的成分是明确的，主要包含依巴斯汀及8种相关杂质，将这9种物 质彻底的快速的分离十分重要。 现有的依巴斯汀有关物质高效液相分析方法有： 欧洲药典（EP8. 0)，采用乙腈-磷酸-氢氧化钠溶液（pH5. 0)等度洗脱，分析时间 周期长达3个小时，主峰约110分钟出峰，且拖尾严重，测定很不方便，不利于实际推广应 用； 国家药品标准方法，采用甲醇-醋酸铵缓冲液（pH3. 9)为流动相，检测波长为 254nm，但该波长下个别杂质无吸收，且杂质无法达到有效分离，不能准确检测杂质； 中国专利CN102095808所描述的方法采用三乙胺的磷酸盐缓冲溶液（pH6. 5? 10. 8)为流动相，存在峰型钝且拖尾、杂质无法有效分离、优选的250nm波长下杂质不能完 全被检测。 因此，需要对依巴斯汀有关物质分析方法进行改进，建立一个快速、有效的检测方 法，以区分并检测出依巴斯汀原料药内的所有相关物质。
技术实现思路
本专利技术提供了一种，以解决上述 问题。 本专利技术是这样实现的： 一种，所述方法包括以下步骤： a.配制供试样品溶液：将待测样品用溶剂配制成供试样品溶液； b.检测：以十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填料，以磷酸盐缓冲溶液和有机溶 剂的混合液作为流动相A、以所述有机溶剂作为流动相B，采用梯度洗脱法，检测所述供试 样品溶液，检测波长为200-220nm。 优选的，所述磷酸盐缓冲溶液由磷酸盐水溶液用磷酸调节pH值后加入适量十二 烧基硫酸纳制成。 优选的，所述磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸氢二钾和磷酸氢二铵的一种。 优选的，所述磷酸盐水溶液的浓度为0· 005?0· 05mol/L。 优选的，所述pH值为5. 8?7. 0,所述十二烷基硫酸钠的量为1. 52?2. 30g。 优选的，所述供试样品溶液的浓度为1. 0?3. Omg/ml。 更为优选的，所述供试样品溶液的浓度为2. Omg/ml。 优选的，所述检测波长为210nm。 优选的，步骤a中所述溶剂为乙腈水溶液，其比例为乙腈：水=75:25 ;步骤b中所 述有机溶剂为乙腈或甲醇。 优选的，所述步骤b中检测的流速的范围为0. 9?1. lml/min,柱温的范围为35? 40°C，进样量为10μ 1。 使用本申请提供的一种，能够带 来以下有益效果： 第一，缩短检测分析的周期，节约检测的时间；第二，能够有效分离杂质，检测出峰 无拖尾，检测准确度高；第三，操作简便，适于实际应用和推广。 【专利附图】【附图说明】 图1示出了本申请实施例1提供的检测结果的HPLC图谱； 图2示出了本申请实施例2提供的检测结果的HPLC图谱； 图3示出了本申请实施例3提供的检测结果的HPLC图谱； 图4示出了本申请实施例4提供的检测结果的HPLC图谱； 图5示出了本申请实施例5提供的检测结果的HPLC图谱； 图6示出了本申请实施例6提供的检测结果的HPLC图谱； 图7示出了本申请实施例7提供的检测结果的HPLC图谱； 图8示出了本申请实施例8提供的检测结果的HPLC图谱； 图9示出了本申请实施例9提供的检测结果的HPLC图谱； 图10示出了本申请实施例10提供的检测结果的HPLC图谱； 图11示出了本申请实施例11提供的检测结果的HPLC图谱； 图12示出了本申请实施例12提供的检测结果的HPLC图谱； 图13示出了本申请实施例13提供的检测结果的HPLC图谱； 图14示出了本申请实施例14提供的检测结果的HPLC图谱； 图15示出了本申请比较例1提供的检测结果的HPLC图谱； 图16示出了本申请比较例2提供的检测结果的HPLC图谱； 图17示出了本申请比较例3提供的检测结果的HPLC图谱； 图18示出了本申请比较例4提供的检测结果的HPLC图谱； 图19示出了本申请比较例5提供的检测结果的HPLC图谱； 图20示出了本申请实施例15提供的检测结果的HPLC图谱； 图21示出了本申请磷酸盐缓冲溶液中未加入十二烷基硫酸钠的检测结果的HPLC 图谱； 图22示出了本申请磷酸盐缓冲溶液中加入十二烷基硫酸钠的检测结果的HPLC图 谱。 【具体实施方式】 下面结合实施例对本申请作进一步的详细说明。可以理解的是，此处所描述的具 体实施例仅用于解释本申请，而非对本申请的限定。 本专利技术的目的是探索依巴斯汀有关物质高效液相色谱分析的各种条件，提供一个 简便、可靠的依巴斯汀有关物质高效液相色谱分析方法。 本专利技术立足于高效液相色谱分析方法，专利技术并采用本领域内技术人员意料不到的 流动相、添加物和色谱柱等条件，针对现有技术存在的分离不彻底、峰形拖尾严重、检测时 间长等缺点，采用新的缓冲液体系以及流动相比例，使杂质能够完全分离，解决了现有技术 的相关问题；且本专利技术提供的方法经专属性、灵敏度等方法学研究及验证，其验证结果均在 可接受范围；本专利技术同现药典、标准及文献方法进行专属性、灵敏度等对比研究，证明其方 法更能有效地控制本品有关物质。 本申请提供一种，所述方法包括 以下步骤： a.配制供试样品溶液：将待测样品用溶剂配制成供试样品溶液； b.检测：以十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填料，以磷酸盐缓冲溶液和有机溶 剂的混合液作为流动相A、以所述有机溶剂作为流动相B，采用梯度洗脱法，检测所述供试 样品溶液，检测波长为200-220nm。 本专利技术采用不同于现有技术的色谱柱填料、缓冲溶液、流动相以及不同的梯度洗 脱，有效解决分离不彻底、检测时间长、峰形拖尾等技术问题；本专利技术提供的方法，能够使得 依巴斯汀原料药中的相关物质完全分离，检测时间短，峰形较好。 优选的，所述磷酸盐缓冲溶液由磷酸盐水溶液用磷酸调节pH值后加入适量十二 烧基硫酸纳制成。 本专利技术优选磷酸盐水溶液作为缓冲溶液且使用磷酸调节pH值。在缓冲溶液中加 入十二烷基硫酸钠，对于保证各个检测物质有效分离具有重要的意义。 优选的，所述磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸氢二钾和磷酸氢二铵的一种。 优选的，所述磷酸盐水溶液的浓度为0· 005?0· 05mol/L。 优选的，所述pH值为5. 8?7. 0,所述十二烷基硫酸钠的量为1. 52?2. 30本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用高效液相色谱法测定依巴斯汀有关物质的方法，所述方法包括以下步骤：a.配制供试样品溶液：将待测样品用溶剂配制成供试样品溶液；b.检测：以十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填料，以磷酸盐缓冲溶液和有机溶剂的混合液作为流动相A、以所述有机溶剂作为流动相B，采用梯度洗脱法，检测所述供试样品溶液，检测波长为200‑220nm。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：扈田进，张德伟，褚青松，郭蕾，贾志祥，秦雄剑，
申请(专利权)人：江苏联环药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32