本发明专利技术公开了一种综合氧化剂法测定总胆红素检测试剂盒。本发明专利技术的试剂盒由试剂1和试剂2以4:1组成的液体型双试剂。其中试剂1的各组分及浓度范围为：Tris-HCl缓冲液10~100mmol/L，表面活性剂0.1~5mmmol/L；试剂2的各组分及其浓度范围为：试剂2的各组分及其浓度范围为：磷酸盐缓冲液5~40mmol/ L，化学氧化剂0.2~6mmol/L。该总胆红素检测试剂盒具有氧化反应速度快，信号大，结果准确，抗干扰能力强的优点。
【技术实现步骤摘要】
总胆红素检测试剂盒
本专利技术涉及一种测定血清中总胆红素的试剂盒，具体讲是一种综合氧化剂法测定总胆红素的试剂盒。
技术介绍
总胆红素是人体内由血红素代谢产生的结合和非结合型胆红素的总称，主要用来诊断是否有肝脏疾病或胆道是否发生异常，总胆红素偏低的原因有可能是因为缺铁性贫血。因此，对人体的血清、血浆和尿液中总胆红素的测定，是医学检验最常规的项目之一。 总胆红素测定是肝、胆功能检查中的一项重要检测项目。目前测定血清胆红素的方法主要有重氮法、酶法。重氮法试剂不稳定，必须由亚硝酸钠和氨基磺酸临时配制，且保存时间较短；二是重氮试剂与间接胆红素和直接胆红素(DBIL)反应的特异性不佳，在一定条件下测定DBIL时，有少量的间接胆红素参与反应，如果反应时间延长，参与的更多，导致测定值不准。酶法价格较贵，而其中的胆红素氧化酶也易发生活性下降，影响测定的准确性。 化学氧化法有钒酸盐氧化法和亚硝酸盐氧化法。钒酸氧化法具有试剂稳定、反应稳定、抗干扰(Hb)能力强等特点，但釩酸盐法易受ALT\AST等离子的干扰，且釩离子为重金属，易污染环境。亚硝酸盐氧化法较钒酸氧化法更能减少因氧化反应产生的干扰。但钒酸盐法和亚硝酸盐法受间胆，如游离胆红素、δ -胆红素等的干扰，在临床上容易出现假阳性。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术存在的缺陷，提供一种氧化反应速度快，信号大，结果准确，抗干扰能力更强的总胆红素检测试剂盒。 实现本专利技术目的的技术方案是:提供一种总胆红素检测试剂盒，该试剂盒是由试剂I和试剂2组成的液体双试剂，其中试剂I的各组分及浓度范围为: Tris-HCl 缓冲液l(T100mmol/L 表面活性剂0.l~5_nol/L 试剂2的各组分及其浓度范围为: 磷酸盐缓冲液5~40mmol/L 化学氧化剂0.2~6mmol/L 作为优选，本专利技术所述的总胆红素检测试剂盒，其中试剂I的各组份及浓度范围为: Tris-HCl 缓冲液30~80mmol/L 表面活性剂0.8-3.lg/L 其中试剂2的各组分及其浓度范围为: 磷酸盐缓冲液12~35mmol/L 化学氧化剂0.8~3.2mmol/L 作为最优选，本专利技术所述的总胆红素检测试剂盒，其中试剂I的各组分及浓度范围为: Tris-HCl 缓冲液50mmol/L 表面活性剂2mmol/L 其中试剂2的各组分及其浓度范围为: 磷酸盐缓冲液18mmol/L 化学氧化剂2mmol/L 本专利技术的总胆红素的检测试剂盒，所述试剂I和试剂2的体积比为:4:1。 本专利技术的总胆红素的检测试剂盒试剂I和试剂2中的原料选择依据是: 在以上组分中，Tris-HCl缓冲液和磷酸盐缓冲液为试剂I和试剂2的缓冲液，利于试剂中各种成分的分散，它提高试剂的稳定性。表面活性剂，是反应的促进剂，可去除其它脂类杂质的影响，提高检测的灵敏度。化学氧化剂，是多种氧化剂相结合，并添加了相应的成份，它使得氧化反应的电子匹配能力更强，灵敏度更高。 本专利技术试剂盒试剂I和试剂2的配置方法为常规方法，即试剂I和试剂2分别加入蒸馏水后各自混合搅匀即可。 用本专利技术的试剂盒通过下列方法测定总胆红素，总胆红素在表面活性剂存在下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，由此测定450nm处吸光度的减少量，以求得样品中总胆红素的浓度。 应用本专利技术总胆红素检测试剂盒测定样本中总胆红素的测定方法如下:样本加试剂I混匀，3(T40°C反应3~5min后读取吸光度A1，加入试剂2混匀，3(T40°C反应3~5min后读取吸光度A2, Λ A= A2-A10其中样品用量8 μ L，试剂I用量200-300 μ L，试剂2用量30_110u L0 应用本专利技术总胆红素检测试剂盒测定样本中总胆红素的含量计算公式如下: 总胆红素=样本吸光度Λ AX标准液浓度/标准液吸光度AAtl 本专利技术具有积极的效果:与现有的总胆红素检测试剂盒相比，本专利技术特异性更好，抗干扰能力更强，线性更高等优点，适用于全自动生化分析仪，有较大的临床应用价值。 【附图说明】 为了使本专利技术的内容更容易被清楚地理解，下面根据具体实施例并结合附图，对本专利技术作进一步详细的说明，其中 图1是本专利技术总胆红素检测试剂盒测定总胆红素的实时反应曲线图。 图2是对比试剂盒测定总胆红素的实时反应曲线图。 图1、图2中横坐标为日立7060全自动生化分析仪反应监测的时刻，按10分钟分为31个点，每个点都有吸光度反应的时间点，纵坐标为吸光度Α。 【具体实施方式】 下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步详细说明，但本专利技术远不仅限于以下实施例。 实施例1 试剂I (Rl)各组份及其浓度范围: RlTris-HCl 缓冲液10mmol/L 表面活性剂0.lmmol/L 试剂2 (R2)各组份及其浓度范围如下: R2磷酸盐缓冲液5mmol/L 化学氧化剂0.2mmol/L 试剂I和试剂2的配置方法为常规方法，即试剂I和试剂2所述的组分分别加入蒸馏水后各自混合搅匀即可。 实施例2 试剂I (Rl)各组份及其浓度范围: RlTris-HCl 缓冲液100mmol/L 表面活性剂5mmol/L 试剂2 (R2) 各组份及其浓度范围如下: R2磷酸盐缓冲液40mmol/L 化学氧化剂6mmol/L 实施例2试剂盒的制备方法同实施例1。 实施例3 试剂I (Rl)各组份及其浓度范围: RlTris-HCl 缓冲液30mmol/L 表面活性剂0.8mmol/L 试剂2 (R2)各组份及其浓度范围如下: R2磷酸盐缓冲液12mmol/L 化学氧化剂0.8mmol/L 实施例3试剂盒的制备方法同实施例1。 实施例4 试剂I (Rl)各组份及其浓度范围: RlTris-HCl 缓冲液80mmol/L 表面活性剂3.lmmol/L 试剂2 (R2)各组份及其浓度范围如下: R2磷酸盐缓冲液12mmol/L 化学氧化剂3.2mmol/L 实施例4试剂盒的制备方法同实施例1。 实施例5 试剂I (Rl)各组份及其浓度范围: RlTris-HCl 缓冲液50mmol/L 表面活性剂2mmol/L 其中试剂2 (R2)各组份及其浓度范围: R2磷酸盐缓冲液18mmol/L 化学氧化剂2mmol/L 实施例5试剂盒的制备方法同实施例1。 应用本专利技术总胆红素检测试剂盒测定样本中总胆红素的测定方法如下:样本加试剂I混匀，3(T40°C反应3~5min后读取吸光度A1，加入试剂2混匀，3(T40°C反应3~5min后读取吸光度A2, Ak= A2-A10其中，样品用量8 μ L，试剂I用量200-300 μ L，试剂2用量30_110u L0 最后,应用计算公式: 公式总胆红素=样本吸光度Λ AX标准液浓度/标准液吸光度AAtl 得到本专利技术总胆红素检测试剂盒测定样本中总胆红素的含量。 下面结合图1、图2和表格对对比例的试剂盒与本专利技术试剂盒的性能进行比较。通过反应曲线、灵敏度、线性范围、准确性及各种干扰物等的影响比较这两种试剂盒。 对比例试剂盒其成分及配方为: 试剂1:Go本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种总胆红素检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒是由试剂1和试剂2组成的液体型双试剂，其中试剂1的各组分及浓度范围为：Tris‑HCl缓冲液 10~100mmol/L表面活性剂 0.1~5mmmol/L 试剂2的各组分及其浓度范围为：磷酸盐缓冲液 5~40mmol/L化学氧化剂 0.2~6mmol/L
【技术特征摘要】
1.一种总胆红素检测试剂盒，其特征在于:该试剂盒是由试剂I和试剂2组成的液体型双试剂，其中试剂I的各组分及浓度范围为: Tris-HCl 缓冲液l(TlOOmmol/L 表面活性剂0.l~5mmmol/L 试剂2的各组分及其浓度范围为: 磷酸盐缓冲液5~40mmol/L 化学氧化剂0.2^6mmol/L2.根据权利要求1所述的总胆红素检测试剂盒，其特征在于:所述试剂I的各组分及浓度范围为: Tris-HCl 缓冲液3(T80mmol/L 表面活性剂0.8-3.lg...
【专利技术属性】
技术研发人员：曾宪亮，
申请(专利权)人：南京澳林生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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