本发明专利技术提供了一种检测硫化氢(H2S)的试剂，它是5-曡氮荧光素醌。此试剂由5-氨基荧光素在亚硝酸钠和叠氮钠条件下，在醋酸和水中室温下反应2.5小时制得，原料便宜，反应条件简单，易于生产。本发明专利技术提供了硫化氢的定量检测方法，是基于5-曡氮荧光素醌，在乙腈/HEPES(pH7.4)的溶液中定量地检测硫化氢的含量。该检测方法，对硫化氢显示了高的灵敏性和选择性，检测过程简便、灵敏、快速，检测结果准确。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供了一种检测硫化氢(H2S)的试剂，它是5-曡氮荧光素醌。此试剂由5-氨基荧光素在亚硝酸钠和叠氮钠条件下，在醋酸和水中室温下反应2.5小时制得，原料便宜，反应条件简单，易于生产。本专利技术提供了硫化氢的定量检测方法，是基于5-曡氮荧光素醌，在乙腈/HEPES(pH7.4)的溶液中定量地检测硫化氢的含量。该检测方法，对硫化氢显示了高的灵敏性和选择性，检测过程简便、灵敏、快速，检测结果准确。【专利说明】—种试剂及其在硫化氢检测中的应用
本专利技术涉及硫化氢的检测技术，具体涉及一种试剂及其合成方法，以及这种试剂在检测硫化氢中的应用。
技术介绍
硫化氢具有臭鸡蛋味一直被视为环境有毒气体。然而，最近的研究表明H2S是除了两种众所周知的气体信号传送器一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)外的第三种具有细胞保护作用的内源性气体信号化合物。硫化氢在许多病症中具有保护作用:如血管生成、血管舒张、细胞凋亡、炎症调节、神经调制等。另一方面，细胞中异常硫化氢水平能引起许多疾病如阿尔茨海默氏病、唐氏综合征、糖尿病、肝硬化。这些新兴的生物学作用的发现导致人们对H2S的研究兴趣与日俱增。因此，要求发展快速、准确、可靠的方法来检测H2S,以便为更好地理解它的生物学功能提供有用的信息。近年来，一些仪器的分析技术已经发展到检测各种环境，医疗和细胞中的H2S。事实上，基于荧光的测定法，因为发射信号的快速、非破坏性、选择性、敏感的优点在活细胞，组织和生物体的各种分析物的荧光成像上有广泛的用途。在本专利技术中我们合成了一种新的化合物，5-疊氮荧光素醌，通过H2S将疊氮还原为胺基，化合物的荧光性质在反应前后的变化实现了硫化氢的快速检测。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种选择性高、水溶性好的定量检测硫化氢的试剂，以及该试剂在硫化氢检测中的应用。本专利技术提供的快速检测硫化氢的试剂和方法，是基于一种5-疊氮荧光素醌，在pH为7.4的HEPES溶液和乙腈混合溶液中定量地检测硫化氢的含量。该检测方法，对硫化氢显示了高的灵敏性和选择性，检测过程简便、灵敏、快速，检测结果准确。该试剂的结构式是:【权利要求】1.一种试剂，它是5-疊氮荧光素醌，其特征在于结构式为: 2.如权利要求1所述的一种试剂的合成方法，其特征在于步骤为:将5-氨基荧光素溶解在体积比2:1的醋酸和H2O的混合溶液中，冷却到0°C，然后加入NaNO2搅拌15分钟，再加入NaN3，在0°C反应I小时，升温到室温再反应I小时,悬浮液真空抽滤,固体用盐酸和水洗涤，真空干燥后，得到黄色的5-疊氮荧光素醌固体；5_氨基荧光素、NaNO2和NaN3的摩尔比 1:1.5:1.5。3.—种检测硫化氢的方法:其特征在于，步骤为: (1)、配制pH= 7.4、浓度为IOmM的HEPES缓冲溶液，配制2mM的5-疊氮荧光素醌的乙腈溶液； (2)、按体积比1000:1000:1，将HEPES缓冲溶液、乙腈溶液和5-疊氮荧光素醌的乙腈溶液加到干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着待测样的加入，531nm的荧光强度逐渐增强； (3)、用蒸馏水配制2mM的硫化氢溶液；把ImL的HEPES缓冲溶液、ImL的乙腈溶液Iμ L的5-疊氮荧光素醌乙腈溶液加到另一个荧光比色皿中，分别在加入硫化氢溶液的体积为0.2,0.4,0.6,0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8,2.0μ L 时，在荧光分光光度仪上测定 531nm 对应的荧光强度F为95、175、273、382、467、539、643、717、802、883，以硫化氢浓度为横坐标，以相对荧光强度F — Ftl为纵坐标绘制图，F0= 17，得到硫化氢浓度的工作曲线；线性回归方程为:F — F0 = -3.14+440c, c 的单位为 μ M ； (4)、将HEPES缓冲溶液lOOOuL、乙腈溶液1000μ L和5-疊氮荧光素醌乙腈溶液IuL加到干净的荧光比色皿中，用微量进样器吸取V μ L待测样品溶液，加入到此干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，将测得的荧光强度代入(3)的线性回归方程，得到浓度C，待测样品C_w= (2000+V^) μ LXcXKTfVVyL,即可求得硫化氢的浓度。【文档编号】G01N21/64GK103937491SQ201410194129【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年5月8日 优先权日:2014年5月8日 【专利技术者】霍方俊, 阴彩霞 申请人:山西大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种试剂，它是5‑曡氮荧光素醌，其特征在于结构式为：
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：霍方俊，阴彩霞，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西;14
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