本发明专利技术涉及基因工程领域，具体涉及烟粉虱MEAM1隐种瞬时感受器离子通道基因MEAM1 BtTrp及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明专利技术从烟粉虱MEAM1隐种中克隆到瞬时感受器离子通道TRP(MEAM1 BtTrp)基因的cDNA，并通过饲喂MED BtTrp基因dsRNA结果导致烟粉虱MEAM1隐种在高温胁迫下存活率显著降低。本发明专利技术结果对于明确烟粉虱MEAM1 BtTrp隐种温度感知机制有重要意义，期望为进一步研究烟粉虱的温度适应机理和日后通过温度适应性控制烟粉虱危害的方法提供依据。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及烟粉虱MEAM1隐种瞬时感受器离子通道基因MEAM1?BtTrp及其应用，其核苷酸序列如SEQ?ID?No.1所示。本专利技术从烟粉虱MEAM1隐种中克隆到瞬时感受器离子通道TRP(MEAM1?BtTrp)基因的cDNA，并通过饲喂MED?BtTrp基因dsRNA结果导致烟粉虱MEAM1隐种在高温胁迫下存活率显著降低。本专利技术结果对于明确烟粉虱MEAM1?BtTrp隐种温度感知机制有重要意义，期望为进一步研究烟粉虱的温度适应机理和日后通过温度适应性控制烟粉虱危害的方法提供依据。【专利说明】烟粉虱MEAM1隐种瞬时感受器离子通道基因MEAM1 BtTrp及其应用
本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及烟粉虱MEAMl隐种瞬时感受器离子通道基因MEAMl BtTrp及其应用。
技术介绍
在动物体中，许多细胞表面受体和离子通道的感受器随着环境变化的刺激影响动物行为。在众多离子通道中，瞬时感受器阳离子通道(transient receptorpotential, TRP)最早发现于果蝇的视觉系统，几乎存在于每个器官。昆虫温度的感知与TRP有关，TRP是位于细胞膜上的一种非选择性阳离子通道跨膜蛋白质，当其被激活时，允许包括钙离子在内的阳离子进行跨膜运输。TRP作为感受器中的门控分子，起到外部环境和神经系统中介的作用，可以将温度刺激、化学刺激以及机械刺激等转化成内向电流。已有研究表明，TRP是生物感知外界温度的关键通道。基于TRP对生物体感知的重要作用，推测其是粉虱类进行温度适应并广泛扩散暴发的重要基础。粉風属于半翅目(Hemiptera),粉風科(Aleyrodidae),是一类体型微小的植食性刺吸类害虫，主要集中在热带和亚热带地区。至2007年，记载的粉虱有1556种，其中报道最多、为害最为严重的是烟粉風Bemisia tabaci Gennadius。烟粉風是一个包含30个以上隐种的物种复合体。例如，MEAMl (Middle East Asia Minorl)具有很强的入侵性，属于全球入侵种，起源于中东-小亚细亚，现已广泛分布于世界各地，号称“超级害虫”，给许多国家和地区的农作物造成了毁灭性的灾害。温度是决定物种分布和扩散区域的重要影响因子，由此可见，对温度胁迫具有较高的适应能力是烟粉虱MEAMl隐种能广泛分布于世界各地关键因素之一。随着全球温度的变化，烟粉虱MEAMl隐种在不同地理环境下的成功适应，已经广泛引起了人们对其入侵机制的理论探讨，对于其温度适应性的分子机制更是近几年来的研究热点之一。昆虫温度耐受性的获得与热激蛋白(heat shock proteins, HSP)的分子伴侣作用有关，热激蛋白在生物热胁迫生态适应和进化上起着重要作用。前期研究表明热激蛋白基因在烟粉虱MEAMl隐种的温度耐受性中起关键性作用，为更好的理解烟粉虱MEAMl隐种温度适应能力，研究烟粉虱MEAMl隐种怎样感知外界温度并将其传递至体内的温度感知机制尤为重要。因此，研究烟粉虱MEAMl隐种的TRP基因及其在温度胁迫下的作用是回答其温度适应分子机制的核心内容之一。RNA干扰(RNA interference, RNAi)现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将与靶基因的转录产物mRNA存在同源互补序列的双链RNA(doublestrand RNA, dsRNA)导入细胞后能特异性地降解该mRNA，从而产生相应的功能表型缺失。RNAi广泛存在于生物界，从低等原核生物到植物、真菌、无脊椎动物、哺乳动物中均发现有此种现象。近些年，RNAi技术在昆虫研究上得到越来越多的应用，通过RNAi技术沉默昆虫体内某些基因，使昆虫的某些能力增强或丧失，也能在特定时间抑制其功能基因表达使昆虫的发育停留在某个阶段，进而达到利用或防治其危害的目的。RNAi常用的导入方法有浸泡、饲喂、电穿孔、注射、病毒感染、干细胞移植、转基因等。在昆虫中，常用注射法和饲喂法进行RNAi效应的研究，即将目的基因的dsRNA或SiRNA导入昆虫体内，进而实现干扰。由于烟粉虱个体体积小，注射dsRNA不易操作、费时等限制，而饲喂dsRNA具有简便、易于操作等特点而在烟粉虱研究中得以应用。本专利技术从烟粉虱MEAMl隐种中克隆到MEAMl BtTrp基因的cDNA，并提供MEAMlBtTrp基因cDNA的克隆方法；并通过饲喂MEAMl BtTrp基因dsRNA，进而导致烟粉虱MEAMlBtTrp隐种成虫在高温胁迫下死亡率显著增加。本专利技术结果为明确MEAMl BtTrp基因在烟粉虱MEAMl温度感知中的作用奠定基础，期望为进一步研究烟粉虱MEAMl的温度适应机理和日后通过温度适应性控制烟粉虱危害的方法提供依据。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供烟粉虱MEAMl隐种瞬时感受器离子通道基因MEAMl BtTrp0本专利技术的再一目的是提供上述烟粉虱MEAMl隐种瞬时感受器离子通道基因MEAMlBtTrp的应用。 根据本专利技术的MEAMl BtTrp基因的cDNA全长核苷酸序列如SEQ ID N0.1所示:ATGAAGCCGACGGAATCGAAGGAGGACCTTCTGGGGTCGAAGGAAAACCTAAAAAATCCCCGAGAGTCCTTGCAGTCCACCGGCGGCGAGGTTGCCCTCTCCCAAATCGAGAAAAGGTTCCTCTTGCTCAGCGAAAGGGGAGATATCGCCTCTGTCAAAAGGATAATCGCCGAGCACAAAGATCACCCAGAGCTATTGAACATCAATTGCGTTGATCCTCTGAATAGGTCAGCACTCATCGCAGCGATCGAAAATGAAAATATAGAGTTAATAAGAGTCCTCCTCGAACTTGGGATTGAAGTCAAGGATGCTCTTCTACATGCAATTAAGGAAGAGTACGTTGAAGCTGTGGAGATTCTACTTGAATGGGAAGAAAAAATCCACAAACCTGGGCAGCCTTATAGTTGGGAAGCCGTCGACAGGAGCTCTTCGACATTTACACCGGACATAACACCGCTCATATTGGCTGCTCATATGAACAATTACGAAATCCTGAAAATTTTGTTGGATCGAGGGGCCACACTCCCCGTGCCACACGATGTTAGGTGTGGCTGCGACGAATGTGTAACTTCAAGTGAGCAGGATTCTTTGCGACATTCACAAGCTCGGATCAACGCGTACAGAGCTTTAACCGCACCATCCCTCATAGCCCTCTCTTCCAGGGATCCCCTCCTTACCGCCTTCGAGTTATCATGGGAGCTGCGCAGACTCAGCAAGATGGAAGCGGAATTCCGCTCTGAATATAATGAAATGAGAGGTATTTGTCAGACATTTGCAACCTCCTTGCTAGACCACGCGCGAACCTCGTATGAACTGGAGGTGATGCTTAATCATAATCCTGATGGAGAGTCGTGGGAACCAGGAGAGAGGCAAAC本文档来自技高网...
【技术保护点】
烟粉虱MEAM1隐种瞬时感受器离子通道基因MEAM1 BtTrp，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吕志创，李倩，万方浩，周忠实，郭建英，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11
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